TLC常用试剂配制及显色方法.docx

常用试剂配制及显色方法（一） 通用显色剂1． 重铬酸钾——硫酸 一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色喷洒剂：5克重铬酸钾溶于100ml, 40%硫酸中喷洒后加热至150*斑点出现2． 碘：检查一般有机物（1） 碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层 放入缸内数分钟即显色,有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿度,可提高 显色的灵敏度2） 0.5%碘的氯仿溶液,取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色 3． 碘——碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）4． 5%——磷钼酸乙醇溶液：喷后 120oC 烤,还原性物质显兰色,再用氨气熏,则背景 变为无色5. 20%磷酸乙醇溶液：喷后120还原性物质显兰色6. 碱性高锰酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色溶液1:1%高锰酸钾溶液溶液 II： 5%碳酸钠溶液溶液I和溶液II等量混合使用7. 中性0.05%高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色8. 硝酸银 氢氧化铵（Tollen'-zoffaronl）试剂，喷后105oC烤5~10分钟，还原性物 质显黑色溶液I： 0.1N硝酸银溶液 溶液II：氢氧化铵溶液。

临用前溶液I和溶液II以1： 5混合注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银9. 硝酸银——高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色溶液I： 0.1N硝酸银溶液：2N氢氧化铵溶液：2N氢氧化钠（1： 1： 2）临用前配制 溶液II：高锰酸钾0.5g,碳酸钠1g,加水成100ml溶液，临用前溶液I和溶液II等量 混合10. 四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色溶液I： 0.5%四唑兰甲醇溶液 溶液II： 6N氢氧化钠溶液临用前溶液I和溶液II 等量混合11. 铁氰化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰色加深溶液I： 1%铁氰化钾溶液 溶液II： 2%三氯化铁溶液临用前溶液I和溶液II等量混合12. 浓硫酸：甲醇（1： 1）溶液，或5%硫酸的乙醇溶液，喷后lOOoC烤15分钟，各种 不同物质显不同颜色13. 萤光显色剂溶液：试喷以下一溶液，不同的物质财富在萤光背景上可能显黑色或其 他萤光斑点A： 0.2%2.7——二氯萤光素乙醇溶液B： 0.01 萤光素乙醇液C： 0.1%桑色素乙醇溶液D： 0.05罗丹明B乙醇溶液E：萤光素一溴，检不饱和化合物 1） 0.1%萤光素乙醇溶液（2） 5%溴的 CCL4 溶液。

喷洒（1）以后，放置（2）溶液的缸内，可在UV光下检查萤光，萤光素与溴化合成曙 红（ensln）（无萤光），而光饱和化合物则与溴加成，保留了原来的萤光；若点样量较多, 则成黄色 斑点，底板成红色14. 碱式醋酸铅试剂（可做喷洒或沉淀试剂，多种有机化合物均反应）取Pbo14g置乳钵内，加蒸馏水10m 1,研后成糊状后，倾入玻璃瓶中，乳钵用10ml 蒸馏水洗净，洗液并入瓶中，加醋酸铅溶液（取醋酸铅22g，加蒸馏水70ml制成）70m1, 用力振摇，放置七天，滤过，并自滤器中添加适量新沸过的冷蒸馏水使成100ml即得二）生物碱显色剂通用显色剂：1. 改良碘化铋钾（Dragendorff ）试剂：生物碱和某些含氯化合物显橙红色溶液I：碱式硝酸铋0.85g，溶于冰乙酸10ml和40ml.溶液II：碘化钾0.8g溶于水20ml.储存液：溶液I和溶液II等量混合（置棕色瓶中杨以长期保存）显色剂：储存1ml与冰乙酸2ml和水70ml混合，用前配制2. 碘化铂钾（碘铂酸）试剂，不同的生物碱显不同的颜色10%六氯化铂酸溶液3ml和 水97ml混合，加6%碘化钾溶液100ml,混合均匀，临用前配制3. 碘一碘化钾（Wagner）试剂：生物碱 显棕褐色。

