红细胞检查课件

1、第二节 红细胞检查,主要内容,一. 红细胞计数 二. 血红蛋白测定 三、血细胞比容测定 四、红细胞平均值的计算 五. 红细胞形态检查 六、网织红细胞计数 七、嗜碱性点彩红细胞计数 八、红细胞沉降率侧定 九、红斑狼疮细胞检查,一. 红细胞计数（red blood cell）,【概述】 【检测原理】 【方法学评价】 【参考值】 【 质量控制】 【临床意义 】,返回,【概述】,红细胞在正常情况下几乎占血容量的1/2，平均寿命是120 天，每天约有8%的衰老和退化变性的红细胞经脾破坏， 血红蛋白降解，分解为铁、胆色素、蛋白质代谢和血红蛋 白的重新合成。 红细胞外形：双凹圆盘形，平均直径7.2m，厚约2m， 无核 主要成分（除水外）：主要是血红蛋白，主要是O2和 CO2 ，并协同维持酸碱平衡。,返回,【检测原理】,红细胞计数：即测定单位体积血液中RBC的数量 。 有显微镜法和仪器法。 1、红细胞显微镜计数法原理：用等渗的稀释液将血 液稀释一定倍数后，滴入计数板，在显微镜下计数一定 范围的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细 胞数 红细胞稀释液 Hayem液： NaCl： 调节渗透压 Na2

2、SO4：提高比重防止细胞粘连 HgCl2： 防腐 缺点：不适宜高球蛋白血症患者。 枸橼酸钠稀释液： 普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水： 2、血细胞分析仪法：电阻抗和（或）光散射原理,返回,【方法学评价】,1、手工显微镜法： 是传统的红细胞计数法，不需要特殊的设备，但操作复杂、费时，现虽不常用，但仍作为： 血液分析仪的校正。 与白细胞减少或血小板严重减少时的对照核实。 血小板受小红细胞干扰时的校正 2、血细胞分析仪法： 仪器法已成为目前细胞计数的主要方法,仪器法比手工法更精确,且操作简便、快速，已广泛应用。,返回,【参考值】,成年男性：(4.05.5)1012/L 成年女性：(3.55.0)1012/L 初生儿： (6.07.0)1012/L,返回,【 质量控制】,1计数误差：同白细胞计数 2白细胞的影响：当WBC100 109/L，RBC计数应校正。方法以有两种： （1）可直接将病人红细胞数减去白细胞数。 （2）直接在高倍镜下区别红白细胞。,返回,【临床意义 】,1生理性变化 2病理性变化 （1）病理性增多 （2）病理性减少,返回,1、生理性变化,年龄与性别差异: 精神因素: 剧烈体

3、力运动和体力劳动: 气压降低: 妊娠中后期:,返回,（1）病理性增多,相对性增多：暂时性血液浓缩如呕吐、高热、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤等。 绝对性增多：包括继发性增多的组织缺氧EPO代偿性增高，如严重慢性心肺疾病、发绀性先天性心脏病、异常血红蛋白病等；EPO非代偿性增高如与某些肿瘤和肾脏有关的疾病如肾癌、肝细胞癌、子宫肌瘤、卵巢癌、肾胚胎瘤、肾积水、多囊肾和肾移植后等。原发性如真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等。,返回,（2）病理性减少,1）红细胞生成减少 骨髓功能衰竭 造血物质缺乏或利用障碍如肾性贫血 2）红细胞破坏过多 红细胞内在缺陷如膜缺陷 红细胞酶缺陷 血红蛋白异常 不稳定Hb和红细胞外在异常等 3）红细胞丢失 急性、慢性失血性贫血,返回,二、血红蛋白测定,【概述】 【检测原理】 【方法学评价】 【参考值】 【质量控制】 【红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义 】,返回,【概述】,1. 化学成分：珠蛋白（含两条 链和两条非 链）+亚铁血红素（Fe+2+原卟啉 ） HbFe2+ + O2 称氧合血红蛋白（Hb O2）。 HbFe2 + CO 碳氧血红蛋白(HBCO) H

