实验诊断学序论105

1、1,实验诊断学绪论,首都医科大学附属朝阳医院检验科 王清涛,2,内容,本学科定义及范围 本学科的发展史 本学科的现状与展望 实验诊断学的临床应用,3,学科名称的演变,Medical Technology Medical Laboratory Science Laboratory Diagnosis Laboratory Medicine,4,实验室名称,Department of Laboratory Medicine Clinical Laboratory,5,临床实验室的定义,隶属于医疗机构，对取自人体的各种标本进行生物学、微生物学、免疫学、化学、血液免疫学、血液学、生物物理学、细胞学等检验，并为临床提供医学检验服务的实验室。 摘自卫生部医疗机构临床实验室管理办法,质量与安全,7,临床实验室的演变,小规模 大规模 设备简单 自动化分析仪 信息管理（LIS） 医院所属、商业独立实验室 POCT（point of care testing）,8,学科的专业组成,临床血液学检验 (Clinical Hematology) 临床免疫学检验 (Clinical Immunology) 临床生

2、物化学检验 (Clinical Chemistry) 临床微生物学检验 (Clinical Microbiology) 临床分子生物学检验 (Clinical Molecular Biology) 临床遗传学检验 (Clinical Genetics) 临床实验室管理 (Clinical Laboratory Management),9,历史(History),远在公元前400年，希腊名医Hippocrates(约BC.460-370)就开始用感官对尿液的颜色、浊度、气味等指标进行观察（检验），以辅助有关疾病的诊断及疗效判断。也被誉为世界上最早的实验诊断。,10,临床化学实验诊断的里程碑,19世纪以前为萌芽期 20世纪初，临床化学学科形成期： 1904年，Folin等开始用比色法测定血液内生化成分。 20世纪，学科发展期： 20世纪30年代，光电比色用于临床化学检测。 20世纪50年代，血清酶活力测定方法建立。 21世纪，将是微量化、自动化、循证化时代。,11,临床免疫学实验诊断的里程碑,18世纪末（1798），牛痘疫苗问世。 1883年，人类发现白细胞的吞噬功能，创立了细胞免疫学说

3、1894年，比利时科学家Bordet发现了补体。 1896年，建立了凝集反应检测方法 1897年，建立了沉淀反应检测方法 1900年，建立了补体结合试验,12,临床免疫学实验诊断的里程碑,1961年，发现了胸腺的功能。 1966年，开始区分T和B淋巴细胞。 1950年，认识了抗体的结构。 1975年，单克隆抗体问世。,13,临床微生物学实验诊断的里程碑,17世纪末，人们开始利用显微镜观察细菌。 19世纪60年代，法国科学家巴斯德创立了巴氏消毒法，不久人类掌握了固体培养基培养技术和细菌染色技术。 1900年，许多细菌被认识，如炭疽、结核、霍乱、白喉、伤寒、脑膜炎、破伤风、痢疾等。 1929年，青霉素问世。 20世纪，微量化、自动化，进入分子水平。,14,临床血液学实验诊断的里程碑,1673年，人类发明了显微镜，开始观察红细胞 1749年，人类利用显微镜观察白细胞 1842年，人类利用显微镜观察血小板 19世纪末，发明了染色技术，细胞更易辨认 1923年，发现了血小板的粘附和聚集功能 近几十年来，细胞化学染色、血细胞分析仪和流式细胞仪已广泛应用,15,临床分子生物学实验诊断的里程碑,186

4、9年，人类发现了DNA，随后发现了RNA。 1953年，人类建立了DNA双螺旋模型。 1953-1970年，先后发现了mRNA、DNA聚合酶、 RNA聚合酶、 1970年以来，PCR技术的建立、DNA序列测定和基因重组表达技术的建立。,16,实验诊断学的现状,检验设备与发达国家同步： 自动化、微量化、多参数（高信息量） 高准确性、高灵敏度、高精密度 模块化趋势、智能化趋势 试剂/耗材商品化程度（接近100%） 检验技术和方法优化： 如血浆纤维蛋白原含量测定有：理化测定法、免疫学测定法等多种方法，其中Clauss法（凝血酶法）为WHO推荐方法，该方法在美国使用率达94%。 先进技术仍存在局限性。,17,病例一,内科某住院患者，女性，21岁，2004年11月入院治疗，血常规检查结果显示血小板减少（8109/L），复查结果为8109/L，但未见出血倾向。主治医生决定对该患者实施骨髓穿刺。检验科血液细胞室为该患者进行WBC手工分类时，显微镜下发现该患者的血小板并未减少，并及时通知临床，暂停骨髓穿刺，同时为该患者进行手工血小板记数，结果为：120109/L。结果避免了一次不必要的骨髓穿刺。（注：

