细菌形态学检查课件
28页1、医学微生物学实验室规则:,学生进微生物实验室必须穿好工作服,离室需脱下反折,要经常清洗消毒; 进实验室时随带书包、衣物等与实验无关物品一律存放指定的储物柜内; 严禁在实验室进食、饮水和抽烟; 手拿培养物后或出实验室前要洗手,必要时用消毒液泡手; 实验过程中避免一切不良的个人习惯;操作中产生的垃圾不得随意抛掷,要扔在指定的桶内,细 菌 形态学检查,新乡医学院基础医学院科教科 3029945,主讲:马玉龙 15903060813 Email:,形态学检查分类 一、不染色标本检查(活体) 悬滴法 压滴法 二、染色标本检查 单染法:简单染色,一种染料 (美兰染色) 复染法:复杂染色,两种以上染料(革兰染 色、抗酸染色),染色标本检查法的一般步骤,一、涂片制备 涂片 干燥 固定 二、染色 初染 媒染 脱色 复染 注:固定的目的 1、杀死细菌,保持细菌原有的形态和结构 2、增加细菌的通透性,使细菌易于着色 3、使细菌牢牢地黏附在玻片上,不至于在染色 过程中被水冲掉,革兰染色(Gram stain),1884年由丹麦医师Gram创立 革兰染色是最常用的一种染色方法,可以将细菌初步分为革兰染色阳性菌和
2、革兰染色阴性菌,在临床上具有非常重要的意义,一、目的,1、掌握细菌涂片的制备及革兰染色的方法 2、了解革兰染色的原理和临床意义,1、通透性学说 2、等电点学说 3、化学学说,二、原理,通透性学说,G+菌细胞壁结构致密,肽聚糖层厚且交联度高,脂质含量少,乙醇不易进入 G-菌细胞壁结构疏松,肽聚糖层薄且交联度低,含大量脂质,乙醇易渗入。,等电点学说,G+菌等电点(pI23) G-菌等电点(pI45) 在相同pH条件下G+菌所带负电荷比G-菌多,所以与带正电荷的结晶紫染料结合较牢固,不易脱色。,化学学说,G+菌菌体内含有大量核糖核酸镁盐,可与碘、结晶紫等染料牢固结合,使已着色的细菌不易被乙醇脱色 G-菌 菌体内含核糖核酸镁盐很少,故易被脱色,1、菌种 葡萄球菌 大肠杆菌 2、试剂 革兰染色液 初染液 结晶紫 媒染液 卢戈氏碘液 脱色液 95%乙醇 复染液 稀释石碳酸复红 3、其它 载玻片 染色盘 接种环 酒精灯等,三、器材和试剂,冲洗,染色完成之后,在涂片区滴上香柏油使用油镜观察实验结果,四、方法与步骤,1min,1min,30s,30s,冲洗,冲洗,冲洗,1、细菌涂片的制备 涂片 干燥 固
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