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组织胚胎学2014绪论-人卫7版

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1、普通高等教育国家级十一五规划教材组织学与胚胎学理论课件,组织学第1章绪论石玉秀中国医科大学,一、组织学的研究内容,组织学（histology）：研究机体微细结构及其相关功能的科学。,组织,上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织,细胞细胞间质,器官和系统,（细胞外基质）,细胞：是机体形态结构与功能的基本单位。组织：由细胞和细胞间质(又称细胞外基质) 组成的群体结构，是构成机体器官的基本成分。器官：具有一定的形态结构，并执行特定的生理功能。系统：由一些结构连续、功能相关的器官组合而成，完成连续的生理活动。,细胞-组织-器官-系统,人体器官分类组织学特征,实质性,器官,中空性,中央：大空腔,表面：被模如：消化腺、淋巴器官、内分泌腺、肾脏等。,如：心血管、消化管、呼吸道等,内部：实质行使功能,管壁：分34层,组织学结构观察,组织学结构,光镜结构用光学显微镜观察的结构（LM）(light microscope ,LM 简称光镜),电镜结构电子显微镜下观察的结构（EM）(electron microscope, EM简称电镜）又称超微结构(ultrastru

2、cture),二、组织学的研究方法和常用技术,(一)光学显微镜技术 1、常用组织切片标本制备技术石蜡切片术取材和固定; 脱水和包埋; 切片和染; 封片。其他；火棉胶包埋, 冰冻切片, 涂片,铺片,磨片等,苏木精伊红,碱性染料,酸性染料,染成红（嗜酸性）,细胞核中的染质、细胞质中的核糖体,细胞质细胞间质成份,染成蓝（嗜碱性）,常用染方法：HE染,（Hematoxylin）,（Eosin）,HE染,嗜碱性：可使细胞核内的染质及细胞质内的核糖体等结构染成蓝紫。嗜酸性：可使多数细胞的细胞质染成粉红。中性：与两种染液亲合力都不强。,组织结构的嗜性,嗜碱性,嗜酸性,A 嗜银性 B 嗜铬性 C 异染性,其它染方法,普通光学显微镜,是观察组织细胞微细结构最常用的工具，分为,光学部分,机械部分,起放大作用,光镜的分辨率约为0.2m,可放大1500倍左右,（light microscope ，LM ）,几种特殊显微镜术,（1）相差显微镜 (phase contrast microscope) 用于观察生活细胞和末经染细胞的形态结构。,神经干细胞培养,(2) 荧光显微镜 (f

3、luorescence micrscope) 是用以观察细胞、组织内荧光物质的分布。,神经球,(二) 共焦激光扫描显微镜,共焦激光扫描显微镜 (confocal laser scanning microscope，CLSM) 由激光光源、共焦成像扫描系统、电子光学系统和微机象分析系统四部份构成。可对样品进行断层扫描重建三维像，进行体视学分析；测定细胞内pH、钙浓度等；更精确地检测、识别，组织细胞的微细结构及其变化。CLSM又称细胞CT。,CLSM,CLSM 像,Human neuronal precursor cells,CLSM 海马MR、GR共存,(三)电子显微镜技术（electron microscope, EM）,透射电镜 (transmission electron microscope,TEM) 观察细胞内部结构分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万几十万倍扫描电镜（scanning electron microscope,SEM) 观察组织或细胞表面的立体结构冰冻蚀刻（freeze etching method）观察细胞断裂表面形态结构分析

4、电镜 X射线显微分析术（Xray microanalysis）研究细胞、组织内元素种类分布和含量,透射电镜与照片,TEM,淋巴细胞,扫描电镜与照片,SEM,SEM 1.纤毛 2.微绒毛,冰冻蚀刻细胞,冷冻断裂肾小球右下线粒体,冰冻蚀刻照片,分析电镜X线微区分析片,分析电镜,X线微区分析,糖类显示法PAS反应：过碘酸希夫反应 (periodic acid Schiff reaction，PAS)：检测组织或细胞中有无多糖存在。原理：,多糖,PA,氧化,醛,Schiff 试剂,紫红沉淀,(四)组织化学和细胞化学技术,PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在,PAS阳性小肠上皮,组织细胞化学染片,酶细胞化学神经元ACP酶阳性,脂类显示法苏丹,脂类显示法苏丹,锇酸髓鞘染,核酸显示法,利用抗原（antigen, Ag），抗体（antibody）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。,免疫细胞化学原理,免疫细胞化学标记物,免疫细胞化学PAP法,免疫细胞化学ABC法,(五)免疫组织化学与细胞化学技术,免疫组织化学术(immunohistochemistry

5、) 是将免疫学原理与组织化学技术相结合建立的新技术，根据抗原与抗体特异性结合的特点，检测组织细胞内某种多肽、蛋白质等大分子物质的存在与分布。,人鼻粘膜上皮棘细胞细胞间桥TM阳性,(六)原位杂交术,原位杂交(in situ hybridization) 是一种敏感性高、特异性强的，能在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术。常用的标记物有两种： 1、放射性同位素，如3H、14C、 32P、35S、125I， 2、为非放射性物质，如地高辛等。,非放射性原位杂交海马GAP43 mRNA,(七)放射自显影术,放射自显影术(autoradiograph) 旨在追踪某些物质在体内、组织或细胞中的分布与代谢径路。,放射自显影甲状腺125I,同位素注入,取材,制标本,涂核乳胶,暗室曝光,显影、定影,染,LM观察,(八)组织培养和组织工程,组织工程基本方法示意 A获取组织 B分离、培养种子细胞 C制备三维支架 D将种子细胞种植于支架 E将细胞-支架复合物植入组织缺损处,细胞培养神经干细胞培养,(九)组织细胞定量术,1显微分光光度术应用显微分光光度计(microspectrophotometer)对组织和细胞内化学成分进行定量分析。 2形态计量术运用数学和统计学原理对组织细胞内各种成分的数量、体积、表面积等的测量。目前多应用像分析。 3流式细胞术应用流式细胞仪进行细胞定量分析和细胞分类研究。,三、组织学的学习方法,1.理论联系实际 2.结构与功能关系 3.断面与立体的关系 4.建立动态变化的概念 5.善于总结，掌握规律,

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