生物电子显微术第一章节幻灯片
80页1、2019年6月8日星期六,1,生物电子显微术,河北农业大学生命学院,2019年6月8日星期六,2,生物电子显微术,1 绪论 基本概念 EM发展史 EM分类及特点 电镜技术的应用 各种显微镜性能与特点的比较 2 电子显微镜的基本知识 TEM的结构和原理 SEM的结构和原理,2019年6月8日星期六,3,3 超薄切片技术 基本概念 普通超薄切片技术 4 负染色技术 5 金属投影和复型技术 金属投影技术 复型技术 6 EM冷冻制样技术 概述 冷冻超薄切片技术 冷冻断裂(蚀刻)及复型技术 冷冻安全规则,2019年6月8日星期六,4,7 SEM的样品制备技术 概述 SEM电镜的样品制备 特殊样品的制备 8 电镜的应用(个案分析) 花粉表面形态的SEM观察 熏蒸固定真菌的SEM观察 样品包埋块的制作 扫描电镜观察石蜡切片观察法 植物原生质体超薄切片的制作 真菌菌丝及孢子的包埋,2019年6月8日星期六,5,9 X-ray显微分析 X-ray微区分析的基本原理 X-ray显微分析仪工作的基本原理 X-ray显微分析的方法及应用 10 其他显微技术 扫描隧道显微镜 原子力显微镜 激光扫描共焦显微镜 扫
2、描电-声显微镜,2019年6月8日星期六,6,生物电子显微术,课时安排 讲授:30学时 实验:10学时 主要内容: 电镜的原理、结构(TEM,SEM) 电镜的样品制备技术 1) 超薄切片技术 4) 金属投影及复型技术 2) 负染色技术 5) SEM制样技术 3) 冷冻制样技术 6) 其他制样技术 应用举例,2019年6月8日星期六,7,主要参考文献,生物电子显微术 张景强 中山大学出版 实用生物电子显微术 林钧安 辽宁科技出版 生物电子显微术教程 陈力 北师大出版 电子显微镜与电子光学 黄兰友 科学出版 生物医学电子显微技术 程时 北医、协和 生物学工作者实用生物电子显微术 英 G 1976,参考文献1,2,3图书馆均有,2019年6月8日星期六,8,第一章 绪论,1.1基本概念 1. 电子显微镜:简称电镜 利用电子束作为照明源,电磁透镜聚焦成像,并结合特定的机械装置,应用现代电子技术、高真空技术而制成的一种精密电子光学仪器。 TEM:Transmission Electron Microscope SEM: Scanning Electron Microscope,2019年6月8日
3、星期六,9,2电子显微术: 以电子显微镜为工具,对物质(样品)进行物理、化学、成分、超微结构等方面研究的一种技术。 电子显微术定义: 电子显微学是凝聚态物理、材料科学、乃至生命科学的交叉学科,是物质科学研究的一个重要组成部分。它是以电子显微学等方法, 在原子尺度上对物质的微观结构进行研究分析, 从而促进了新物质、新结构、新性能、新现象的发现,极大地推动了新材料、新器件的发展。,2019年6月8日星期六,10,3超微结构: 指一般光学显微镜不能分辨的细微形态结构(亚显微 结构),直至生物大分子结构(蛋白质、核酸、多糖、 脂类)。 4电子显微方法:Electron Microscopy 指利用电子与固体样品作用时所发出的信息,对样品 进行微区观察和分析的一种方法。 1mm=103 m 1m=103nm 1nm=10 1 =10-10m,2019年6月8日星期六,11,1.2 电子显微镜的发展概况 光学显微镜的发展(LM: light microscope) 光镜的诞生 人眼分辨率:人肉眼能分辨清楚的两点之间的最短距离用“”表示 13世纪玻璃的发明 制造眼镜、放大镜 16世纪 欧洲放大镜=0
4、.01 M=330倍 1590年 荷兰眼镜商Hans之子-Janssen装配具有划时代意义的“显微镜” 1665年 英国物理学家Robert Hook(虎克) 第一台光学显微镜 1675年 荷兰Leeuwen.Hook(列文.贺克 M=270倍, 共研制247台光镜 高倍率的光镜 18世纪到19世纪中叶 英、法、意相继研制消色差显微镜 M=15002000 人的视力提高了1000多倍 0.2 m,2019年6月8日星期六,12,3. 光镜的局限性 1878年 德.理论光学家 E.Abbe提出 光镜的最优分辨率 opt=0.4*光 波的反射,水波,障碍物:石块,产生的影子,芦苇杆,表1-1 电磁波各光谱区的一些参数及相应的结构分析方法,2019年6月8日星期六,14,可见光波长 40008000 opt=0.4*光 紫外线波长 =3900130 紫外线显微镜opt=1000 X-ray =1000.5 但无法偏转不能成像 目前,光镜最好分辨率opt=0.160.32 m 结论: 利用波长的更短光线做照明光源,可提高分辨率。 (OR:波长越短,分辨率越高) 电子波波长很短 易于成像,从而导
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