5、据分析，该患者可能为EDTA血小板抵抗，血小板仍聚集成簇，造成计数假性减低。）,18,应用(Application),诊断及鉴别诊断 疗效观察及预后判断 为公共卫生和疾病预防提供资料 为医学研究提供手段 为健康普查和健康咨询提供服务,实验诊断学是临床医学的基础课，是医学生及临床医生 的必修课。,19,患者安全至上,20,以人为本 端正目的、关注有效服务（量） 向缩短平均住院日要效益 卫生经济学 患者利益最大化,服务理念,21,期望的结果,降低病死率 降低单病种成本 协助临床降低平均住院日 提高患者及员工的安全度 尽所能，积极承担社会责任,24, 水平,Good,Quality Assurance,Good,Laboratory Practice,Good,Communication,25,细节决定成败,26,第一章 实验室检查的标准化,27,第一节 标本的采集、运送和保存,28,检验前程序,培训 内容,申请单填写、患者准备、采样工具的正确选择及使用、样本采集技术、样本的运输和保存等。,每年进行一次培训,培训 频度,29,检验标本采集培训,30,标本的采集,应严格参照标本采集指南 采集标

6、本时病人的状态 空腹与否、精神状况、安静与否、使用药物情况 清晨一般为最佳时间,31,标本的采集,标本采集的时机 空腹标本 随时或急诊标本 定时标本（24h尿蛋白、糖耐量试验等）,32,标本采集质量,标本采集所指的“空腹”： 空腹定义：禁止饮食8-12h，不宜超过24h。 超过24h后，由于饥饿导致的各种代谢变化开始显现。 可适当饮水，但应严格禁止奶类、咖啡、果汁等类型的饮品。,33,标本采集质量,告知患者空腹： 葡萄糖及甘油三脂检查前，医生应告知患者空腹采血。 面对欲进行葡萄糖或甘油三脂检查的受试者，采血人员应问讯该受试者是否为空腹 实验室人员把关 否则，将会导致错误评价,34,标本采集质量,输液的影响： 检测项目包括静脉给予的物质时应注意 5%的右旋糖中葡萄糖浓度为5000 mg/dl 体内一般为100 mg/dl 一边输液一边采血，某些项目会受到干扰 解决办法：可在采血前几分钟停止输液,35,标本的采集,标本的类别：血标本 血标本可分为全血、血浆和血清。 按采集部位还可分静脉血、动脉血和毛细血管血。其中以静脉血最常用。,36,标本的采集,标本的类别：血标本 目前较规范的采血技术是

7、真空采血法。 真空采血法有利于安全及标准化。 试管盖的颜色（国际通用）可代表不同用途。,37,Know Which Tube To Use!,Stopper Colour Identifies the Type,Conventional Use of Common Blood Collection Tubes,Tube Additive Stopper Color Laboratory Use Features Gel & clot activator red/gray or gold serum testing in chemistry gel for serum separation, shorter clot time than red stopper Gel & lithium heparin green/gray or plasma testing in chemistry gel for plasma separation, light green faster turnaround time than serum No additive red serum testing

8、 in chemistry suitable for wide range of tests glass serum & serology tubes also used in blood bank Thrombin yellow/gray or orange STAT serum testing short clot time Lithium heparin or Green plasma testing in chemistry faster turnaround time than serum lithium, heparin also sodium heparin used in syringes for whole blood critical care testing (may be electrolyte balanced) Sodium citrate light blue plasma coagulation testing for clot-based, chromogenic, and immunologic coagulation assays Sodium c

9、itrate black ESR erythrocyte sedimentation rate determintion by Westergren method K2 or K3 EDTA lavender whole blood wide range of haematology tests, also used for genetic testing, immunosuppressant, HbA1c, RBC folate, and other selected tests NaF, K2EDTA/NaF, or gray serum or plasma fluoride inhibits glycolysis oxalate and EDTA potassium oxalate/NaF glucose testing anticoagulants give plasma samples also used for lactate and alcohol determination Acid citrate yellow blood bank and genetic testing for blood bank studies, HLA phenotyping, DNA and dextrose (ACD) paternity testing Sodium yellow* microbiology for blood culture specimens in microbiology polyanetholesulfonate (SPS) Sodium heparin, dark blue* toxicology for trace element determination in toxicology and or no additive nutritional chemistry Gel, liquid density medium, green/red or molecular diagnostics and mononuclear cell isolation and sodium heparin or sodium citrate Gel

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