4、bFe2+ （99%）称还原Hb (Hbred) . HbFe3+ （1%）高铁血红蛋白(Hi)或正铁血红蛋白(MHB) 2空间结构：四聚体 3血红蛋白种类： 正常成人： HbA （ 22） 占9698% HbA2（ 22 ） 占2%-3% HbF （ 22 ） 占2%以下 胎儿主要血红蛋白,返回,血红蛋白结构,返回,【检测原理】,血红蛋白是一种色素蛋白,可以用比色法测定.血液中血红蛋白以各种形式存在,包括氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白或其他衍生物。 1、氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法： 在血液中各种血红蛋白（HbS外）均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，再和CN-结合生成稳定的氰化高铁血红蛋白（HiCN） HiCN在540有一吸收波峰,用分光光度计测定该处的吸光度,再换算成每升血液中血红蛋白的浓度,或制备标准曲线计算: HICN的最大吸收峰为540nm,消光系数为44 Lmmol-1 cm -1 。,下一页,计算公式,可根据下式进行计算： Hb（g/L）=A/4464458（mg）/1000251 =A367.7=Hb（g/l） A：为测定管吸光度 44：为毫摩尔消光系

5、数 64458/1000：为1mmol/LHb溶液中所含Hb 251：为稀释倍数,下一页,2、其他方法,1、十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白测定法（SLSHb） 2、碱羟血红蛋白（AHD575） 3、叠氮高铁血红蛋白（Hi）,返回,【方法学评价】,1、氰化高铁血红蛋白测定法（ HiCN ） 是国际血液血标准化委员会推荐的血红蛋白国际标准参考方 法。HiCN法操作简单，显色快且结果可靠，可检测除硫化血红 蛋白（SHb）外的各种血红蛋白，但强调仪器的标准化，在实际 工作中，往往使用HiCN参考液，通过绘制标准曲线求出K值来教 正结果，HiCN法在国内已经普及但并非理想的方法，其致命的 弱点是试剂氰化钾有巨毒。 2、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SLSHb） 突出优点是试剂无毒，多用此法代替HiCN，但其摩尔消光系 数还未最后测定，故其用HiCN法间接出结果。破坏白细胞，不 能用此稀释液做白细胞计数。,返回,【参考值】,成年男性：120160g/L 成年女性：110150g/L 新生儿： 170200g/L,返回,【质量控制】,1技术误差：稀释倍数、分光光度计、比色杯 2HICN转化液：置于棕色

6、玻璃瓶 3HICN参考液：部级质量参考标准 4.质控物： （1）ACD抗凝的全血 （2）进口的全血质控物 （3）醛化半固定的红细胞 （4）溶血液 （5）冻干全血,返回,下一页,【红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义】,1红细胞和血红蛋白增高 标准： 成年男性RBC6.0 1012/L, Hb 170g/L 成年女性RBC5.5 1012/L, Hb 160g/L (1)生理性变化：年龄与性别差异: 精神因素: 剧烈体力运动和体力劳动: 气压降低: 妊娠中后期: （2)病理性增多： 相对增多：如呕吐、大面积烧伤、 严重腹泻、大量出汗等。 绝对增多：慢性心肺疾病、真性红 细胞增多症。,2红细胞和血红蛋白减低,生理性贫血: 如妊娠中晚期、6个月至2岁、老年人。 病理性贫血：1、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、 2、造血原料不足：缺铁性贫血、巨幼性贫 3、红细胞破坏增加： 4、红细胞的丢失过多 贫血的分度 轻度贫血：成年男性 120g/L，成年女性 110g/L 中度贫血：Hb 90g/L 重度贫血：Hb 60g/L 极度贫血：Hb 30g/L,返回,三. 血细胞比容测定,【概述】 【检测原理

