CD133和maspin在肝癌中的表达及其临床病理意义.pdf
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第 2 2 卷第 6 期 2 0 1 3年 1 2月 中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志 CHI NES E J OURNAL OF HI S TOCHEM I S TRY AND CYTOCHEM I S TRY Vo1 ．2 2 ．No ．6 De e e m b e r ． 2 013 C D1 3 3和 ma s p i n在肝癌 中的表达及 其临床病 理意义 田 静 龚 晓萌 ( 安徽省利辛县人民医院病理科 ， 安徽 2 3 6 7 0 0 ； 蚌埠医学院病 理学 教研 室 ， 蚌埠 2 3 3 0 0 O ) [ 摘 要] 目的 探讨肿瘤干细胞标志物 C D 1 3 3和 ma s p i n在肝细胞性肝 癌( h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o ma HC C ) 中的表达情况 及其 临床病理意 义 方法 采用免 疫组织 化学 E l i v i s i o n T M p l u s 法检 测 1 0 0例 HC C组 织和 2 O例癌旁 肝组织 中 C D 1 3 3和 ma s p i n蛋 白的表达情况 。
结果在癌旁肝组织 中 C D 1 3 3和 ma s p i n 蛋 白的阳性表达率分别为 5 ． 0 和 1 0 0 ， 而在 HC C组 中 其 阳性表达率分别为 5 1 ． 0 ％和 4 8 ． 0 ， 两组之间差异有显著性( P 5 ． 0 c m 有 4 9例 ， ≤ 5 ． 0 c m 有 5 1例 ； 从 肿 瘤 数 目来 看 ， 只 有 一 个 肿 瘤结 节的有 5 5例， 有 2个或 2个 以上的肿瘤结节有 4 5 例 ； 根据 E d mo n d s o n分级， I — I I 级 的有 4 4例 ， I I I — I v 级 的有 5 6例 ； 按 淋 巴结 有 无 转移 ， 有 转 移 5 1例 ， 无 转 移 4 9例 ； 从 血管 有 无 侵 犯来 看 ， 无 侵 犯 5 1例 ， 有 侵 犯 4 9例 ( 见表 1 ) 2 ．试 剂 鼠抗 人 C D1 3 3单 克 隆抗 体 购 自 Ab c a m 公 司 ， 鼠抗人 ma s p i n单 克 隆抗体 购 自 L a b Vi s i o n公 司， E l i v i s i o n p l u s 试 剂 盒 以及 DAB显 示 试 剂 盒购 自 福 州迈 新生 物技 术公 司 。
3 ．免 疫组 织化 学 将 石蜡 包 埋 组 织 以 4 m 厚 连 续 切 片 ， 烤 干 ， 于 二 甲苯 溶液 及梯 度浓 度 的 乙醇 中脱蜡 至水 洗 免疫 组织 化 学染 色操 作步 骤按 试剂 盒 说 明书进 行 采用 已知 阳性 片 作 对 照 ， 以 P B S液 代 替 一 抗 作 空 白对 照 然后依次苏木素淡染细胞核 、 盐酸酒精分化、 返 蓝 、 脱水透明 ， 最后中性树胶封片 4 ．免疫组织化学结果判定 C D1 3 3以细胞 膜 或 浆 出 现 黄 色 或 棕 黄 色 颗 粒 为 阳性 } ma s p i n以细胞 核或 浆 出现 黄 色或 棕 黄 色 颗 粒 为 阳性 免疫 组 织 化 学 结 果 采取 二 次计 分 法 ： 每 例标本随机计数 1 O个高倍视野 ( ×4 0 0) ， 计数每个 高 倍视 野 中 阳性细 胞 所 占百 分 比并计 分 ； 分 析 染 色 强 度 并 计 分 具 体 方 法 见 参 考 文 献 l g ] ， 若 积 分 0 ． 0 5 ) HC C 组 织 的 分 化越 差 ， C D1 3 3蛋 白的 阳性表 达 率 越 高 ， 差 异有 统计 学 意 义 ( P 0 ． 0 5 ， 表 1 )。
3 ．HC C 中 C D 1 3 3与 ma s p i n之 间 的关系 S p e a r ma n相关 分 析 显 示 ， C D 1 3 3蛋 白 的 表 达 与 ma s p i n蛋 白的表 达呈 负 相关 ( r 一一 0 ． 2 9 9 ， P d 0 ． 0 0 5 ， 表 2 ) 第 6 期 田静等 ． C D 1 3 3和 ma s p i n在肝癌 中的表 达及 其临床病理意义 5 3 1 表 2 HC C 中 C D1 3 3与 ma s p i n之 间的 相互 关 系 Ta bl e 2 Cor r e l a t i on b e t we e n CD1 33 e xp r e s s i o n a nd ma s p i n e xp r e s s i o n 讨 论 C D1 3 3又名 p r o mi n i n - 1 ， 最 初 是 从 造 血 干 细 胞 和前 体 细 胞 表 面 中发 现 的， 其 编 码 一个 长 度 为 1 2 0 k D a的蛋 白 ， 具 有 5个跨 膜 结构 的 细胞表 面 糖 蛋 白 。
越来 越 多 的 研 究 表 明 ， C D1 3 3表 达 与 结 直 肠 癌 _ 1 、 非小 细 胞 肺 癌l 1 、 肝 细 胞 性 肝 癌 [ 1 2 _ 及 胆 管 癌 [ 1 等患者 的预 后 有关 本 研 究 采 用 免 疫 组 织 化 学 方法 检 测 C D1 3 3蛋 白在 HC C组织 及癌 旁肝 组织 中 的表 达 ， 发现 HC C组 织 中 C D1 3 3蛋 白的表 达 明 显高于癌旁肝组织 ， 差异有显著性 ； 并且随着肿瘤分 化 越差 、 肿 瘤数 目越 多 ， 其 表 达水 平也 越 高 ， 差 异有 显著性 ； 在伴有淋巴结转移 的肿瘤组织 中其 表达水 平也较没有淋巴结转移 的肿瘤显著升高 ， 与文献报 道一致 ； 肿瘤浸润血管的癌组织 中 C D1 3 3表达 明显 高于 没 有 浸 润 的癌 组 织 ， 而 与 患 者 的 年 龄 、 性 别 、 有无包膜 、 HB s Ag状态、 术前 AF P水平及 肿瘤 大 小等 无关 提示 C D1 3 3基 因表达 异 常与 HC C的 发 生 、 发展 及侵 袭 、 转 移密 切相 关 ； 且 C D1 3 3可 能 通 过 促进 肝 癌细 胞浸 润血 管促 进肿 瘤进 展『 l 。
