女贞子的蒸制工艺探讨.doc

女贞子的蒸制工艺探讨 熊赣平 王艳伟 杨中林* 中国药科大学中药学院(南京 210038) 摘 要:目的 筛选女贞子的蒸制工艺参数方法 比色法测定女贞子蒸制品中齐墩果酸的含 量,采用正交设计对蒸制 工艺进行优选结果 用黄酒、酒量为 20%、110e 温度下,蒸制 4 h 为最佳工艺参数结论 所得工艺参数有实际应用价值 关键词:蒸女贞子;齐墩果酸;比色法;正交设计 女贞子系木犀科女贞 Ligustrum lucidumAit.的 干燥成熟果实,能补益肝肾,清虚热,明目,是临床常 用中药现代研究表明,女贞子中主要含有齐墩果 酸,具有保肝,抗癌,延缓衰老,促毛囊生长,抑制血 小板聚集等作用[1]女贞子入药有生品、酒蒸品或 酒炖品等,2005 版 5 中国药典 6 收载了洒蒸品及酒炖 品据文献报道,女贞子经蒸制后,齐墩果酸等成分 易溶出,所以女贞子蒸制有其合理性[2]目前女贞 子蒸制方法主要是酒蒸,其蒸制有九蒸九晒,蒸制 2、3、4、8、12 h 不等,甚至 3 d[3],有蒸透、蒸至黑润[4] 等要求,蒸制的辅料有黄酒和白洒,同时也有不加辅 料的清蒸品[5]因此建立规范的女贞子炮制方法是 亟待解决的问题。

我们以正交试验设计考察了蒸制 时间、酒的种类、酒的用量、蒸制温度 4 个因素及其 不同水平,用比色法[6]测定齐墩果酸的含量变化,以 得出最佳的酒蒸工艺参数 1 仪器和药品 111 仪 器 721 型紫外-可见分光光度计(上海第三仪器 厂);RE52CS-2 型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器 厂);LA204 型电子天平(常熟市衡器厂);LXJ2 型离 心机(上海医用分析仪器厂) 112 药 品 齐墩果酸(中国药品生物制品检验所);无水乙 醇(分析纯);黄酒(江苏丹阳产,酒精度\1110%,v/ v);白酒(四川绵竹产,酒精度:52%,v/v);女贞子 (购于南昌开心人大药房,经专家鉴定为木犀科女贞 Ligustrum lucidumAit.的干燥成熟的果实) 2 方法与结果 211 蒸制女贞子 正交实验每份投女贞子 50 g,加入规定量的酒 后,拌匀,闷 30 min 后,于蒸锅内,蒸至规定时间取 出,晒干,备用蒸制时间、加酒量、酒的种类、蒸制 温度四个因素及其水平见表 1 按 L9(34)正交实验工作安排表进行 212 标准曲线的制备精密称定 110 mg 的齐墩果酸,无水乙醇溶解于 10 ml 的量瓶中,加无水乙醇至刻度,摇匀。

精密吸 取 010、012、014、016、017、018、019 ml 于具塞试管(编 号为 0 至 6)中水浴挥干乙醇后,精密加入 5%香 草醛-冰醋酸 012 ml、高氯酸 018 ml,水浴 70e 恒温 加热 15 min,取出放凉,精密加入乙酸乙酯 410 ml, 摇匀后以 0 号管为空白,用 721 紫外分光光度计于 560 nm 波长处测定吸收值(A),以浓度(C)对吸收 值作标准曲线为:C=191703A+11498,相关系数 r =019992,线性范围 4~18Lg#ml-1 表 1 因素水平表 水平 因素 A 蒸制时间 (h) B 加酒的量 (%) C 酒的种类 D 蒸制温度 (e) 1 2 10 白洒 100 2 4 20 黄酒 110 3 6 30 不加辅料 120 213 方法学考察 21311 稳定性 取样品液,按照/含量测定 0 项下, 依次在 0、15、30、45、60 min 测定吸收值,RSD 为 1185% 21312 重现性 取样品液,按照/含量测定 0 项下测 定吸收值,RSD 为 0198% 21313 加样回收率 取样品液 10Ll 点于硅胶 G 薄 层板上,同时在相同位置点已知浓度的标准液 10 Ll,按照/含量测定 0 项下测定吸收值,回收率为 9716%,RSD 为 1152%。

