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血液学检验绪论课件

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    • 1、血液学检验,检验教研室 马雪莲,2016-1-10,中西医结合学院,血液病离我们远吗,绪 论,概论,发展史,与检验关系,绪 论,概论 血液学(hematology) 临床血液学(clinical hematology) 临床血液学检验 (hematologic laboratory science),概论,发展史,与检验关系,绪 论,概论 一 血液学(hematology): 研究对象:血液、造血组织 研究内容:,绪 论,概论 二 临床血液学: 研究对象: 血液病(原发、继发),病因、病机、临床表现、诊疗,绪 论,绪 论,临床科室-血液科,绪 论,概论 临床血液学检验:,手段,基础,对象,绪 论,概论 临床血液学检验:临床血液学实验室,绪 论,发展史 # 血液探索史: 中国 西方 # 血液学研究史-显微镜发明: 一. 血细胞 二. 血栓与止血 三. 造血干细胞 四. 血液学检验发展史,概论,发展史,与检验关系,绪 论,血液探索史,概论,发展史,与检验关系,石器时代- 砭石放血病,公元前400年内经-藏神主血脉, 刺络放血,“滴血认亲”,吸血强身,公元前400年希波克拉底,公元500-1

      2、500)理发师用柳叶刀放血,16世纪末期-荷兰人制作简易显微镜,1628年哈维提出了血液循环,1674年列文虎克观察血液,1799年开国总统华盛顿-死于放血疗法,1840年-维多利亚女王家族血友病,中国,西方,乔治华盛顿-美国首任总统(17321799),维多利亚女王(18191901),哈维-英国科学家(1578-1657),绪 论,血液探索史 我国古代:石器时代-砭石放血治病 公元前400年内经-“藏神”和“主血脉” ,刺络放血 “滴血认亲” 西方: 早期曾崇拜,神秘血液-吸血强身 古希腊医圣希波克拉底(公元前460年-前370年)-血在四种体液中占主导地位 中世纪(公元500-1500)理发师用柳叶刀放血 16世纪末期-荷兰人制作简易显微镜, 1628年哈维提出了血液循环 1674年荷兰亚麻商人安东尼凡列文虎克-血液由含有非常小的圆球状物的水晶体般雾状 的水组成,测量了它们的大小 1799年开国总统华盛顿-死于放血疗法,20世纪逐渐淘汰 1840年-维多利亚女王的9子中,3/4男为血友病,5女为携带者-皇室遗传病,概论,发展史,与检验关系,绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论

      3、,发展史,与检验关系,16世纪末-简易显微镜-放大几十倍,19世纪-普通光学显微镜-分辨率1微米(放大率极限2000倍) 显微结构,2个世纪,绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论,发展史,与检验关系,电子显微镜-分辨率10nm (放大率上万倍) 超微结构(亚显微结构),绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论,发展史,与检验关系,纳米显微镜(扫描探针显微镜) 分辨率0.1nm (放大率百万倍) 实现原子水平的观察及操控-纳米生物学,扫描探针示意图,纳米显微镜照片,绪 论,血液研究发展史 血细胞发展史 16世纪到17世纪-显微镜-红细胞、白细胞及血小板。 19世纪-计数法的改善,红细胞来源于骨髓及建立血细胞染色法-形态学阶段。 1900年-ABO血型确立-开创输血领域。 1945年-Coombs建立抗人球蛋白试验-对免疫血液学做出贡献。 1949年-镰状贫血是Hb异常而提出“分子病”-分子水平。,概论,发展史,与检验关系,绪 论,1. 红细胞认识,概论,发展史,与检验关系,血细胞发展史,1871-1876年-发现了红细胞有携氧能力,且参与组织的呼吸作用。 20世纪20年代-红细胞体外

      4、保存需葡萄糖,30年代体外保存血液,40年代建立血库 1946年-红细胞寿命120天左右,1959年以后对红细胞糖代谢全面了解。 20世纪80年代-A、B型转化为O型血成功,Rh阳性转换为Rh阴性。,绪 论,一.血细胞发展史 2 白细胞认识 1892-1930年-白细胞有趋化、吞噬和杀菌作用。 1910年-单核细胞为“打扫战场的清道夫”,1976年之后称之为“单核吞噬细胞系统”。 1959年-淋巴细胞转化为免疫母细胞并能分裂增殖,浆细胞是B淋巴细胞转化。B淋巴细胞产生抗体,T淋巴细胞产生细胞因子。,概论,发展史,与检验关系,白细胞,单核细胞,淋巴细胞分裂,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史-血细胞发展史 3 血小板认识 1842年发现血小板,40年后了解到止血和修复血管作用, 1923年发现其粘附和聚集功能。 血小板超微结构研究 近年发现血小板颗粒,绪 论,概论,发展史,与检验关系,二 血栓与止血的发展史 2000年以前,犹太人记载了血友病 20世纪50年代后对凝血机制有了深入了解 60年代凝血机制的“瀑布学说”得到公认 70年代发现新的凝血与纤溶相关因子 80年代开展对纤维连接

      5、蛋白等粘附因子的研究 90年代至今,完善并拓宽“瀑布学说”,拓宽血栓与止血的研究领域。 分子水平研究:对内皮细胞、血小板、凝血和纤溶等在血栓中的作用从分子水平有了更深入的了解。,发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,1896年,Wilson在著作中用到“干细胞” 1981年Evans和Martin从小鼠胚囊内细胞团分离出胚胎干细胞,发展史 三 造血干细胞发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史 三 造血干细胞发展史 20世纪提出造血干细胞概念, 60年代初,Tills等用致死量射线照射 小鼠进行骨髓移植,发现造血干细胞,1984年,Civin提出表达CD34抗原细胞即造血干细胞。 1979年,体外成功培养人造血祖细胞。 1990年,造血干细胞移植治疗遗传病、白血病和再障。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史 三 造血干细胞发展史,干细胞(stem cell)是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。 胚胎干细胞 (ES细胞) 1 根据发育阶段 成体干细胞 存在于成熟个体各组织中的干细胞 2 根据发育潜能 全能干细胞(TSC细胞):胚胎

