消毒灭菌、噬菌体课件
46页1、第3章 消毒灭菌与 病原微生物实验室生物安全,目 的 要 求,掌握:消毒、灭菌、抑菌、无菌、防腐、无菌操作的概念; 熟悉:高压灭菌、紫外线及滤过除菌法的应用范围。,1、灭菌(sterilization):杀死物体上所有微生物(包括芽胞)的方法。 2、消毒(disinfection):杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。 消毒剂:用于消毒的化学药品。常用浓度下,只对细菌繁殖体有效。 3、防腐(antisepsis):防止或抑制微生物的生长的方法。 防腐剂:用于防腐的化学药品。,第一节 消毒灭菌常用术语,4、清洁(cleaning):是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。 5、无菌(asepsis)和无菌操作:无菌是无活的M存在,多是灭菌的结果。防止细菌进入人体或其它物品的操作技术,称为无菌操作。,第二节 消毒灭菌的方法,一、物理消毒灭菌法 (一)热力灭菌法 高温对细菌有明显的致死作用:蛋白质变性;核酸断裂。 1、干热灭菌法 杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性。 (1)焚烧 废弃物品或动物尸体等。 (2)烧灼 接种环、试管口等的灭菌。,(3) 干烤 利用干烤箱灭菌(16017
2、0C,2h),适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品 (4) 红外线 是一种0.771000m波长的电磁波,尤以110m波长的热效应最强。热效应只能在照射到的表面产生。与干烤相似,多用于医疗器械的灭菌。,2、湿热灭菌法 最常用,效果优于干热灭菌法。 同样条件下湿热效果强于干热的原因: 湿热的穿透力强 热蒸汽有潜能 蛋白质含水量越多越容易变性,1、高压蒸汽灭菌法:103.42Kpa经121.3,维持1530分钟,适用于耐高压和湿热的物品,如培养基、手术衣、手术器械等。,高压蒸汽灭菌器,2、巴氏消毒法:61.162.8持续30分钟或71.7持续30秒,用于酒类和乳制品的消毒。 3、流通蒸汽消毒法:利用一个大气压下100的水蒸气进行消毒。细菌繁殖体1530min可被杀灭。,4 、间歇蒸气灭菌法 利用反复多次的流动蒸汽间歇加热以达到灭菌的目的。适用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基。 5、煮沸法:100持续510分钟,可用于手术器械、食具的消毒。水中加入2%碳酸氢钠,既可提高沸点达105C,促进杀灭细菌的芽胞,又可防止金属器皿生锈。,(二)辐射杀菌法 1、紫外线: (1)原理:干扰DNA复制(使
3、细菌DNA形成胸腺嘧啶二聚体),从而导致细菌死亡。 (2)杀菌特点:265nm波长的紫外线杀菌力最强,但是穿透力较弱。 (3)应用:物体表面和空气的消毒。 (4)紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用。,2、电离辐射: (1)原理:x射线、射线、高速电子等产生游离基,破坏DNA。 (2)应用:用于不耐热塑料、橡胶制品、中草药及食品的灭菌。 3微波 波长为11000mm的电磁波。可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物质,但不能穿透金属表面。主要用于食品、非金属器械、检验室用品、无菌室和病室中食品用具、药杯及其他用品的消毒。,(三)滤过除菌法 用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌,达到无菌的目的。 所用的器具是滤菌器(薄膜滤菌器、玻璃滤菌器、石棉滤菌器、素陶瓷滤菌器)。 主要用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。,滤器和生物洁净室,(四)超声波消毒法 不被人耳感受的高于20kHz/s的声波,称为超声波。超声波可裂解多数细菌,尤其是G-菌。 主要用于粉碎细胞,以提取细胞组分或制备抗原等。如超声振荡仪,(五)干燥和低温抑菌法 低温:保存菌种。 1、冰箱 2、液氮罐 3、冷冻真空干燥法:为
4、目前最好的保存菌种的方法,可保存数年至数十年。,二、化学消毒灭菌法 (一)常用消毒剂的杀菌机制: 1、促进菌体蛋白质变性或凝固。 2、使微生物细胞成分氧化、水解。 3、干扰和破坏细菌酶的活性。 4、损伤细菌的细胞膜 。,常用消毒剂的种类、浓度和用途1,常用消毒剂的种类、浓度和用途2,(二)化学消毒按杀菌能力剂分三类: 1、高效消毒剂(high-level disinfectants) (1)含氯消毒剂;(2)过氧化物消毒剂; (3)醛类消毒剂;(4)环氧乙烷 2、中效消毒剂(intermediate-level disinfectants) (1)含碘消毒剂;(2)醇类消毒剂 3、低效消毒剂(low-level disinfectants) (1)季铵盐类;(2)氯已定;(3)高锰酸钾,固体二氧化氯消毒剂,第二节 消毒灭菌的运用,一、医疗器械物品的消毒灭菌 (一)高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。 (二)中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。 (三)低危器械物品 只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。一般用后清洗、消
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