外周血单核细胞HLA-DR表达与脓毒症的关系【临床医学论文】.doc

临床医学论文-外周血单核细胞 HLA-DR 表达与脓毒症的关系作者：王兆丰 黄俊军 陈松劲【关键词】 细胞脓毒症（sepsis）是指由感染引发的全身炎症反应综合征可能并不像以往的“过度炎症反应”，更多的是由于“过度抑制”参与其中；有学者［１］认为在初期炎症反应之后会导致单核细胞失活所致的免疫功能不全，称之为免疫麻痹1 资料与方法1.1 一般资料 2006 年 1 至 6 月健康体检人群为对照组 20 例ICU 病房患者（包括创伤 烧伤、大手术和胰腺炎等）67 例，男 39 例，女 28 例将其分为 A 组（非脓毒症）、B 组（符合脓毒症但未达到严重脓毒症诊断标准）、C组（符合严重脓毒症诊断标准）诊断标准：脓毒症、严重脓毒症、MODS 的诊断标准参考美国胸科医师协会（ACCP）和美国危重病医学会联席会议制定的诊断标准［２］1.2 试剂仪器 流式细胞仪采用美国 COULTER-EPICS-XL 型四式荧光流式细胞仪试剂：法国产，CD14-FITC，HLA-DR-PE，同型对照：IgG1-FITC、IgG1-PE1.3 标本采集 所有待测标本均为当天新鲜采集，含 EDTA-K2 的真空采血管采集静脉血抗凝全血。

1.4 检测方法 对照管加入 10μl IgG1-FITCI、IgG1-PE 10μl，测定管加入 10μl CD14-FITC 和 10ul HLA-DR-PE，分别加入 100 μl 的 EDTA 抗凝新鲜全血，室温避光孵育 20min，用 CoulterQ-PREP 溶血仪溶血后上机单核细胞HLA-DR 表达百分率［HLA-DR（+）/CD14（+）］及其平均荧光强度［HLA-DR（+）/CD14（+）MFI］　　1.5 统计学处理 计量资料均数±标准差(x±s)表示，两样本均数间比较采用独立样本 t 检验2 结果各组基本资料见表 1；ICU 病房患者与健康体检人群外周血比较见表2A、B、C 组外周血比较见表 3表 1 各组基本资料（略）与对照组比较*P0.05表 2 健康体检人群与 ICU 病房患者比较（略）与健康体检人群比较*P0.053 讨论ICU 病房患者多为创伤、烧伤、大手术等，死亡的主要原因是细菌感染和MODS，其原因可能与免疫系统受损引起的细菌易感性增加有关,作者选择健康人群对照组与研究组年龄、性别、吸烟史无差异，但研究组 IL-6 和 WBC、CRP 水平较对照组均有明显升高（P<0.01）,表明 ICU 病房患者在疾病发生发展过程中细胞因子有过多释放，机体存在着过度的炎症反应；但 C 组和 B 组 IL-6 和WBC、CRP 水平比较并无差异，研究组 HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI 较健康人群对照组有明显下降（P<0.01），且 C 组与 B 组比较显着降低（P<0.01），提示 HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI 是比 IL-6 和WBC、CRP 更早期的、敏感的、可预见的指标。

单核细胞在抗细菌感染的免疫应答中起关键作用，他不仅可以释放趋化因子、细胞因子、还可表达 MHC-II 类抗原，单核细胞诱导抗原特异性淋巴细胞活化的能力下降将削弱集体清除外来抗原的能力HLA-DR 抗原在人类单核细胞是最常见的表达区域［３］ HLA-DR 与单核巨噬细胞处理抗原后向淋巴细胞提呈抗原的能力有直接关系能够作为定量的诊断免疫抑制检查，目前可能首推CD14(+)单核细胞的 HLA-DR［４］本研究表明 ICU 病房患者与正常体检人群比较外周血 HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI 显着降低（P<0.01）其中 52 例患者（占 78％）入住 ICU 时的外周血单核细胞 HLA-DR 表达率低于 70%，表明 ICU 患者多有不同程度的免疫麻痹或免疫紊乱提示 ICU 病房患者有必要常规检测外周血 HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI 作为监测免疫抑制的定量指标2１例患者（占 31％）入住 ICU 时的外周血 HLA-DR(+)/CD14(+)＜30%，其病死率达 71％提示 HLA-DR(+)/CD14(+)严重低下患者处于免疫麻痹状态，病情重、预后差。

作者认为采用流式细胞术检测 HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI，具有准确、简便、快速等优点此方法还能够定量的诊断免疫抑制，HLA-DR(+)/CD14(+)＜70%提示患者存在一定免疫麻痹，HLA-DR(+)/CD14(+)＜30%作为严重脓毒症的诊断参考指标参考文献】1 RichaRd S,Hotchkiss MD ,IRene E,et al. The pathophysiology and treatment of sepsis.New Engl J Med,2003，348:138.2 Bone RC,Balk RA,Cerra FB,et al.Definitions for sepsis and organ failure and guidelines for the use of innovative the rapies in sepsis.AmeRican college of chest physician society of cRitical care medicine consensus conference.chest,1992,101:1644. 3 Johnston RB J. Current concepts:immunology:monocytes and macrophages.N Engl J Med,1988,318(6):747～752.4 林洪远. CD14(+)单核细胞人类白细胞抗原 DR 预测脓毒症预后及指导免疫调理治疗的初步临床研究. 中国危重病急救医学，2003，15（3）：135～138.。