214 样品测定 21411 水分的测定 取炮制后的药材,粉碎,过 30 目筛,按 2005 年 5 中国药典 6 附录 Ù 测定[8],数据见 表 2 21412 样品液的制备[7] 精密称取约 2 g 蒸制品, 加 100 ml 无水乙醇回流提取 30 min,放冷,滤过,药 渣加同样量的乙醇,回流,再重复 2 次,合并 3 次滤 液,蒸干,残渣加无水乙醇,稍加热使之溶解,滤进 5 ml 的容量瓶中,加无水乙醇至刻度备用 21413 样品液的含量测定[7] 精密量取样品液 10 Ll 和齐墩果酸标准液 2Ll,点于硅胶 G 薄层板上,以 环己烷-丙酮-乙酸乙酯(5B2B1)为展开剂,展至约 11cm 左右,取出,晾干后,喷 10%的浓硫酸乙醇液,在 100e 烘至斑点清晰[7],将含有齐墩果酸的斑点刮 入具塞试管,精密加入 5%香草醛-冰醋酸 012 ml、高 氯酸 018 ml,放冷,加乙酸乙酯至 5 ml,离心,取上清 液,并随行空白溶剂,于 560 nm 处测定吸收值,见表 2,结果分析见表 3,方差分析见表 4 表 2 测定的结果 序号取样量含水量 (%)吸收值齐墩果酸含量(%) 1 210005 813 014195 1133 2 210008 817 014544 1143 3 210010 716 013971 1126 4 210000 810 016149 1185 5 210008 718 015606 1170 6 210008 810 015965 1180 7 210011 711 013356 1109 8 210012 712 013804 1121 9 210010 710 013964 1125 吸收值为平行测定 3 次的平均值 根据标准曲线,得出浓度 C,代入下列计算公 式,计算各样品中齐墩果酸的含量。

样品中齐墩果酸的含量计算公式: C@V0@V1@10-6 V2@10-3@W(1-Xi)@100% V0 为在试管中的溶液体积;V1 为定容的体积 数;V2 取样的体积数;Xi 样品的含水量(i=1,2,3,, 8,9);W 为样品的质量 结果:酒蒸女贞子最佳的工艺为用黄酒,酒量为 20%,110e 下蒸制 4 h 3 讨 论 女贞子中有效成分之一是齐墩果酸、熊果酸等 三萜类成分,酒蒸可以促进齐墩果酸等有效成分的 溶出,因此酒蒸有其合理性为了最大限度的使齐 墩果酸等有效成分的溶出,保证女贞子用药的有效 性,对其蒸制工艺条件进行优选具有意义 表 3 L9(34)正交实验结果 序号 A 蒸制时间 B 加酒量 C 酒的种类 D 蒸制温度齐墩果酸含量 (%) 1 1 1 1 1 1133 2 1 2 2 2 1143 3 1 3 3 3 1126 4 3 1 2 3 1185 5 2 2 3 1 1170 6 2 3 1 2 1180 7 3 1 3 2 1109 8 3 2 2 3 1121 9 3 3 1 1 1125 K14102 4127 4134 4128E=12192 K25135*4134*4153*4132* K33155 4131 4105 4132 R 1180 0107 0148 0104 CT=18155 K2116116 18122 18184 18133 K2228161 18184 20152 18166 K2312160 18159 16140 18166 A2B2C2D2 Q=(K21+K22+K23)/3 19113 18155 18159 18155 S=Q-CT 01581 01004 01042 01003 *P<0105 表 4 结果的方差分析 方差来源离差平方和 S 自由度均方 F 显著性 A 01581 2 012905 126130 ** B 01004 2 010020 0187 C 01042 2 010210 9113 ** D 01003 2 010015 0165 误差 e 01021 9 010023 (注:误差 e 是 9 组试验平行重复 2 次所得。

F1-0105(2,9)=3118, F1-0101(2,9)=8102,*P<0105,**P<0101) 女贞子的蒸制工艺按 2005 年版 5 中华人民共和 国药典 6 记载:/酒女贞子照酒炖法或酒蒸法(附录 Ò D)[9]炖至酒吸尽或蒸透 0工艺叙述不够具体,有 人对蒸制工艺进行了研究[2,3,5],但并未全面考察女 贞子酒蒸工艺中的酒的种类、酒量、蒸制温度、时间 等因素本次试验综合考察了上述几个因素及其不 同水平,采用正交设计试验,得出最佳的工艺为用黄 酒,酒量为 20%,110e 下蒸制 4 h,从而为女贞子蒸 制提供了可控的工艺参数,为女贞子酒蒸品规范化 研究提供了基础 参考文献 1 宋立人主编.中华本草[M].第 6 册,上海:上海科技出版社, 1999:5495~54971 2 李曼玲,刘美玉.建立模拟炮制样品阐明女贞子酒制意义[J].中国中药杂志,1995,20(8):471~4721 3 王新功,吕华瑛,李 菁.不同蒸制时间对女贞子中齐墩果酸含 量的影响[J].山东医药工业,2002,21(4):53~541 4 叶定江主编.中药炮制学[M].上海:上海科技出版社,1996:2381 5 梁龙海,成秉慧.女贞子不同炮制品的实验[J].新疆中医药, 1998,16(4):37~381 6 黄湘兰,彭拓华.正交试验对女贞子提取工艺的优选[J].中药 材,2000,23(10):644~6451 7 国家药典委员会编.中华人民共和国药典[S].一部,北京:化学 工业出版社,2005:311 8 国家药典委员会编.中华人民共和国药典[S].一部,北京:化学 工业出版社,2005:附录 ÙH1 9 国家药典委员会编.中华人民共和国药典[S].一部,北京:化学 工业出版社,2005:附录 ÒD1。