碘1g和碘化钾10g溶于50ml水中，加热，加冰醋酸2ml用水稀释到100ml4. 改良碘化铋钾：碘，碘化钾（1： 1）试剂；生物碱显紫棕色或灰黑色5. 硫酸铈 硫酸试剂（改良sonnensclein试剂）：喷后110oC烤几分钟，不同的生物碱 显不同的颜色硫酸铈o.lg悬浮于水4ml中，加三氯化乙酸lg,加热煮沸，放冷，逐滴 加入浓硫酸直到混浊消失为止6. 碘化氯钾（vmayer）试剂（沉淀试剂）：取HgCL2 （毒）1.35g加蒸馏水60ml溶解后， 量取碘化钾5g,加碘馏水10ml使溶解将两液混合，加蒸馏水稀释使成100ml即得7. 硅钨酸（Bertrand）试剂（沉淀试剂）：5g硅钨酸溶于100ml蒸馏水中，加稀盐酸使呈 酸性反应即得三） 强心苷显色剂1. 碱性 3.5——二硝基苯甲酸试剂：强心苷显紫红色、几分钟后褪色 2%3.5——二硝基 苯甲酸甲醇溶液与2N氢氧化钾溶液，用前按劳1： 1混合2. 碱性三硝基苯：在浅橙色背景上显橙红色溶液I：间三硝基苯100mg溶于二甲基甲酰胺40ml,加浓HCL3〜4滴，加水至100ml, 避光能长期保存溶液 II： 5%碳酸风溶液先喷溶液I,再喷溶液II,喷后90〜103.0oC烤5分钟。

3. 三氯乙酸试剂：喷后110oC烤7~10分钟，紫外光下观察萤光试剂I： 25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液，配制后可放置数日或用试剂II： 上述乙醇溶 液用前每10ml加过氧化氢溶液4滴或新配3%氯铵T水溶液按4： 1混合4. 三氯化锑试剂：喷后100oC烤5分钟，日光下或紫外光下观察 25%或饱和的三氯化锑氯仿溶液5. 磷酸——溴试剂溶液I： 10%磷酸溶液 溶液II：溴化钾饱和溶液：25%盐酸溶液（1： 1： 1）薄层用溶液I喷洒后，在125oC烤12分钟（薄层太湿时则烤的时间可适当延长），在紫外 光下观察一次，将薄层再烤热，趁热喷溶液II,再在紫外光下观察6. Keller Kllianl试剂：（检查a 去氧糖）试液：100ml冰HAC和FeCL3试液0.5ml混匀，试样1ml混匀试样1ml加试液2ml溶 解后，沿试管壁滴入浓硫酸2接触面即显棕色渐变浅绿，兰色最后HAC层全部染成 兰色四） 黄酮苷显色剂 黄酮类成份在紫外光下大多显出不同颜色，用氨熏，喷三氯化铝溶液或喷氢氧化钠等碱性溶液，则颜色 变深或变色1 .氨气2．10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液3．1%或 5%碳酸钠溶液4．1%或 5%三氯化铝乙醇溶液。

5．2%乙酸镁甲醇溶液6. 饱和三氯化锑的氯仿溶液，100OC烤5分钟 以上六种试剂在喷前喷后将薄层置日光与紫外光下观察7. 1~2%三氯化铁乙醇溶液8. 1%中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液9. 0.1N 硝酸银溶液10. 铁氰色钾——三氯化铁试剂溶液I： 2%铁氰化钾溶液 溶液II： 2%三氯化铁溶液临用前溶液I与溶液II等量混合11. 硼氢化钾试剂：双氢黄酮化合物显红、橙红色溶液I： 1~2%硼氢化钾（钠）异丙醇溶液，必须新鲜配制溶液II：浓盐酸先喷 I、5 分钟后放入盐酸蒸气槽内12. Shinoda 试剂：在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸，黄酮醇显红紫色制备硅胶薄层时，加入2%w/w锌粉混合，薄层展开后盐酸溶液，如展开剂为酸性，可在展开后先喷锌一一丙 酮混悬液，再喷盐酸溶液罗丹明一一氨试剂溶液I： 0.1%罗丹明B的4%盐酸溶液 溶液II：浓氨溶液先喷溶液I,然后再将薄层放入氨汽槽内14. 对氨基苯磺酸试剂溶液I：对氨基苯磺酸盐溶液溶液II： 5%亚硝酸钠溶液将对氨基苯磺酸0.3g溶液对8%盐酸溶液100ml中，到紫溶液25ml用冰冷却，加预冷的 溶液 II1.5ml15. 硼酸一一柠檬酸试剂溶液I：饱和硼酸的丙酮溶液。

