细菌测定系统sop文件
9页1、安顺市平坝区人民医院检验科 编写:蒋可乾、黄维华 制定日期:2016.06.05平坝区平黎大道 审核:蒋可乾 修订日期:2016.06.20 0851- 34221170 核准:谭桂林 执行日期:20016.06.20DL-96细菌测定系统标准操作程序1目的规范DL-96细菌测定系统的操作程序,保证检验质量。2授权操作人经培训并通过考核的微生物实验室工作人员。3原理DL-96细菌测定系统,是对已分离培养出来的细菌、真菌等微生物进行种、属鉴定,并同时测定该菌对各种抗菌药物MIC的专用设备。细菌测定系统由检测装置、嵌入式控制装置组成,测定系统采用比色、比浊法判定随机体外诊断试剂板微量反应孔阴阳性结果进行检测和分析,并自动生成细菌种类和抗菌药物MIC半定量分析结果。试剂板由生化反应孔和抗菌药物MIC测定孔组成。在生化反应孔中加入细菌悬液,经35-37孵育,在细菌代谢作用下生化反应直接产生颜色变化或经加入显色剂后产生颜色变化;抗菌药物MIC半定量测定采用微量肉汤稀释法,加入含有细菌的M-H肉汤培养基,经35-37孵育,试验孔是否出现浑浊(沉淀)确定细菌是否生长.测定系统采用比色法对各项生化反应
2、进行结果(阴性或阳性)判定,按照细菌生化反应的概率来完成细菌的鉴定;测定系统通过比浊法对抗生素进行MIC半定量测定分析MIC值。4. 工作条件环境温度: 540; 相对湿度: 80%;大气压力: 76 kPa106 kPa; 电源电压: AC220V+22V, 50Hz+1Hz; 光 照 度: 应避免阳光直射。5操作程序5.1 使用试剂板的基本要求5.1.1无特殊营养要求的革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和真菌等病原菌;5.1.2 经18-24小时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物);5.2随机试剂板的选择5.2.1根据待测菌的培养特性、菌落特征、氧化酶试验、触酶试验结果及革兰染色情况,选择好相应试剂板。5.2.2试剂板的选择:DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPH、DL-96STREP、DL-96FUGNUS。5.3 试剂板的接种5.3.1 DL-ZD1浊度仪的校准连接浊度仪电源,仪器运行正常,放入调“零”和调“幅”试管,调节仪器测试分别达到0和100%即可使用。5.3.2 菌悬液与药敏液的配制5321菌悬液的配制:挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶内壁研磨呈细菌悬液要求如下,DL-9
3、6E、DL-96NE、DL-96STAPH的菌悬液都制备为0.5麦氏单位DL-96STREP菌悬液制备为2麦氏单位。DL-96FUGNUS的菌悬液制备为1个麦氏单位。5322 药敏液的配制DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPHDL-96、DL-96STREP吸菌悬液50ul,加至M-H肉汤培养基内,充分混匀。DL-96FUGNUS吸取菌悬液20l加入药敏培养液中,充分混匀。533 试剂板的接种与孵育5331生化反应孔和抗菌药物MIC测定孔按照试剂板使用说明书的要求,用连续移液器(配无菌吸头)吸取菌悬液与药敏液加入各孔,每孔100。试剂板的接种也可以采用SCAN-10自动加样仪自动接种.5332 撕开不干胶的纸对齐贴于鉴定板,35-37孵育(DL-96FUGNUS试剂板放置30湿盒内孵育)。54 随机试剂板的检测541 试剂板孵育培养18-24h后(个别生长缓慢者可延长至3648小时)检测试剂板,按照使用说明的要求向DL-96E、DL-96NE、DL-96STAPHDL-96、DL-96STREP测试板加入辅助试剂。5.4.2 打开细菌测定系统电源开关,打开系统软件,按“+”
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