流式培训-b27-封闭抗体
24页1、HLA-B27/封闭抗体检测临床应用,主要内容,一、流式细胞仪简介 二、人类白细胞抗原(HLA-B27)中的临床应用 三、封闭抗体检测在临床中的应用,流式细胞术,流动,细胞,测量术,Flow Cytometry (FCM),Fluorescence-activated cell-sorting (FACS),流式细胞术,流式细胞术,快速检测流动的单细胞或颗粒,达上万个/每秒 检测物可以是细胞、细菌或各种微粒,0.5 - 50 mm范围内,多参数同时分析,FS/SS/FLs (荧光) 可分析,可分选,特 点,特 点:,人类白细胞抗原系统(Human Leucocyte Antigen,HLA),俗称为白细胞血型,是人类的组织相容性抗原,HLA抗原受控于HLA基因。 HLA基因是由一组高度多态性基因组成的染色体区域,因其产物代表移植供者与受者相互接受的程度,故又称其产物为移植抗原或组织相容性抗原。,一、HLA简介,HLA基因遗传区域位于人类第六号染色体短臂,区域内包含224个基因座位,已发现的等位基因数共1288种。根据编码分子的特性不同,可将整个复合体的基因分成:I类、 II类、III类
2、。,I 类基因:区位于着丝点的远端,主要包括HLA-A、B、C三个位点,各位点有数目不同的等位基因,HLA-B27是B位点的一个等位基因。 II 类基因区:位于着丝点的近端,主要由DR、DQ、DP三个亚区构成,每个亚区又分若干个位点。在B细胞和上表达,这两类抗原都与移植有关 III 类基因区: 含有编码补体成分C2、C4、B因子及TNF、热休克蛋白和21羟化酶的基因,其产物是一些可溶性蛋白质。,一、HLA-B27,HLA-B27抗原属于HLA-类抗原,由和两条肽链组成。 第6号染色体的HLA-类基因编码链,15号染色体编码链。 基本上表达在机体所有有核细胞上,尤其是淋巴细胞表面含量丰富。 目前,在HLA与疾病的关联研究中,较有临床应用价值的当数HLA-B27与强直性脊柱炎的关联。在诊断和鉴别强直性脊柱炎中有重要的应用价值。,二、 HLA-B27检测方法,1.HLA-B27抗原检测 CDC: 微量淋巴细胞毒法 FCM :流式细胞学法 2.HLA-B27基因学检测 荧光定量PCR,(一)微量淋巴细胞毒法 1. 原理:待检的淋巴细胞表面的HLA-B27抗原与已知的HLA-B27抗体结合,在补
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