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组织学绪论_3

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  • 卖家[上传人]:F****n
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  • 上传时间:2019-04-21
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    • 1、第1章:组织学绪论,基础学院 组织学与胚胎学教研室,崔运河,实验室:北实验教学楼三层东侧。,注意事项: 1.穿隔离衣 2.带实验报告册、红蓝铅笔和橡皮,绘图。,目 录,组织学发展简史和当代组织学,组织学的学习方法,组织学技术简介,组织学的内容和意义,一、组织学的内容和意义,概念: 组织学(histology):研究机体微细结构及其相关功能的科学。以显微镜观察组织切片为基本方法,又称显微解剖学 (microanatomy) 细胞(cell):机体结构和功能的基本单位,成人约有1x1015 个、200 余种。 组织(tissue):细胞群和细胞外基质构成。,一、组织学的内容和意义,组织类型: 上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。 四种组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官(organ) 。完成一个或几个生理活动。 若干功能相关的器官构成一个系统(system) 并完成一个连续的的生理活动。,一、组织学的内容和意义,研究层次: 光镜结构(常称为显微结构) 电镜结构(又称为超微结构),意 义: 是一门重要的医学基础课,属主干学科。与解剖学、生理学、病理学及内科学、外科学等学科有密切关系。,

      2、二、组织学发展简史和当代组织学,发展简史:,1665年英国人Hooke首先利用显微镜发现细胞(cell)。,随后意大利学者、荷兰学者又相继发现了精子、红细胞、肌细胞、神经细胞等。,1831年发现了细胞核,对细胞的结构有了初步认识。,1838年德国植物学家Schladen(施来登)、1839年动物学家Schwann(施万)分别发现植物和动物都是由细胞组成的,细胞是植物和动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了“细胞学说”。,二、组织学发展简史和当代组织学,19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代,放大倍数较高的显微镜,切片机和各种染料的应用。已能较为正确地描述细胞结构,使组织学发展为一门独立而系统的学科。,二、组织学发展简史和当代组织学,当代组织学: 20世纪后期,新仪器、新技术的发明和应用; 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学 引入分子水平;组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景。,三、组织学的学习方法,审视角度 平面与立体 形态与功能,审视角度,组织水平:层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平:主要细胞的分布、结构特点及 功能 亚细胞水平:细胞的超微结构 分子水平:主要在生物化

      3、学课程讲解,平面与立体,形态与功能,舒张状态,收缩状态,光镜技术,四、组织学技术简介,(一)光镜技术 石蜡切片术:适用于大多数组织样品的制作。 主要步骤: 取材 固定 水洗 脱水 透明 包埋 切片 贴片 染色 封片 。 其它制片方法:适用于某些特殊样品的制作,如 涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等。,染色,染料性质,碱性染料:具有阳电荷。含氨基(-NH2)、 二甲氨基-N(CH3)2等碱性助色团。,酸性染料:具有阴电荷。含羧基(-OOH)、 羟基(-OH)或磺基(-SO3H) 等酸性助色团。,光镜技术,染色原理,嗜碱性:,细胞和组织中的酸性物质或结构与碱性染料亲和力强,易被着色。,嗜酸性:,细胞和组织中的碱性物质或结构与酸性染料亲和力强,易被着色。,中性:,与两种染料的亲和力均不强。,光镜技术,染色方法,苏木精(hematoxylin): 蓝色,碱性染料,可使细胞核和胞质内的酸性物质或结构着蓝紫色。 伊红(eosin): 红色,酸性染料,可使细胞质、溶酶体等大多数细胞器,以及细胞间质内的胶原纤维等碱性物质或结构着红色。,(1)、苏木精和伊红染色(简称 H E 染色),光镜技术,染色

      4、方法,HE染色,苏木精,伊 红,嗜碱性结构: 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等,嗜酸性结构: 细胞质基质 溶酶体、线粒体等细胞器 胶原纤维等,光镜技术,染色方法,HE染色法以外的所有染色法,通常是为了显示某些用HE染色法显示不出的细胞和结构。如: 苏丹法显示脂肪 镀银法显示神经细胞、嗜银颗粒 铁苏木素法显示心肌闰盘 马氏三色法显示胰岛细胞 甲苯胺蓝法显示糖胺多糖,(2)、特殊染色,光镜技术,四、组织学技术简介,几种特殊显微镜的应用 荧光显微镜 相差显微镜 暗视野显微镜 倒置显微镜 其它:共焦激光扫描显微镜、偏光显微镜、紫外光显微镜、隧道扫描显微镜、X-射线显微镜等。,光镜技术,电镜技术,四、组织学技术简介,(二)电镜技术 发明:1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔 透射电镜术 (transmission electron microscope ,TEM) 电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至几十万倍,分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑色的结构,称高电子密度 (electron-dense);反之,浅染的部分称低电子密度 (electron-

      5、lucent)。,电镜技术,四、组织学技术简介, 扫描电镜术 (scanning electron microscope,SEM) 观察组织表面的立体结构。如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞噬行为等。,组织化学术,四、组织学技术简介,(三)组织化学术( histochemistry ) : 通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内化学成分,通常是使其形成有色终末产物,以便在镜下观察,可进行定位和定量。,四、组织学技术简介,1.一般组织化学术 PAS反应(过碘酸希夫反应,periodic acid Schiff reaction)。形成紫红色反应产物,反应显示糖类。 Feulgen反应。显示DNA的传统方法,先用稀盐酸处理,使DNA分子中脱氧核糖与嘌吟之间的连接键打开,形成醛基,再与Schiff试剂作用显色,故此反应显示DNA。,组织化学术,四、组织学技术简介, 免疫组织化学术 (immunocytochemistry) 利用组织化学技术的原理,再结合免疫学方法,则为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽和蛋白质。,组织化学术,四、组织学技术简介,组织化学术, 原位杂交术 (in situ hybridization) 为核酸(DNA和RNA)组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细胞内待测的核酸结合(杂交),从而在原位显示该核酸。,四、组织学技术简介,放射自显影术 图像分析术 细胞培养术 组织工程,其它技术,正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、 血管、角膜等;其中以组织工程皮肤较为成功, 已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病,复习题,名词解释 1. HE染色法 2. 组织 3. 免疫组织化学术 4. PAS反应 5. 超微结构,胃的大体解剖,胃的细微解剖,返回,PAS反应,显示小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒,返回,返回,免疫组织化学,显示胰岛B细胞,返回,原位杂交,显示脐静脉内皮细胞的心房钠尿肽阳性,

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