中药剂学：金银花的提取.doc

中药剂学：金银花的提取金银花的提取一、 金银花的化学成分金银花除含有绿原酸和异绿原酸外， 还 含有环烯醚萜甙裂环马钱素、獐牙菜甙、马钱素、马钱酸、新环烯醚萜甙；常春 藤皂甙配基、齐墩果酸；川续断皂甙乙；黄褐毛忍冬甙甲、 a -常春藤皂甙、无患子皂甙B、灰毡毛忍冬皂甙甲、灰毡毛忍冬皂甙乙、灰毡毛忍冬次皂甙甲、灰 毡毛忍冬次皂甙乙等挥发油主要含芳樟醇、双花醇、香叶醇、 B -苯乙醇、苯甲醇、异双花醇、 a - 松油醇、丁香油酚等 30 多种成分传统经验及近代药理实验和临床应用都证明， 金银花对于多种致病菌有较强 的抗菌作用和较好的治疗效果 二、绿原酸的提取金银花的主要抗菌有效成绿原 酸和异绿原酸 它们是奎宁酸和咖啡酸的酯 中药制剂， 制备金银花提取物多采 用水提、水提醇沉和稀醇提取 也有用水煎后加石灰乳使绿原酸类成分沉淀， 然 后加稀酸分解得提取物的方法提取方法：1. 稀醇提取法生药用10倍量和8倍量70聽醇提取2次，每次2h提取液 过滤，减压浓缩，抽干2. 水提法生药用10倍和8倍量水煎煮2次，每次2h,合并提取液，过滤浓 缩至干3. 水提醇沉法按水提法提取，浓缩至 1 ：1时，加乙醇至含醇量达75%静 置，过滤，减压浓缩抽干。

4. 超滤方法称取干燥金银花一定量，加入 10倍量水沸腾煎煮 2次，每次 1 小时，过滤，挤压药渣，合并药液，离心，量上清液体积取出 1 克金银花的药 液，以测量原液中绿原酸含量将待超滤溶液倒入储液罐， 连接超滤器进行超滤 控制一定的压力， 至超滤 液的体积占原体积的 85%左右时，加入相当于原体积 15%的水至储液罐中，继续 超滤，至超滤液与原体积相同时， 取样（ 为等体积超滤液 ） 待测含量 往储液罐中 加入相当于原来体积 25%的水，继续超滤，至超滤液相当于加入的水量时，取样 （为 1.25 倍体积超滤液 ）待测含量同法继续超滤，得到 1.5 倍、 2 倍和 3倍体 积的超滤液三、主要有效成分含量的测定方法 1 .紫外分光光度法 （1） 如新鲜植 物中含有多元酚氧化酶，则先在100C加热1小时，或浸在1%E硫酸氢钠溶液中， 然后在石英砂中磨碎，用 70%L醇提取3次（总体积"10倍样品），提取液于 40C -50C减压浓缩至原体积的1/10，再用纸层析分离吸取此液 0.01毫升点 在whatmanNo.1滤纸上，用丁醇-甲醇-水（4 : 1 : 5）的水相蒸气饱和过夜（20 C）， 次日，再用丁醇相下行展开 8 小时，取出，挥去溶剂后，绿原酸在紫外灯下显暗 蓝色荧光， Rf 值为 0.73，如用氨气熏则变为绿黄色，如喷 Hoffners 试剂（1%亚 硝酸钠的 1%甲醇溶液 ) ，斑点则变为黄色，如喷 1N 氢氧化钠溶液则变为红色。

绿原酸的定量则不喷亚硝酸钠溶液及氢氧化钠溶液， 可从纸上洗脱， 用紫外分光 光度计定量⑵ 生药0.5克，用70聽醇在50C条件提取(5 X 10毫升)，取提取液0.2 毫升点在滤纸上，于暗处用丁醇-醋酸-乙酸丁酯-水(9 : 28 : 47 : 16)层析18小 时，在紫外灯下检出绿原酸，用 70汇醇10毫升洗脱，在波长324nm处测吸收 度3)纸层析法，用正丁醇-冰醋酸-水(4 : 1 : 5)在19C展开26小时而分开， 斑点用等量10%昔酸溶液及19亚硝酸钠溶液喷雾而显色，绿原酸(黄色)的Rf值 为 0.50如用氢氧化钠溶液喷雾，绿原酸变为红色绿原酸的定量是将相应的 斑点用异丙醇或甲醇或水洗脱，在波长 327nm测量吸收度⑷取生药于60C烘至恒重，称取1克，置于瓶中，加95%!醇25毫升，在 80C水浴上提取1小时倾出提取液，再加95^乙醇25毫升，重复提取合并 两次提取液，稀释至一定浓度，在波长324nm处测吸收度，用下面公式计算生药 中绿原酸的含量绿原酸含量 %=X稀释倍数KX样品量(毫克)X 100X 100%E为 吸收度，K为测定常数用绿原酸纯品测绘标准曲线，按E=KCL的公式(C为标准 液浓度，单位为毫克/100毫升，L为比色杯厚度，1厘米)，求得常数K为0.479。

用此法分析了从各地药材公司收集的金银花样品中绿原酸的含量5)生药粉1克，用70%甲醇提取24小时(室温、暗处)或水浴80E提取1 小时，取部分提取液加于含有 2克聚酰胺粉的小柱， 用水、稀甲醇溶液洗脱柱子， 绿原酸可用 0.02%氢氧化钠的 70%甲醇溶液洗脱，再用 70%甲醇稀释至一定体积， 在波长324nm测吸收度，与标准品比较而定量2. 容量法 (1) 碘量法绿原酸易吸附在 wofatitL150 上，可从混合物中分离， 然后用0.1N盐酸溶液或稀硫酸洗脱，用碘量法滴定，如用3N氢氧化钠溶液洗脱 则绿原酸被部分地分解成咖啡酸及奎尼酸，但并不影响结果2) 非水滴定绿原酸在乙腈 -甲酸(3: 1)混合液中可被醋酸铜氧化成相应的 邻醌(o-quinone)，此反应可用于植物样品中酚类化全物的氧化滴定。