血袋及血液标本标识课件.ppt

第第4 4部分部分 血液检测血液检测 血站技术操作规程（血站技术操作规程（20122012版）版）苏州市中心血站苏州市中心血站 曹谊曹谊 2012-05-242012-05-24 学习内容学习内容n1.2012版技术规程血液检测部分概要n2.2012版技术规程血液检测部分内容介绍第4部分 血液检测附录B 血液检测方法的确认 附录D 血液检测室内质控方法 附录E 微板法ABO血型定型试验 学习内容1 2012版技术规程 血液检测部分 -概要血站技术操作规程（血站技术操作规程（2012版）版）目录目录1 献血者健康检查2 全血采集3 血液成分制备4 血液检测5 血液隔离与放行6 质量控制附录A 献血者血红蛋白检测（硫酸铜目测法）附录B 血液检测方法的确认附录C 血液检测试剂（酶联免疫/核酸试剂）进货验收与放行记录表附录D 血液检测室内质控方法附录E 微板法ABO血型定型试验附录F 血液质量控制检查方法附录G 血袋标签确认方法附录H 血站使用的强制检定工作计量器目录 第第4部分部分 血液检测血液检测n1 可经输血传播感染的检测项目及检测方法可经输血传播感染的检测项目及检测方法n2 血液检测试剂血液检测试剂n3 仪器设备使用要求仪器设备使用要求n4 实验室信息管理系统实验室信息管理系统n5 血液检测标本血液检测标本n6 试验操作试验操作n7 试验性能监控试验性能监控n8 试验结果的判定试验结果的判定n9 ELISA初次试验有反应性标本的重复试验初次试验有反应性标本的重复试验n10 核酸初次试验有反应性的进一步处理核酸初次试验有反应性的进一步处理n11 血型检测血型检测n12 血液检测最终结论的判定血液检测最终结论的判定n13 血液检测结论的报告和利用血液检测结论的报告和利用资源管理的资源管理的细化要求细化要求过程控制的过程控制的细化要求细化要求检测项目及检测项目及方法方法 血站技术操作规程（2012版）参考标准参考标准n血站管理办法n血站质量管理规范n血站实验室质量管理规范n WHO捐献血液中输血传播传染病的筛查建 议（2009）n WHO采供血机构GMP指南（2011）中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程 (血站部分血站部分)1997)1997版版 规程框架和内容的不适宜性规程框架和内容的不适宜性97 版第四章 化验操作规程 第一节化验操作要求第二节乙型肝炎表面抗原酶联免疫法测第三节丙型肝炎病毒抗体酶联免疫法测第四节艾滋病病毒/抗体酶联免疫法检测第五节梅毒抗体检测：USR/RPR/TRUST/TPHA第六节ALT检测：快速法、比色法、速率法第七节ABO血型鉴定（纸板法和磁板法）12版 第4部分 血液检测 4.1 可经输血传播感染的检测项目及检测方法可经输血传播感染的检测项目及检测方法 4.2 血液检测试剂血液检测试剂 4.3 仪器设备使用要求仪器设备使用要求 4.4实验室信息管理系统实验室信息管理系统 4.5 血液检测标本血液检测标本 4.6 试验操作试验操作 4.7 试验性能监控试验性能监控 4.8 试验结果的判定试验结果的判定 4.9 ELISA初次试验有反应性标本的重复试验初次试验有反应性标本的重复试验 4.10 核酸初次试验有反应性的进一步处理核酸初次试验有反应性的进一步处理 4.11 血型检测血型检测 4.12 血液检测最终结论的判定血液检测最终结论的判定 4.13 血液检测结论的报告和利用血液检测结论的报告和利用检测项目检测项目及方法及方法资源管理的资源管理的细化要求细化要求过程控制的过程控制的细化要求细化要求 中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程 (血站部分血站部分)1997)1997版版 检测检测方法的不滞后性方法的不滞后性n97版检测方法描述以手工操作为基础，没有全自动操作的质量要求；版检测方法描述以手工操作为基础，没有全自动操作的质量要求；nHBsAg 1ng的检测灵敏度已不适用；的检测灵敏度已不适用；n抗抗-HIV为第二代检测方法要求，现在是第四代方法；为第二代检测方法要求，现在是第四代方法；n梅毒抗体检测方法为非特异性检测方法，而不是目前采用的梅毒抗体检测方法为非特异性检测方法，而不是目前采用的EIA双抗原夹心法；双抗原夹心法；nALT为为快速法（酮体酚法）、比色法（赖氏法）、速率法，无干化学法快速法（酮体酚法）、比色法（赖氏法）、速率法，无干化学法nABO血型检测方法定义为玻片法，没有涵盖适用于全自动血型分析的微板法。

