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保健食品中总黄酮、总皂甙、粗多糖的测定

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  • 卖家[上传人]:jiups****uk12
  • 文档编号:90756337
  • 上传时间:2019-06-16
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    • 1、保健食品中总黄酮、总皂甙、粗多糖的测定附录A(规范性的附录)保健食品中总黄酮的测定A.1 试剂A.1.1 聚酰胺粉A.1.2 芦丁标准溶液: 称取5.0g芦丁,加甲醇溶解并定容至100mL,即得50g/mL。A.1.3 乙醇 分析纯。A.1.4 甲醇 分析纯。A.2 分析步骤A.2.1 试样处理:称取一定量的试样,加乙醇定容至25mL,摇匀后,超声提取20min,放置,吸取上清液1.0mL,于蒸发皿中,加1g聚酰胺粉吸附,于水浴上挥去乙醇,然后转入层析柱。先用20mL苯洗,苯液弃去,然后用甲醇洗脱黄酮,定容至25mL。此液于波长360nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品,测定标准曲线,求回归方程,计算试样中的总黄酮含量。A.2.2 芦丁标准曲线: 吸取芦丁标准溶液:0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中,加甲醛至刻度,摇匀,于波长360nm比色。求回归方程,计算试样中总黄酮含量。A.3 计算和结果表示: 式中:X:试样中总黄酮的含量,mg/100g;A:由标准曲线算得被测液中总黄酮量,gM:试样质量,gV1:测定用试样体积,mLV2:试样定容总体积,mL计算结果

      2、保留二位有效数字。此方法选自保健食品检验与评价技术规范(2003年版)附录B(规范性的附录)保健食品中总皂甙的测定B.1 试剂B.1.1 Amberlite-XAD-2 大孔树脂,Sigma 化学公司、U.S.AB.1.2 正丁醇 分析纯。B.1.3 乙 醇 分析纯。B.1.4 中性氧化铝 层析用,100-200目。B.1.5 高氯酸 分析纯。B.1.6 冰乙酸 分析纯。B.1.7 香草醛溶液 称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至100mL。B.1.8 人参皂甙Re 购自中国药品生物制品检定所。B.1.9 人参皂甙Re标准溶液:精确称取人参皂甙Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10.0mL,即每毫升人参皂甙Re2.0mg。B.2 仪器B.2.1 比色剂B.2.2 层析柱B.3 实验步骤B.3.1 试样处理B.3.1.1 固体试样:称取1.000g左右的试样(根据试样含人参量定),置于100mL容量瓶中,加少量水,超声30min,再用水定容至100mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL进行柱层析。B.3.1.2 液体试样:含乙醇的补酒类保健食品,吸取1.0mL试样(假如浓度高、或

      3、颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)进行柱层析。B.3.2 柱层析:用10mL注射器做层析管,内装3cm Amberlite-XAD-2 大孔树脂,上加1cm中性氧化铝。先用25mL70%乙醇洗柱,弃去洗脱液,再用25mL水洗柱,弃去洗脱液,精确加入1.0mL已处理好的试样溶液(见B.3.1),用25mL水洗柱,弃去洗脱液,用25mL70%乙醇洗脱人参皂甙,收集洗脱液于蒸发皿中,置于60水浴挥干。以此作显色用。B.3.3 显色:在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣都溶解,再加0.8mL高氯酸,均匀后移入5mL带塞刻度离心管中,60水浴加热10min,取出,冰浴冷却后,准确加入冰乙酸5.0mL,摇匀后,以1cm比色池与560nm波长处与标准管一起进行比色测定。B.3.4 标准管:吸取人参皂甙Re标准溶液(2.0mg/mL)100l放蒸发皿中,放在水浴挥干(低于60),或热风吹干(勿使过热),以下操作从“B.3.2柱层析”起,与试样相同。测定吸光度值。计算: 式中:X:试样中总皂甙量(以人参皂甙Re计),g/100g;A1:被测液的吸光度值;

      4、A2:标准液的吸光度值;C:标准管人参皂甙Re的量,gV:试样稀释体积,mLm:试样质量,g计算结果保留二位有效数字。此方法选自保健食品检验与评价技术规范(2003年版)附录C粗多糖的测定C.1 试剂C.1.1 浓硫酸C.1.2 无水乙醇C.1.3 5%本分溶液C.1.4 80%乙醇溶液C.2 分析步骤C.2.1 试样处理:取本品50.0mL,加热浓缩至约10.0mL,放冷,加入40mL无水乙醇,3000转/分离心5min,弃去上清液,残渣用80%乙醇洗涤,离心(重复此过程2次),用水溶解残渣,定容20mL。此液即为样品处理液。C.2.2 标准曲线: 取葡聚糖标准溶液:0、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mL,用水定容为1.0mL,加入0.5mL苯酚溶液,10mL浓硫酸,混匀,放置至室温,于L=1cm,波长=485nm测定吸光度,绘制 标准曲线。C.2.3 样品测定 取样品处理液0.5mL于具塞比色管中,以下同标准曲线操作。测定吸光度。C.3 计算和结果表示: X(mg/ml)=(C20020/10/0.5)/201000式中:X:试样中粗多糖含量,mg/mL;C:从标准曲线上查出的含量(g)4

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