桑叶总黄酮对高脂血症动物的降血脂效应.doc

桑叶总黄酮对高脂血症动物的降血脂效应李向荣 1 陈菁菁 2（1，浙江大学城市学院医学院，杭州，310015；2，浙江大学药学院，杭州，310058）[摘要]目的：观 察桑叶总黄酮的降血脂作用方法：用 Triton WR-1339 诱导建立急性高脂血症小鼠模型和高脂饲料建立高脂血症大鼠模型，分别测定小鼠和大鼠血清中的总胆固醇（TC）、甘油三脂（ TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C ）的含量，并计算 HDL-C/TC 和 HDL-C/LDL-C 的比值结果：桑叶总黄酮（MTF ）能 显著抵抗 Triton WR-1339 诱导的小鼠血清 TG，TC和 LDL-C 等指 标的升高，同时升高血清 HDL-C/TC 和 HDL-C/LDL-C 的比值给药后 12 h 作用效果更明显喂高脂饲料的大鼠模型也同样表明 MTF 具有降低血脂的作用，而且具有剂量依赖性 结论：MTF 能剂量依赖性地降低高脂血症小鼠和大鼠的血脂水平，预防高脂血症的发生发展关键词：桑叶总黄酮 Triton WR-1339 高脂血症 小鼠 大鼠 高脂血症引起动脉粥样硬化是造成冠心病、高血压和血管疾病的主要原因。

我国人群血脂异常形势严峻， 严重威胁我国人民的健康我国 18 岁及以上成人血脂异常总患病率达 18.6%，即血脂异常患者已达 1.6 亿；而且血脂异常的发病率正趋向年轻化，中年人与老年人患病率相近 [1]因此，做好血脂异常的早期防治，研究调节血脂效果好、毒副作用小的新 药十分重要现代研究表明，富含黄酮类化合物的植物提取物具有降低血脂、清除体内自由基、抑制脂质过氧化的活性 [2]，我 们研究发现桑叶含有丰富的黄酮类化合物本实验旨在观察桑叶总黄酮对 Triton WR-1339 诱导的高脂血症小鼠模型和高脂饲料引起高脂血症大鼠模型的血脂的影响，为进一步研究桑叶总黄酮的药理作用提供基础1．材料与方法1.1 药品与试剂Triton WR-1339（Sigma，美国）；银杏黄酮片（深圳海王药业有限公司，广州，批号：20041108）；TG 、TC 测试盒（南京建成生物工程研究所，南京）；HDL-C、LDL-C 测定试剂 盒（荣盛生物，上海）；其他 试剂均 为分析纯1.2 实验动物ICR 小鼠，20±2 g；SD 大鼠，200±2 g，雌雄各半，均购于浙江省医学科学院实验动物中心实验动物饲养一周以适应本实验室条件，分笼饲养， 动物可以自由饮水，摄取普通饲料，控制实验室光照 12 h 明 -12 h 暗，室内温度为 24 ± 1 ℃，湿度为 55 ± 10 %。

1．3 方法1． 3.1 药物试液的制备取桑叶总黄酮样品（我们实验室制备），分别配成浓度为 0.5，1 和 2 mg·ml-1银杏黄酮溶液浓度为 1 mg·ml-1，于 4 ℃保存备用1．3．2 动物实验1．3．2．1 急性高脂血症小鼠模型将 ICR 小鼠随机分为 6 组：正常对照组，模型 对照组 ，MTF 实验组（7.5、15 和 30 mg·kg-13 个剂量组）和阳性对照组除正常对照组外，其他各组分别尾静脉注射 Triton WR-1339（400 mg·kg-1）诱导血脂升高，正常对照组注射等体积 NS 注射 Triton WR-1339 后 12 h，实验组分别用 MTF 药液灌胃（剂量分别为 7.5、15 和 30 mg·kg-1），阳性对照组以银杏黄酮灌胃（15 mg·kg-1）Triton WR-1339 注射后的 12 h、18 h 和 24 h，每组随机选取 10 只，去眼球采血，分离血清， -38 ℃保存，供血脂指标测定用1．3．2．2 高脂血症大鼠模型 [3]将 48 只 SD 大鼠随机分为 6 组：正常对照组，喂普通饲料；模型对照组，喂高脂饲料（高脂饲料组成质量分数为：猪油 10%，蛋黄粉 10%，胆固醇 1%及基础饲料 79%）；3 个 剂量的 MTF 实验组和阳性对照组也喂食高脂 饲料，并分别灌胃给予 MTF（分别为 5、10 和 20 mg·kg-1）和银杏黄酮（10 mg·kg-1），每天一次，连续 4周。

同时 ，正常对照组和模型对照组分别灌胃给予等体 积 NS于每周测定体重实验前后，分别尾静脉采血，分离血清， -38 ℃保存，供血脂指标测定用实验结束后，断头处死，取肝脏并称重，并 计算肝重指数（ Hepatosomatic indices, HSI）肝重指数（HSI） ＝ （肝脏重量 / 体重） × 1001．3．2．3 血脂指标测定按试剂盒说明书方法操作，分别测定小鼠和大鼠血清中的总胆固醇（TC ）、甘油三脂（TG ）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量，并计算 HDL-C/TC 和 HDL-C/LDL-C 的比值1．3．2．4 统计方法数据以平均值±标准差表示，采用统计软件（SPSS 13.0 for Windows）进行方差分析，两组间比较采用 t 检验2． 结果2．1 MTF 对 Triton WR-1339 诱导的高脂血症小鼠血脂指标的影响与正常对照组相比，注射 Triton WR-1339 的小鼠的血清 TG、TC 和 LDL-C水平分别升高了约 7 倍、5 倍和 4 倍， HDL-C/TC 和 HDL-C/LDL-C 比值分别降低了 40％和 10％，建立了急性高脂血症小鼠模型。

