免疫学检验-吞噬细胞检测及应用课件
14页1、,第十四章 吞噬细胞检测及应用,,体内具有吞噬功能的细胞群称为吞噬细胞,按其形态的大小分两类;一类为大吞噬细胞即单核巨噬细胞系统(mononuclear phagocytic system,MPS),包括血液中的大单核细胞及其进入各种组织后发育而成的巨噬细胞;另一类为小吞噬细胞,亦即中性粒细胞。,,第一节 中性粒细胞功能的检测,体内试验法(皮肤窗法) 体外试验法 1、滤膜小室法 2、琼脂糖凝胶平板法,细胞运动功能的检测,,硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验 本法用以检测中性粒细胞的胞内杀菌能力。由于细胞在杀菌过程中耗能剧增,其耗氧量亦随之相应增加,细胞内磷酸己糖旁路代谢活力增强,葡萄糖6磷酸酶氧化脱氢。此时加入NBT可接受所脱的氢,使原呈淡黄色的NBT还原成点状或块状甲臢颗粒,并沉积于胞质内。,吞噬和杀菌功能的检测,,第十七章 免疫球蛋白检测及应用,,人类免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)是由浆细胞合成、分泌的一组具有抗体活性的蛋白质,按其重链性质共分IgG()、IgA()、IgM()、IgD()和IgE()五类。IgG有一个亚型(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)。I
2、gA除有IgA1和 IgA2两个亚型外,还有分泌型 IgA(SIgA);它们的单体结构基本相同。lgM也有两个亚型IgM1和IgM2。,,第一节 IgG、IgA、IgM的测定,该法原理是将抗血清均匀地分散于琼脂或琼脂糖凝胶内,胶板上打孔,孔内注入抗原或待测血清,抗原内含有抗血清的胶内呈放射状(环状)扩散,在抗原抗体的量达到一定比例时形成可见的沉淀线。在一定条件下,抗原含量越高,沉淀环越大。,单向免疫扩散法,,免疫浊度测定方法的基本原理在第二十三章详细阐述。现国内大多数实验室都已开展此项检测技术,采用速率散射比浊法或终点散射比浊法进行常规免疫球蛋白及轻链片段的测定,按常规工作数据显示,用于检测IgG、IgA或IgM时,速率散射浊度的精密度门(CV)分别为6.6、4.9、8.0,远优于单向免疫扩散法(8.7、7.6、9.7)和终点法(1013)。,免疫浊度法,,第二节 体液中 IgG、IgA、IgM测定的临床应用 三、脑脊液Ig定量的临床意义,,第十九章 补体检测及应用,,第二节 补体总活性测定 血清补体总活性测定(CH50试验),补体最主要的活性是溶细胞作用。特异性抗体与红细胞结合后可激活补体,导致红细胞表面形成跨膜小孔,使胞外水分渗入,引起红细胞肿胀而发生溶血。补体溶血程度与补体的活性相关,但非直线关系。,实验原理,,绵羊红细胞 溶血素(hemolysin)即抗绵羊红细胞抗体 稀释缓冲液 50溶血标准管 取新鲜血清标本,实验方法,,先按表195配制不同稀释度的溶血素,,将上述稀释好的溶血素和各种其他试剂按表196依次加入各试管中,置37温育后观察结果。,
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