溶液II：柠檬酸丙酮溶液先喷溶液I,再喷溶液II16. 福林试剂（Folin Ciocalteu 试剂）钨酸钠10g和钼酸钠2.5g溶于70ml水中，再缓缓加85%磷酸5ml和浓盐酸10ml，将混 合液回流煮沸10小时，然后加硫酸锂15g，水5ml及溴1滴，再回去流煮沸15分钟，所 得溶液冷却后移置100ml溶量瓶中并用水稀释到刻度（贮备液），溶液应不显绿色溶液I： 20%碳酸钠溶液 溶液II：临用前上述贮备液1份用水三分稀释先喷溶液I,稍干再喷溶液II五）皂苷灶显色剂1. 25%磷钼酸乙醇溶液：喷后在140oC加热5~10分钟皂苷元均呈深兰色2．三氯化锑浓盐酸或氯仿溶液：喷后在 90oC 烤 10 分钟（应在通风厨中进行）,不同的 皂苷元在可见光或紫外光下显出各种颜色3. 硫酸：甲醇（1： 2）溶液,喷后加热,不同的皂苷元可显红褐色、紫色、黄色或黑色 所显颜色与温度无关4. 氟磺酸：乙酸1 1）溶液，喷后130oC加热5分钟各种皂苷元可显天兰紫、粉红、 淡棕等色,在紫外光下也显不同萤光5. 碘蒸汽：薄层置于碘蒸汽筒中，皂苷无皆显棕黄色斑点6. 三氯快乙酸或三氯乙酸：乙酸（1： 2）溶液，喷后在 100oC 加热 20 分钟皆显黄色。

7. 2%血球生理盐水混悬液（溶血试验、检皂苷） 取新鲜兔血（由心脏或静脉取血）适量，用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白，并用生 理盐水反复离心洗涤至上清液无色后，量取沉降红血球（可以管的离心管通接读取）用 生理盐水配成2%混悬液贮冰箱内备用（贮存期2~3 天）六）蒽醌苷显色剂 蒽醌及其苷本身在日光下显黄色，在紫外光下则显黄，红橙色萤光在薄层上用氨 熏或喷氢氧化钾与碱溶液，则颜色变深或变色1 .氨气2. 10%氢氧化钾、甲醇溶液3. 3%氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液4. 50%哌啶的苯溶液5. 饱和喷酸锂溶液6. 饱和硼砂溶液7. 0.5%乙酸镁甲醇溶液：喷后 90oC 烤 5 分钟8. 0.5%乙酸铝溶液，喷后紫外光下看萤光9. 0.5%牢固兰 B 试剂，喷后则原来氢氧化钠、锂、钾等溶液碱溶液显萤光的斑点此时在 可见光下显棕、紫或绿色也可先喷本试剂，再喷稀氢氧化钠溶液而显色也用于酚类 及能偶芳香胺的显色溶液I：新配的0.5%牢固兰B盐的水溶液 溶液II： 0.1N/L氢氧化钠溶液先喷溶液I,喷溶液II七）香豆精苷显色剂 1.0.5%碘的碘化钾溶液,香豆精各种颜色,很多其他类型的化合显色 2．重氟化氨基苯磺酸试剂,香豆精显黄、橙、红、棕紫等颜色也用于酚类,芳香胺反转 偶合的朵环化合物的显色。

对氨基苯横酸0.9g克加热溶于12N盐酸9ml,用水稀释到100m 1,取此溶液10ml 用冰冷却，加冰冷的4.5%亚硝酸钠溶液10ml，0oC放15分钟（在0*可保存三天），用 前加等体积 1%碳酸钠溶液3．重氮化对硝基苯胺试剂、香豆精显黄、红、棕、紫等颜色,也用于酚类的显色对硝基苯苯胺0.7g溶于12N盐酸9ml，用水稀释到100ml，将此溶液逐渐滴加到冰 冷的1%亚硝酸钠溶液5,再用冰冷的水稀释到100,需临用时新配4.4——氨基安替比林——铁氰化钾试剂：香豆素和酚类显橙红至深红色 溶液 I： 2%4——氨基安替比林乙醇溶液 溶液 II： 8%铁氨化钾溶液先喷溶液I,再喷溶液II，再用氨气熏之 5．稀氢氧化钠：喷前喷后薄层在短波长的紫外光下观察萤光八）挥发油显色剂1. 茴香醛一一浓硫酸试剂：喷后150oC烤挥发油中各成分显不同颜色 浓硫酸1ml加到冰醋酸50ml中，冷后加茴香醛0.5ml必须临时配制2. 萤。