而给予 MTF 处理（剂量分别为 7.5、15 或 30 mg kg-1）的小鼠明 显抑制 Triton WR-1339 诱导的高脂血症小鼠血脂水平的升高（见表 2-1 & 表 2-2）Table 2-1 Effect of MTF on serum lipid levels in mice 18 h post triton WR- 1339 injection ( n =10; Mean ± S.D.)# P<0.01 vs control group. * P<0.05, ** P<0.01 vs model group.Table 2-2 Effect of MTF on serum lipid levels in mice 24 h post triton WR- 1339 injection ( n =10; Mean ± S.D.)MTF treatment (mg·kg-1)NormalTriton WR-1339 7.5 15 30Ginkgetin (15 mg·kg-1)TG(mg·100 ml-1)85.7± 5.9 607.5± 49.9 # 595.9± 59.3 553.1± 54.5* 437.9± 38.0** 542.2± 47.1**TC(mg·100 ml-1)79.1± 5.4 440.6± 29.6 # 412.8± 40.9 361.2± 34.6** 285.5± 27.0** 370.2± 32.3**LDL-C(mg·100 ml-1)72.1± 5.1 287.2± 23.7 # 273.3± 25.1 245.7± 26.1** 210.4± 16.3** 248.0± 20.5**HDL-C/TC 0.52± 0.04 0.34± 0.03 # 0.34± 0.03 0.36± 0.03 0.39± 0.04** 0.36± 0.03HDL-C/LDL-C 0.57± 0.05 0.52± 0.06 # 0.52± 0.04 0.53± 0.05 0.53± 0.06 0.54+ 0.06MTF treatment (mg·kg-1)NormalTriton WR-1339 7.5 15 30Ginkgetin (15 mg·kg-1)TG(mg·100 ml-1)84.5± 5.4 540.1± 39.9 # 526.5± 46.3 494.0± 45.8* 388.0± 26.3** 451.8± 37.7**TC(mg·100 ml-1)81.1± 4.9 463.7± 36.8 # 420.6± 44.0 * 339.5± 32.7** 256.6± 24.8** 344.8± 40.3**LDL-C(mg·100 ml-1)72.7± 5.5 298.8± 25.9 # 275.9± 22.2 * 228.9± 17.4** 189.2± 16.3** 237.6± 18.9**# P<0.01 vs control group. * P<0.05, ** P<0.01 vs model group.如表 2-2 所示，尾静脉注射 Triton WR-1339（400 mg·kg-1）24 h 后，模型组的小鼠血清中的 TG、TC 和 LDL-C 含量分别为 540.1、463.7 和 298.8 mg·100 ml-1，而以 15 和 30 mg·kg-1剂 量 MTF 给药的小鼠血清中的 TG、TC 和 LDL-C 含量分别降低到 494.0、339.5、228.9 mg·100 ml-1 和 388.0、256.6、189.2 mg·100 ml-1；HDL-C/TC 比值在模型组小鼠中降到了 0.33，而在 MTF 给药（15 和 30 mg·kg-1）的小鼠中回升到了 0.38 和 0.42；MTF 给药的小鼠血清中 HDL-C/LDL-C 比值与模型组相比也有所升高，但没有显著性差异。

表 2-1 和表 2-2 均表明 MTF 能抑制 Triton WR-1339 诱导的小鼠血脂水平的升高，且具有剂量依赖性图 2-1 更清楚地显示了 MTF 能剂量依赖性地抑制由Triton WR- 1339 静脉注射引起的小鼠血清 TG、TC 和 LDL-C 水平的升高以及HDL-C/TC 和 HDL-C/LDL-C 比值的下降0.010.020.030.040.050.060.070.080.090.0100.00 10 20 30Dosage of MTF (mg/kg)Inhibitionratio (%)TGTCLDL-CHDL-C/TCHDL-C/LDL-CFig. 2-1 The inhabitation of MTF in serum lipid levels. The serum lipid levels were resisted by HDL-C/TC 0.52± 0.03 0.33± 0.03 # 0.34± 0.03 0.38± 0.04** 0.42± 0.04** 0.37± 0.04*HDL-C/LDL-C 0.58± 0.05 0.52± 0.04 # 0.52± 0.07 0.56± 0.04 0.57± 0.06* 0.53± 0.06MTF, at the doses of 7.5, 15 and 30 mg kg-1, 24h post triton WR-1339 injection. Date is expressed as mean± S.D. obtained from ten mice in each group.2．2 MTF 对 高脂血症大鼠的影响从表 2-3 可以观察到，喂高脂饲料的同时给予 MTF 保护的大鼠各血脂指标明显好转。

剂量为 10 和 20 mg·kg-1·d-1 的 MTF 实验组大鼠的 TG、TC 和 LDL-C水平分别维持在 73.2、86.4、51.7 mg·100 ml-1 和 67.2、84.0、47.5 mg·100 ml-1，相比模型组明显下降虽然 MTF 实验组（10 和 20 mg·kg-1·d-1）大鼠的 HDL-C 水平分别升高到 48.6 和 50.5 mg·100 ml-1，相比模型组 HDL-C 水平仅为 43.8 mg·100 ml-1，但此差异不具显著性Table 2-3 Effect of MTF on serum。