乙肝病毒的检测课件
26页1、乙肝病毒的检测,HBV 的三种形态,1,Hepatitis B virion(Dane particle) 2,secreted filament 3,secreted sphere,6,乙型肝炎病毒HBV,HBV是嗜肝脱氧核糖核酸病毒科的哺乳动物属的一员。 HBV阳性的血清中有三种病毒颗粒 .大球形颗粒,完整的HBV颗粒直径为42nm,又名Dane颗粒,分为包膜与核心的两部分,外衣壳及包膜含有表面抗原,衣壳内为核心结构,有核心抗原,核心抗原下面藏有e抗原。,.小球形颗粒,阳性血清中最多的颗粒,主要为表面抗原,不含核酸及成分,为不完整的 .管形颗粒,实际上是一串小球形颗粒聚合在一起的,也含有表面抗原,5,HBV感染的实验室检查,1.乙型肝炎的生物化学检测,主要指标: ALT, AST, ASTm, 血清白蛋白, 血清胆红素, 胆碱酯酶, 甲胎蛋白, 凝血酶原时间(PT)及部分凝血因子;,6,方法学 ELISA:灵敏性高,成本低,适用于普通病人筛查; 胶体金免疫层析法(金标法):简便易行,可用于急诊病人快速检测; 化学发光法定量检测:价格昂贵,可用于HBVMs为临界值的病人的确证;可间接
2、反映宿主HBV的复制水平,在评价抗病毒治疗的病毒学应答、疗效和判断预后方面有重要意义。 新增检测指标 PreS1、PreS2及其相应抗体 对乙肝两对半认识,7,2. HBV 血清标志物检测,8,PreS1检测的临床价值,前S1蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗粒上,在HBV感染宿主细胞 过程及在病毒复制和刺激机体产生免疫反应中起重要作用; 前S1抗原与HBeAg之间有高度相关性,并可区别因变异种及其他原因造成的乙肝病毒e抗原(HBeAg)假阴性,可作为HBeAg假阴性补充,从而准确反映患者体内病毒复制情况; 可作为HBV感染及复制的标注,与其它血清标志物联合检测,相互补充。,Back,乙型肝炎的两对半 1.乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和表面抗体(HBsAb), 2.e抗原(HBeAg)和e抗体(HBeAb), 3.核心抗原(HBcAg)和核心抗体(HBcAb) 这三对 乙肝病毒的抗原和抗体。 由于HBcAg主要存在于受感染的肝细胞及乙肝病毒颗粒的核心内,一般血清中较难检测到,只有用特殊的方法处理后才能查到,所以通常只能检测到HBcAb,也就是说这第三对通常只能检测到半对,所以称之为“
3、两对半“。“两对半“是乙肝病毒最常用的血清学标记。,乙肝五项的32种组合,13,大三阳,小三阳,vs,14,HBV DNA 定量检测 病毒复制水平最可靠,最直接的证据,与传染性和疾病进展密切相关; 主要用于HBV感染的判断,治疗适应症的选择及抗病毒疗效的判断。 HBV基因分型 基因分型的必要性; 基因分型的主要方法; HBV耐药突变的检测,3.HBV 分子生物学诊断,病毒基因突变,疾病进展,临床表现,对干扰素应答,耐药变异,生化学改善,HBeAg血清学转换,HBV DNA清除,急性乙型肝炎,慢性乙型肝炎,肝硬化 (LC),肝细胞癌 (HCC),15,HBV基因型/基因亚型,常用HBV基因分型方法比较,16,客观看待乙肝DNA,1.乙肝病毒DNA 定量往往被描述成为判断乙肝传染性大小、病情严重程度以及治疗效果的“金指标”,其实这些认识都是片面的。乙肝病毒DNA 定量检测为了解乙肝病毒在体内的变化增添了新的手段,弥补了以往乙肝病毒“两对半”检测的不足,只要抽血化验检测乙肝病毒DNA 呈阳性,无论其他乙肝病毒检测结果如何,都说明患者体内存在复制状态的乙肝病毒,血液具有一定传染性,这对于评估治
4、疗效果和了解病情变化有一定帮助。但是目前乙肝病毒DNA 检测尚处于研究阶段,并非完美无缺,乙肝病毒DNA 定量不能说明病情轻重乙肝病毒DNA 定量数值只能说明游离在血液中病毒的含量,病毒多少、含量高低与病情严重程度没有直接关系。乙肝病情严重程度必须通过检测肝功系列指标确定,这些指标包括:转氨酶、胆碱酯酶、胆红素、白蛋白、凝血酶原活动度、转肽酶、蛋白电泳等等,凝血酶原活动度、白蛋白、胆碱酯酶数值越低,说明病情越严重。病毒定量数值高低与病情无直接关系。相反,绝大多数无症状乙肝病毒携带者,尤其是少年儿童患者,乙肝病毒DNA 检测都为阳性,乙肝病毒处于高复制状态,而他们的病情十分轻微,肝穿结果显示,他们的肝组织仅为轻度的非特异性炎症改变;而大多数肝硬化或肝癌患者的乙肝病毒DNA 检测多为阴性,而病情却十分严重。乙肝病毒本身不引起肝细胞病变,感染的肝细胞仍然是长寿的,半衰期6 12个月或更长。乙肝病情轻重决于很多因素,例如患者的免疫状态、遗传因素、病毒的变异等,病毒数量多少不是病情演变的决定因素。,4.HBV 临床药物治疗监测,乙肝病毒的耐药性检测,是精准治疗乙肝的关键! 目前由于治疗不够规范,
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