7、】 【测定方法及方法学评价】 【质量控制】 【参考值】 【临床意义】,返回,【概述】,红细胞比积：（hematocrit ,Hct,Ht ,HCT或packed cell volume , PCV ）以前称为红细胞压积指在一定条件下经离心 沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。其高低与 红细胞数量及大小有关。ISCH建议的缩写符号是PCV表示。 HCT常用于血细胞分析仪上的测定结果。PCV测定的常规方 法分为：常量法（wintrobe法） 微量法（microhematocrit）,返回,【检测原理】,1、wintrobe法和微量法： 均属于离心法。将抗凝的血液（全血）置于孔径统一的温氏 管或标准毛细管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细 胞层占全血的体积比。 2、血液分析仪法： 由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标导出。HCT=红细 胞计数红细胞平均体积,返回,【测定方法及方法学评价】,（一）手工法： 1、wintrobe法： 方法：将EDTAK2抗凝血灌注于Wintrobe管，在一定条件下 离心（2264g、min）得到红细胞在全血中所占体积的百分 比，称为血细胞比容 。离心

8、后血细胞分五层：分别为血浆层 （淡黄色）、血小板层（白色乳糜）、白细胞层（灰红色）、 有核红细胞层（灰红色）、还原红细胞层（黑色）及带氧红细 胞层，读数红细胞层（还原红细胞层及带氧红细胞层） 方法学评价：该法无法完全排除血细胞之间的残存留的血 浆，因此要比真实值要高（3），标本量多，耗时长，目 前已被微量法代替,下一页,2微量法,方法： 微量法采用一次性的使用的毛细玻璃管（长：75mm 内径：0.81.0mm 厚:0.200.25mm),离心力为10000g5min 方法学评价: 该法标本用血量小、简便、快捷、血细胞间残留血浆量 较温氏法低，被WHO作为首推方法。,下一页,（二）血细胞分析仪法：,1电阻抗微量比容法 原理:利用血浆是电的良导体,而相对血细胞是电的不良导体的原理 方法学评价:自动化程度高、快速(15s30s)、操作简便、便于推广，但血样中白细胞和血小板明显增加或有异常蛋白质时会引起测量误差。 2血细胞分析仪法 MCV和RBC导出,由于仪器测定数万个血细胞体积产生的脉冲叠加后换算而来的,避免了血浆的残留引起的误差。,返回,【质量控制】,1、手工法： 注意避免以下因数：抗凝剂

9、量不准确，混匀不充分，离心速度不够均会产生误差。红细胞形态异常时可是血浆的残留增加6%，红细胞增多症时，血细胞比容明显增高是血浆残留也会增高 2、血液细胞分析仪法：,返回,【参考值】,温氏法： 男：0.40-0.50 女：0.37-0.47 微量法： 男：0.470.04; 女：0.420.05,返回,【临床意义】,1、红细胞比积增高： 生理性增高：高原生活、剧烈运动、新生儿 病理性增高：原发性和继发性红细胞增多症、脱水、烧伤 2、 红细胞比积减低 ： 各种贫血，心衰，输血 3、 可用作真性红细胞增多症、临床输血及输液疗效观察的一项指标 4、Hct是计算MCV、MCHC的基础数据之一 5、 Hct是影响全血粘度的决定性因素之一,返回,四、 红细胞平均值计算,（一）平均红细胞体积(MCV) （二）平均红细胞血红蛋白含量(MCH) （三）平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC) （四）临床意义,返回,（一）平均红细胞体积,平均红细胞体积（mean corpuscular volume, MCV）： 指红细胞群体中各个红细胞体积的平均值 单位：fl（10-15 L） MCV=每升血液中红细胞比积/每升血液中红细胞个数 MCV=HCT/RBC 参考值 手工法：80-92fl 1mL=1012fl,返回,（二）平均红细胞血红蛋白含量(MCH),平均红细胞血红蛋白含量 （mean corpuscular hemoglobin, MCH ）指红细胞群体中各个红细胞血红蛋白含量的平均值 单位：pg （10-12 g） MCH=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞个数Hb1012/RBC/L（皮克） 参考值 手工法：27-31pg 1g=1012pg,返回,（三）平均红细胞血红蛋白浓度,平均红细胞血红蛋白浓度. (concentration mean corpuscular hemoglobin, MCHC) ：指测Hct时被压紧的RBC 的血红蛋白浓度（g/L） MCHC=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比积 MCHC =

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