      6、干细胞 多能干细胞:造血干细胞,神经干细胞 专能干细胞 :肝脏干细胞,肠上皮干细胞,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史 三 造血干细胞发展史,胚胎干细胞是早期胚胎中分离出来的一类细胞,它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境,ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,1 胚胎干细胞研究在美国颇具争议,发展史 三 造血干细胞发展史,2 美国科学家从成体动物提取成体干细胞,并不能转化成各种器官组织,不能取代胚胎干细胞。 3 iPS细胞是将多能遗传基因导入皮肤等细胞中而成。让普通体细胞“初始 化”具备干细胞功能即iPS细胞 iPS细胞和ES细胞除了不能生成胚胎以外,可以产生所有细胞,如用于医疗,那么理论上可以治愈所有疾病凡是不好的组织去除,替换为重新生长的正常组织。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,血细胞是造血干细胞增殖和分化的结果。不断生成新细胞替代衰老退变细胞,维持体内各类细胞恒定。,造血干细胞是由胚胎干细胞发展而来,具有高度自我更新和多向分化两个基本特征,发展史 三 造血干细胞发展史,绪 论,概论,发展史

      7、,与检验关系,四 血液学检验的发展史,发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,1 无染色的血细胞形态学检验时期 (17世纪后期19世纪中期),1852-1867年,血细胞显微镜计数(包括血细胞吸管、血细胞计数板),绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,2 染色的血细胞形态学检验时期(19世纪中期起),1856年,Erb用某些合成染料染血液 1879年,Ehrlich(德国细菌学家欧立希)用纺织染料染色固定血涂片 1898年,Ehrlich等报告三酸染色法(橘黄G、甲基绿及酸性品红组成的混合染色液) 1891年,Romanowsky(罗曼若夫斯基)用改良的甲基蓝混合染色液鉴定疟原虫,并可区分不同的白细胞 1902年, Wright,Giemsa改进染色剂 Romanowsky型混合物染色剂具有良好的染色效果,直到现在其基本配方仍被广泛使用,这一混合染色剂由甲基蓝、伊红和天青组成,依据染色后细胞的大小、形状及色彩深浅进行鉴别,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,2 染色的血细胞形态学检验时期(19世

      8、纪中期起),绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,3 骨髓细胞形态学检验时期(20世纪20年代起),1903年,Wolff首创骨髓穿刺术,用于动物实验。同年,Pianess应用于人体 1929年,Arinkin用改进的简便胸骨穿刺吸引法,在住院病人身上获取胸骨骨髓涂片,为骨髓检查奠定了基础,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,4 骨髓组织学检验时期(20世纪20年代-70年代进入快速发展时期), 骨髓病理组织学研究与骨髓抽吸物涂片检查几乎同时起步 20世纪70年代起,骨髓活组织工具改良以及新技术应用,特别是不脱钙组织块塑料包埋半薄切片技术的应用,使骨髓病理组织学检查快速发展,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,5 细胞化学染色检验时期(20世纪初起,5070年代为鼎盛时期),1867年,铁的普鲁士蓝染色法,后被应用于骨髓铁染色 1909年,过氧化物酶染色,瑞士吉姆萨染色 铁染色 POX染色,绪 论,概论,发展史,与临床关系,发展史,5 细胞化学染色检验时期(20世纪初起,5070年代为鼎盛时期),1

      9、939年,苏丹黑B染色 1939年,1955年,中性粒细胞碱性磷酸酶染色 1960年,过碘酸雪夫反应 1953年1977年,各种酯酶染色,急性粒细胞白血病(M2a)氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色,中性粒细胞碱性磷酸酶染色,正常血细胞PAS染色,1.原始粒细胞,呈弱阳性;2.幼稚粒细胞,呈强阳性;3.中性杆状核粒细胞,呈强阳性,绪 论,概论,发展史,与临床关系,发展史,四 血液学检验的发展史,6 细胞 免疫学检验时期(20世纪50年代起,80年代进入快速发展时期),20世纪40-70年代,免疫荧光标记技术,免疫酶标技术,ELISA技术,20世纪80年代,统一命名白细胞分化抗原(CD)、白血病免疫表型分析,7 细胞遗传学检验时期(20世纪50年代起,80年代进入快速发展时期),20世纪40年代,肿瘤细胞的染色体理论 20世纪50年代,确认人类染色体46条,标志着人类细胞遗传学开始 20世纪60年代,慢粒患者的白血病细胞中发现Ph染色体,第一次将染色体异常与特定肿瘤类型联系在一起,是肿瘤细胞遗传学史上里程碑 20世纪7080年代,白血病细胞遗传学表型与形态学类型与临床治疗和预后,肿瘤的生物学有关,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,8 分子生物学及基因检验时期(20世纪80年代起,90年代进入快速发展期),1983年,BCR-ABL融合基因 20世纪90年代,分子血液学时代,应用分子生物学的思维,评估患者预后,个体化治疗等,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,1930年,卡尔兰德斯坦纳(KarlLandsteiner) (美籍奥地利人),发现ABO血型 为输血、器官移植、胎母不相容和亲子鉴定的理论基础。 兰德斯坦纳生日6月14日定 为

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