第15章-长期毒性作用及其试验方法课件.ppt

第十第十五五章章长期毒性作用及其试验方法长期毒性作用及其试验方法 long-term toxicity impact and test method 2022/6/91第第一一节节 基本基本概念和概念和目的目的2022/6/92 长长期期毒毒性性试试验验是是指指试试验验动动物物连连续续多多日日接接触触较较大大剂剂量量的的药药物物所所引引起起的的中中毒毒效效应应，为为观观察察这这种种中中毒毒效效应应而而设设计计的的毒毒理理学学试试验验称之为称之为长期长期( (慢性慢性) )毒性毒性试验试验一、定义一、定义基本概念和目的基本概念和目的2022/6/93长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异：基本概念和目的基本概念和目的 急性毒性试验急性毒性试验：24 24 小时内小时内单次或单次或多次多次大剂量大剂量给给予某予某药药所出现的有害作用；机体（人或动物）一性大剂所出现的有害作用；机体（人或动物）一性大剂量接受某药后所产生的快速而剧烈的中毒反应量接受某药后所产生的快速而剧烈的中毒反应 长长期期毒毒性性试试验验是是指指试试验验动动物物连连续续多多日日接接触触较较大大剂剂量量的的药药物物所所引引起起的的中中毒毒效效应应，为为观观察察这这种种中中毒毒效效应应而而设计的毒理学试验称之为设计的毒理学试验称之为长期长期( (慢性慢性) )毒性毒性试验试验。

2022/6/941. 1. 给药的期限不同给药的期限不同长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异：基本概念和目的基本概念和目的 急性毒性试验为一次性给药或急性毒性试验为一次性给药或 24 24 小时内小时内多次给药多次给药； 长期毒性试验为连续多日接触一定剂量给长期毒性试验为连续多日接触一定剂量给药药，给药期限为临床用药的给药期限为临床用药的 3-4 3-4 倍时间 对长期毒性试验各国之间无统一的时间规定对长期毒性试验各国之间无统一的时间规定2022/6/951. 1. 给药的期限不同给药的期限不同长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异：基本概念和目的基本概念和目的2 2. . 给药的给药的剂量范围剂量范围不同不同 急性毒性试验为一次性急性毒性试验为一次性大剂量大剂量给药给药 长期毒性试验为长期毒性试验为低低剂量剂量长期积累长期积累2022/6/961. 1. 给药的期限不同给药的期限不同长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异：基本概念和目的基本概念和目的2 2. . 给药的给药的剂量范围剂量范围不同不同。

3 3. . 观察毒效应观察毒效应不同不同 急性毒性试验急性毒性试验通常观察以死亡为效应的质反通常观察以死亡为效应的质反应；应； 长期毒性试验长期毒性试验以以量量反应为指标，毒效应是从反应为指标，毒效应是从量变到质变逐渐变化的过程量变到质变逐渐变化的过程2022/6/97蓄积作用蓄积作用 (accumulation action) 药物进入机体后药物进入机体后，机体具有对药物进行代谢、机体具有对药物进行代谢、转化及排泄的功能转化及排泄的功能，最终将其排出体外但最终将其排出体外但当较长当较长时间连续、反复给药时间连续、反复给药，或者说给药的时间间隔和剂或者说给药的时间间隔和剂量超过机体消除药物的能力时量超过机体消除药物的能力时，出现药物进入机体出现药物进入机体的速度的速度 ( ( 或总量或总量 ) ) 超过排除的速度超过排除的速度 ( ( 或总量或总量 ) ) 的现象的现象，这时药物就可能在体内逐渐增加并贮存起这时药物就可能在体内逐渐增加并贮存起来来，也就是说出现了蓄积作用也就是说出现了蓄积作用 基本概念和目的基本概念和目的2022/6/98蓄积作用蓄积作用 (accumulation action)作用量积蓄作用量积蓄为可用化学方法检测出为可用化学方法检测出。