血型检测方法定义为玻片法，没有涵盖适用于全自动血型分析的微板法n不包括不包括NAT要求要求中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程 (血站部分血站部分)1997)1997版版 新版新版GBGB的不协调性的不协调性不适宜性不适宜性n97版规程与新版规程与新GB18467不能相互补充不能相互补充GB18467 2011献血者健康检查要求献血者健康检查要求是针对献血者献血前的业务行为是针对献血者献血前的业务行为要求n8 献血前血液检测献血前血液检测n8.1血型检测：血型检测：ABO血型（正定型）血型（正定型）n8.2血红蛋白（血红蛋白（Hb）测定：男）测定：男120g/L；女；女115g/L如采用硫酸铜法：如采用硫酸铜法：男男1.0520，女，女1.0510n8.3单采血小板献血者：除满足单采血小板献血者：除满足8.2外，还应同时满足：外，还应同时满足：na)红细胞比容（红细胞比容（HCT）：）：0.36nb)采前血小板计数（采前血小板计数（PLT）：）：150109/L且且450109/Lnc)预测采后血小板数（预测采后血小板数（PLT）：）：100109/L以上不包含血液检测程序以上不包含血液检测程序中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程 (血站部分血站部分)1997)1997版版 新版新版GBGB的不协调性的不协调性不适宜性不适宜性n97版规程与新版规程与新GB18469的要求不相适应的要求不相适应GB18469 2011全血成分血质量要求全血成分血质量要求血液安全性检测要求血液安全性检测要求n血型检测血型检测ABO血型定型试验结果正确。

血型定型试验结果正确RhD血型定型试验结果正确血型定型试验结果正确n人免疫缺陷病毒（人免疫缺陷病毒（HIV-1和和HIV-2）标志物筛查试验结果阴性：）标志物筛查试验结果阴性：HIVAb(1+2)HIVAg/AbHIV RNA中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程 (血站部分血站部分)1997)1997版版 新版新版GBGB的不协调性的不协调性不适宜性不适宜性GB18469 2011全血成分血质量要求全血成分血质量要求血液安全性检测要求血液安全性检测要求n乙型肝炎病毒（HBV）标志物筛查试验结果阴性HBsAgHBV DNAn丙型肝炎(HCV)病毒标志物筛查试验结果阴性HCV AbHCV RNAn丙氨酸氨基转移酶检测合格，采用1种试剂（速率法）进行1次检测，检测结果合格无酮体酚法）n梅毒螺旋体标志物筛查试验结果阴性，具体标志物及其检测方法为采用2个不同生产厂家的ELISA试剂检测梅毒特异性抗体无非特异方法）血站技术操作规程（2012版）血液检测部分突出变化血液检测部分突出变化n血液检测部分与献血前献血者快速检测部分分开血液检测部分仅针对采集后的全血和成分血检测过程提出管理和技术要求n血液检测部分包含了检测前、中、后的过程控制要求。