ma s p i n属 于丝 氨 酸 蛋 白 酶 抑 制 剂 超 家 族 成 员 之一 ， 与这个家族的其它成员 ， 如纤维蛋 白溶解酶激 活 抑制 因子 1和 2 ( P A1和 P A2 ) 以 及 a 1抗 胰 蛋 白 酶等具有显著 的结构相似性 该基 因位于染 色体 l 8 q 2 1 ． 1 _ q 2 3 ， 编 码 一 个 4 2 k D a的蛋 白ma s p i n可 以调节 肿 瘤细 胞 的 生长 、 黏 附 、 侵 袭 及转 移 ， 是 一 种 肿 瘤抑 制 基 因产物 在 本研 究 中 ， 我 们 发 现 ma s p i n 蛋 白在 HC C组 中 的表 达 显 著 低 于癌 旁 肝 组 织 ； 且 ma s p i n蛋 白的 表 达 与肿 瘤 的 E d mo n d s o n分 级 、 肿 瘤数 目以及有无血管侵犯等均相关 即 ma s p i n的 表达越低 ， 肿瘤的 Ed mo n d s o n分级越 高、 肿瘤数 目 越多 及易 发生 血管 侵 犯 ， 提 示 ma s p i n蛋 白的表达 降 低 或 缺 失 可 能 会 影 响 HC C 的发 生 发 展 、 侵袭 及 转 移 ， 可能在肝细胞的恶性转化过程中起重要作用 ， 是 早 期 的分 子事 件口 。
本研 究 中 ， S p e a r ma n相 关分 析显 示 在 HC C组 织 中 ， C D1 3 3蛋 白 的表 达 与 ma s p i n蛋 白 的 表 达 呈 显著的负相关性 ma s p i n是 MMP s 抑 制蛋 白， 而 MMP s 与 肿瘤 进展 有关 ； ma s p i n可 以通过 减少 肿 瘤 相 关 的微血 管 密度 ( mi e r o v e s s e l d e n s i t y MVD ) 的数 量 而抑 制肿 瘤 的生 长口 随 着肿 瘤 的进 展 ， ma s p i n 基 因表达降低或缺失 ， 丧失 了对 MMP s和 MvD的 抑 制作 用 ； 而此 时 C D 1 3 3表 达 升 高 ， 促 进 肝 癌 细胞 浸 润 血 管 ， 且 MMP s可 以 降解 细 胞 外 基 质 ， 使 肿 瘤 细 胞可 以轻 易地 进入 血 管 ， 造 成侵袭 和转 移 ， 促 进 肿 瘤 的进 一步 进展 综 上所 述 ， 通 过 在 HC C组 织 中检 测 C D1 3 3和 ma s p i n蛋 白的表达 ， 发现 C D1 3 3蛋 白高表达 以及 ma s p i n蛋 白表 达 降 低 或 缺 失 时 ， HC C肿 瘤 细 胞 可 能更 容 易 侵 袭 、 发 展 以 及 转 移 。
因 此 ， C D1 3 3和 ma s p i n可 以作 为 评 估 HC C患 者 转 移 和 预 后 的 指 标 参 考 文 献 [ 1 ]J e ma l A， B r a y F， C e n t e r MM， e t a 1 ．G l o b a l c a n c e r s t a — t i s t i c s ．CA Ca n c e r J Cl i n，2 0 1 1 ， 6 1 ( 2 ) ： 6 9 — 9 0 F 2 ]P e r z J F，Ar ms t r o n g G L，F a r r i n g t o n L A，e t a 1 ．T h e c ont r i but i on s of he p a t i t i s B vi r u s a nd h e pa t i t i s C vi r u s i nf e c t i o ns t O c i r r ho s i s a nd pr i ma r y l i v e r c a n c e r wor l d— wi d e ．J He p a t o l ， 2 0 0 6， 4 5 ( 4 ) ： 5 2 9 - 5 3 8 [ 3 ]S p i l l a n e J B ，He n d e r s o n MA．C a n c e r s t e m c e l l s ：a r e — v i e w．ANZ J S u r g， 2 0 0 7 ， 7 7 ( 6 ) ： 4 6 4 — 4 6 8 [ 4 ]P i n g YF ，B i a n X W．C o n s i c e r e v i e w；C o n t r i b u t i o n o f c a nc e r s t e m c e l l s t o ne ov a s c u l a r i z a t i o n． St e m Ce l l s， 2 O1 1， 29 (6 )： 8 88 — 89 4 E s 3 Od e r o — Ma r a h V A， Kh a l k h a l i — E l l i s z ， C h u n t h a p o n g J ， e t a 1 ． M a s p i n r e g u l a t e s d i f f e r e n t s i g n a l i n g p a t h wa y s f o r mot i l i t y a nd a。