功能性蓄积功能性蓄积（药物或其代谢物药物或其代谢物）不一定能用化学不一定能用化学手段检测出来手段检测出来，但却有慢性毒性但却有慢性毒性症状症状出现出现；或或者说者说由于贮存在体内的药物或其代谢产物的量极微而现由于贮存在体内的药物或其代谢产物的量极微而现有的方法尚不足以测出有的方法尚不足以测出，但由于多次接触引起轻微但由于多次接触引起轻微损害的累积而出现慢性毒性症状损害的累积而出现慢性毒性症状 基本概念和目的基本概念和目的2022/6/99二、目的与意义二、目的与意义p观察在试验动物长期重复给药的情况下，观察在试验动物长期重复给药的情况下，了解了解药物有无药物有无蓄积作用蓄积作用，试验动物能否产生，试验动物能否产生耐受性耐受性，试验动物会出现，试验动物会出现哪些哪些毒性反应毒性反应，其，其剂量效应关系剂量效应关系如何，涉及哪些组织，如何，涉及哪些组织，主要主要靶器官靶器官是什么，是什么，损害的性质和程度损害的性质和程度如何，损害是否如何，损害是否可逆可逆等等；p观察在给试验动物长期重复给药的情况下，初步估计不观察在给试验动物长期重复给药的情况下，初步估计不出现毒性作用的出现毒性作用的最大耐受量最大耐受量和出现毒性作用的和出现毒性作用的最小剂量最小剂量，为拟定人用药的安全剂量提供参考为拟定人用药的安全剂量提供参考。

基本概念和目的基本概念和目的2022/6/910第二节第二节试试 验验 设设 计计 原原 则则 及及 方方 法法2022/6/911一、一般原则和要求一、一般原则和要求1.1.1.1.二种动物二种动物二种动物二种动物：啮齿类（大鼠）：啮齿类（大鼠）：啮齿类（大鼠）：啮齿类（大鼠） + + + + 非啮齿（比格犬）非啮齿（比格犬）非啮齿（比格犬）非啮齿（比格犬）2.2.2.2.三个剂量三个剂量三个剂量三个剂量：高、中、低三个档次高、中、低三个档次高、中、低三个档次高、中、低三个档次，高剂量组充分高剂量组充分高剂量组充分高剂量组充分反映药物的毒性反映药物的毒性反映药物的毒性反映药物的毒性，低剂量组不出现毒性反应低剂量组不出现毒性反应低剂量组不出现毒性反应低剂量组不出现毒性反应3.3.3.3.至少至少至少至少4 4 4 4组：组：组：组：溶剂溶剂溶剂溶剂 ( ( ( ( 或赋型剂或赋型剂或赋型剂或赋型剂 ) ) ) ) 对照组或已知药对照组或已知药对照组或已知药对照组或已知药物毒性对照组物毒性对照组物毒性对照组物毒性对照组4.4.4.4.给药途径应与临床拟用途径相一致给药途径应与临床拟用途径相一致。

给药途径应与临床拟用途径相一致给药途径应与临床拟用途径相一致5.5.5.5.符合中华人民共和国药品管理法，执行符合中华人民共和国药品管理法，执行符合中华人民共和国药品管理法，执行符合中华人民共和国药品管理法，执行“药药药药物非物非物非物非临床研究质量管理规范临床研究质量管理规范临床研究质量管理规范临床研究质量管理规范”试验设计原则及方法试验设计原则及方法2022/6/912试验设计原则及方法试验设计原则及方法 一般的观点是一般的观点是以药政部门的技术要求规以药政部门的技术要求规范为核心范为核心，同时同时兼顾给药时限和给药剂量兼顾给药时限和给药剂量这这两个重要因素两个重要因素，对整个长期毒性试验做一个对整个长期毒性试验做一个较为合理的安排和设计较为合理的安排和设计，力争高效率、全面力争高效率、全面地了解药物长期给药所造成的有害反应及量地了解药物长期给药所造成的有害反应及量- -效关系2022/6/913二、实验动物二、实验动物 1.1. 种类及品系种类及品系n 首先考虑急性毒性试验业已证明的、对药物敏感的首先考虑急性毒性试验业已证明的、对药物敏感的动物或品系动物或品系n 其次考虑受试动物的易获得性其次考虑受试动物的易获得性n 在现阶段，选择易得、实验室易于饲养管理、饮食在现阶段，选择易得、实验室易于饲养管理、饮食习性与人接近或吃一般的食物就可以正常生存的常规习性与人接近或吃一般的食物就可以正常生存的常规动物。

