牛鲍计数板的使用和白细胞计数
20页1、临床基础检验学 实验一,牛鲍计数板的使用 和白细胞计数 南通大学第二附属医院 检验医学中心 陆永辉,实验一、 白细胞计数,1.原理:血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞,在血细胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数,换算成每升血液中白细胞数。 2.试剂器材 白细胞稀释液:冰乙酸 2.0ml 10g/L亚甲蓝 3滴 加蒸馏水 至100ml,器材 改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片、微量吸管、带孔吸头、1ML刻度移液管、小试管、洁净软纱布、干棉球、光学显微镜。,毛细血管采血标准操作程序,操作步骤: 1 采血部位成人以左手无名指内侧为宜,半岁以下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟两侧采血。 2 轻轻按摩采血部位。 3 用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。,4 紧捏刺血部位,使其自然充血。 5 用无菌刺针穿刺取血,动作应迅速,深度 23mm,稍加挤压以血液流出为宜。 6 用干棉球擦去第一滴血。 7 按需要依次采血。 8 采血完毕,用干棉球压住伤口,止血片刻。,微量吸管的使用,1将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上,连接紧密不漏气; 2拇指和中指夹住吸头中下端,示指盖住吸头小孔,拇、中指轻微挤压排出适量空气; 3将
2、微量吸管插入抗凝血,拇、中指缓慢松劲(松动快血液会吸入吸头),吸取抗凝血至所需刻度略上方(不能有气泡),吸管呈水平略下垂,松开示指; 4用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血(保证血量准确),轻触吸管下口吸去多余血量,使管内抗凝血正处所需刻度; 5将微量吸管插入小试管底部,三指轻微用力慢慢排出血液,用上清液冲洗管内余血2-3次,轻摇试管混匀; 6拔出微量吸管弃入污物桶。,3.操作步骤 (1)加稀释液 用移液管向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。 (2)采血、稀释 用微量吸管采血20ul,拭去管外余血,释放于小试 管底部,用上部稀释液洗净吸管内余血,轻摇试管混匀,静置等其溶血。 (3)清洁计数板及盖片(动作轻柔),夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤上。 (4)充计数池 将小试管轻微振荡2min,立即以一次性微量吸管吸取混匀后的白细胞悬液,充入计数池内。静置2-3min,使细胞沉于计数池底面。 (5)调试显微镜 将计数板放置载物台上,选择(4 )低倍镜,调节聚光器使光线较暗,调节旋钮找到方格线,转至低倍镜(10),调节光亮 。 (6)计数 低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数,压线细胞数上不
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