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绪论--组织学和胚胎学

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1、组织学与胚胎学 ( histology and embryology ),绪论(Introduction) 细胞(cell),组织学与胚胎学的定义和研究内容光学显微镜术电子显微镜术组织化学和免疫组织化学技术,原位杂交组织学与胚胎学的学习方法细胞连接重点与小结,内容提要,一、组织学与胚胎学的定义和研究内容,组织学（histology）：研究机体微细结构及其相关功能的科学。,研究内容：,胚胎学（embryology）：研究机体发生、生长及其发育机制的一门科学。,研究内容：,人体组织学（human organization)：研究人体结构（微细结构）的自组织过程及其规律的科学。,研究内容：,为什么学习组织学与胚胎学？,哪个是不正常的？,问题解决方法观察对象太小放大（显微镜）观察对象无色，无反差染色（HE染色）观察对象生化成分不同细胞化学、免疫组织化学观察对象是活体培养,二、组织学与胚胎学的研究方法和技术,(一) 光镜技术 1. 石蜡切片: 取材固定脱水透明包埋切片染色封片,2. 冰冻切片、涂片、铺片、磨片等,光镜标本制作程序,切片机,3. 组织切片染

2、色法,HE染色：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色,碱性染料,将嗜碱性物质（本身酸性）染成蓝色,酸性染料,将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色,细胞核中的DNA和RNA、细胞质中的RNA,细胞质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网）,嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏木精染成紫蓝色。嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊红染成红色。中性: 对于两种染料亲和力都不强的性质, HE染色着色淡。,组织结构的嗜色性,特殊染色法：硝酸银、地衣红、甲苯胺蓝染色法等活体染色：台盼蓝活体注射,地衣红染色示弹性纤维,甲苯胺蓝染色示肥大细胞,台盼蓝活体染色示巨噬细胞,血涂片Wright染色,透射电镜（transmission electron microscope）：观察细胞内部结构扫描电镜（scanning electron microscope)：观察组织或细胞表面的立体结构,（二）电子显微镜技术,分辨率：电镜(0.2nm)、光镜(0.2m),透射电镜结构图,透射电镜结构图,扫描电镜结构图,(三)组织化学技术 1一般组织化学术原理：化学或物理反应

3、原理应用：对组织或细胞内某种化学成分进行定性、定位、定量及相关功能的研究。,PAS反应：过碘酸-Schiff反应(periodic acid Schiff reaction, PAS反应）是显示组织或细胞内多糖的一种染色方法。,糖类PAS反应,肝糖原,小肠粘原颗粒,2.免疫组织化学(immunohistochemistry) 技术：原理：抗原和抗体特异性结合。应用：检测细胞、组织中多肽、蛋白质等。,（1）直接法,（2）间接法,免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）示胰岛B细胞呈胰岛素阳性,(四) 原位杂交技术(in site hybridization) 为核酸（DNA和RNA）组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示该核酸。,（五）细胞培养术（cell culture）细胞培养术：是把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。原代培养(primary culture)：传代培养(sub culture) ：细胞系(cell line) ：细胞株(cell strain) ：,超净工作台,培养箱,体外

4、培养的上皮细胞在相差显微镜下的图象,三、组织胚胎学学习方法要点,平面与立体的关系结构与功能相联系静态结构了解动态变化纵横联系深化认识,平面与立体,结构与功能,舒张状态,收缩状态,静态与动态,综合与比较,四、细胞（一）基本结构,（二）细胞连接 (cell junction) 1. 紧密连接 2. 中间连接 3. 桥粒 4. 缝隙连接,紧密连接 (tight junction) 功能: （1）阻止大分子物质由外部进入细胞间隙。（2）有一定机械性的连接作用。,功能: （1）粘着和连接相邻细胞。（2）保持细胞的形态。,2.中间连接(intermediate junction),3.桥粒 (desmosome) 是一种最牢固的细胞连接，多见于易受机械刺激或摩擦较多的部位。,功能：（1）利于细胞之间小分子物质和离子的交换，协调各细胞的功能。（2）利于细胞之间传递电冲动。,4. 缝隙连接 (gap junction),两种或两种以上的细胞连接紧接连在一起，则称为连接复合体。,连接复合体,（junctional complex)：,组织学研究技术新进展,流式细胞术(flow cytometry) 流式细胞仪形态计量术(morphometry) 图像分析仪,五、重点与小结,1. HE染色的概念 2.嗜酸性、嗜碱性、嗜中性的含义 3.PAS反应 4.免疫组织化学技术 5.原位杂交技术 6.细胞连接类型、功能 7.连接复合体,预习：人体的胚胎发生,

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