动物n 我国规定：两种动物，一种为啮齿类，首选大鼠，我国规定：两种动物，一种为啮齿类，首选大鼠，另一种非啮齿类，首选狗另一种非啮齿类，首选狗试验设计原则及方法试验设计原则及方法2022/6/9142022/6/915二、实验动物二、实验动物 1.1. 种类及品系种类及品系2. 2. 起始月（周）龄、起始月（周）龄、n 原则：选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物原则：选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物n 大鼠：大鼠：6 69 9周；可降至周；可降至5 5周；周；n 犬：犬：6 6 1212月龄；杂种犬最高不超过月龄；杂种犬最高不超过5 5年年n 起始体重应在体重均值起始体重应在体重均值20%20%内内试验设计原则及方法试验设计原则及方法2022/6/916二、实验动物二、实验动物 1.1. 种类及品系种类及品系2. 2. 起始月（周）龄起始月（周）龄3. 3. 性别及数量性别及数量n 敏感动物、雌雄兼顾敏感动物、雌雄兼顾n 大鼠雌雄各大鼠雌雄各10103030只；只；Beagle Beagle 犬或猴雌、雄各犬或猴雌、雄各 3 36 6 只只试验设计原则及方法试验设计原则及方法2022/6/917二、实验动物二、实验动物 1.1. 种类及品系种类及品系2. 2. 起始月（周）龄起始月（周）龄3. 3. 性别及数量性别及数量4. 4. 饲养管理饲养管理 动物饲养室内温度、湿度、光照、通风条件动物饲养室内温度、湿度、光照、通风条件；动；动物物饮水质量及饲料配方等饮水质量及饲料配方等；动物笼具等。

动物笼具等严格控制严格控制环境条件，避免不必要的干扰因素环境条件，避免不必要的干扰因素试验设计原则及方法试验设计原则及方法2022/6/918三、给药期限三、给药期限试验设计原则及方法试验设计原则及方法与拟定的临床疗程长短、临床适与拟定的临床疗程长短、临床适应症、用药人群相应症、用药人群相关，应充分考虑预期临床的实际疗程关，应充分考虑预期临床的实际疗程 原则上原则上取决于临床拟定的用药时间，我国要求长期取决于临床拟定的用药时间，我国要求长期毒性试验的给药期限为临床疗程的毒性试验的给药期限为临床疗程的 3 34 4 倍时间创新药品试验周期应不少于创新药品试验周期应不少于 90 90 天天；超过超过 180 180 天天的新药可以在试验开始的新药可以在试验开始 90 90 天后，同时进行天后，同时进行 I I 期期临床试验临床试验2022/6/919表表表表15-1 15-1 15-1 15-1 我国药政部门关于一般药物重复给药毒性试验期限的规定我国药政部门关于一般药物重复给药毒性试验期限的规定我国药政部门关于一般药物重复给药毒性试验期限的规定我国药政部门关于一般药物重复给药毒性试验期限的规定 临床拟用临床拟用 毒性试验期限毒性试验期限 给药时间给药时间 啮齿类动物啮齿类动物 非啮齿类动物非啮齿类动物5天天 2周周 2周周2周周 1月月 1月月 24周周 3月月 3月月 13月月 6月月 6月月 3月月 6月月 9月月 试验设计原则及方法试验设计原则及方法2022/6/920四、剂量水平的选择四、剂量水平的选择 三个剂量组是必不可少的：三个剂量组是必不可少的：n高剂量高剂量应应足以引起明显的毒性反应，但死亡率应控制在足以引起明显的毒性反应，但死亡率应控制在 20% 20% 以内；以内；n低剂量低剂量应应不引起毒性作用不引起毒性作用，原则上应高于同种动物药效，原则上应高于同种动物药效的有效剂量的有效剂量（一般为动物有效剂量或临床治疗量的一般为动物有效剂量或临床治疗量的2 2 3 3倍倍）；）；n为表明毒性作用的量为表明毒性作用的量效关系，在上述两个剂量之间插效关系，在上述两个剂量之间插入一个（入一个（ 或多个）中间剂量。

或多个）中间剂量 试验设计原则及方法试验设计原则及方法中剂量按 计算 202。