明确了标本采集、保存、运输、交接等环节的控制要求；明确了输血相关感染检测的方法和程序；增加HIV抗原检测选择；增加HCV抗原检测选择；增加NAT检测程序；增加血型自动化检测方法选择要求删除TP非特异性试验方法；删除ALT快速法n将资源管理，如设备、试剂、LIS的部分管理要求细化，纳入规程学习内容2 2012版技术规程 血液检测部分 -内容介绍4.1可经输血传播感染的检测项目及检测方法n4.1.1人类免疫缺陷病毒（HIV）感染标志物及其检测方法有2种选择，可任选其中1种：a.血清学+血清学（3+3，3+4，4+4）b.血清学+NATHIVAb(1+2)+HIVAg/Ab；HIVAb(1+2)1+HIVAb(1+2)2；HIVAg/Ab1+HIVAg/Ab2HIVAb(1+2)或HIVAg/AbHIV RNAn4.1.2 乙型肝炎病毒（HBV）感染标志物及其检测方法有2种选择，可任选其中1种：a.血清学+血清学 b.血清学+NATHBsAg1 HBsAg2HBsAgHBV DNA4.1可经输血传播感染的检测项目及检测方法n4.1.3 丙型肝炎病毒（HCV）感染标志物及其检测方法有2种选择，可任选其中1种：a.血清学+血清学（3+3，3+4，4+4）b.血清学+NATHCVAb+HCVAg/Ab；HCVAb1+HCVAb2；HCVAg/Ab1+HCVAg/Ab2HCVAb或HCVAg/AbHCV RNAn4.1.4 ALT采用2种方法（干化学法和速率法）进行2次检测，分别在采血前和采血后进行。

n4.1.5 梅毒螺旋体感染标志物及其检测方法：采用2个不同生产厂家的ELISA试剂检测梅毒特异性抗体血清学+血清学ALT检测检测n12版：1.9 献血前检测方法 ALT采用干化学法/速率法 4.1.4 ALT采用2种方 法（干化学法和速 率法）进行2次检 测，分别在采血前 和采血后进行97版初筛：酮体粉法：阴性血液检测：赖式法：25单位0510152025306065days103106103106103106viral loadgeq/ml354070day 38day 651 geq/20 mlday 3day 21eclipse phase隐蔽期蔽期day 15day 24day 6HBV-DNAHCV-RNARNAHIV-AgAnti-HIVAnti-HCVHBsAg通过通过NATNAT检测得到的完整的感染窗口期检测得到的完整的感染窗口期 day 8Infectious 易传染的below infectivity threshold?在易传染域值以下HIVHIV感染早期病毒血症感染早期病毒血症HIV RNA(plasma)HIV Antibody110102030405060708090100HIV p24 Ag1622Ramp-up viremiaDT=21.5 hrs上升期病毒血症上升期病毒血症检出出时间 1st gen2nd gen3rd genp24 Ag EIA-HIV MP-NAT-HIV ID-NAT-Peak viremia:106-108 gEq/mL 峰峰值病毒血症病毒血症“blip”viremia暂时性病毒血症性病毒血症Viral set-point:102-105 gEq/mL病毒病毒调定点定点感染初期出现的感染初期出现的HCVHCV病毒标志物病毒标志物HCV RNAAnti-HCV EIAs1st gen 150 d 2nd gen 80 d 3rd gen 70 d0102030405060708090100 Ramp-up phase上升期上升期 DT 检出出时间=17.7 hrsPlateau phase viremia:105-108 gEq/mL平台期病毒血症平台期病毒血症Pre-ramp-up上升前期上升前期blip viremia 暂时的病毒血病的病毒血病-HCV Ag EIA-HCV MP-NAT-HCV ID-NATALTViral set-point:102-107 gEq/mL病毒病毒调定点定点 Hollinger 2008Hollinger,2008NATNAT检测技术特点检测技术特点n灵敏度高。

用于WP标本检出n标本质量控制要求高，否则产生假阴性结果采血管：无RNAase标本保存温度标本运输温度n容易产生污染：尤其是手工操作来自阳性标本来自扩增产物来自试剂污染n对实验室设施和环境要求严格实验室温、湿度控制实验室布局和气流走向n试剂价格昂贵HBV标志物：血液筛查n nHBsAgHBsAg 过量的病毒抗原过量的病毒抗。