1、浮游植物的定量 (10月22日),浮游生物定量的步骤。 取水样1000毫升 加固定液 浓缩至50毫升 取浓缩后的水样0.1毫升 置于0.1毫升计数框内 压上盖玻片 显微镜下 先低倍后高倍 用400倍600倍观察 分类记数(每个样本计数两片取其平均值) 推算出原水样中的生物量,(1)采样点和采样层次 由于水面大小、水深、水流等条件不同,不同水域的采集点的选择也有差别。 采样点设置的原则: 采样点在平面上的分布要有代表性。,池塘,样点可设在距岸边1米处。 水深2米时采中层水样或距表层0.5米处; 水深2米时,最好采上、中、下层水样。 亚表层:水下20厘米 中层:水体中间部分 下层:离底20厘米,样点可设在上、中、下游 上游:设10个点(亚表层或中层) 中游:水在2-3米深时设一个点,采2个样(亚表层、中层) 下游:设2-3个样点。中心点3个样(上、中、下层),两侧点各一个样,河流,中心区设一点,进水口和出水口也应设点。 水深2米者,可于采样点水下0.5米处采水, 水深2米10米以内,应于距底0.5米处另采一个水样, 水深10米时,应于中层增采一个水样。,水库及湖泊,(2)采水量及采样次数,
2、卡盖式采水器,不锈钢采水器,有机玻璃采水器,采样次数可多可少, 有条件时可逐月采样一次, 一般情况可每季采样一次, 最低限度应在春季和夏末秋初各采样一次。 养殖池可随时进行采样。,每一采样点应采水1000毫升, (1)系一般性调查,可将各层采水等量混合,取1000毫升混合水样固定; (2)分层采水,分别计数后取平均值。分层采水可以了解每一采样点各层水中浮游植物的数量和种类。 水样应立即加入15毫升碘液(即鲁哥氏液)固定。,鲁哥氏液,6克的碘化钾溶解于20毫升的水中,完全溶解后加入4克的碘,溶解后,定容至100毫升。,(3)沉淀与浓缩,凡以碘液固定的水样瓶塞要拧紧,还要再加入24的甲醛固定液以利保存。 定量水样应放入1000毫升分液漏斗中。 沉淀器应置于平稳处,避免震动。 水样倾入2小时后应将沉淀器轻轻旋转一会,以减少藻类附着在器壁上。 静置24小时36小时。,用内径为30毫米的橡皮乳胶管,接上橡皮球,利用虹吸法将沉淀上层清液缓慢吸出(切不可搅动底部,万一动了应重新静置沉淀)。,为不使漂浮水面的某些微小生物等进入虹吸管内,管口应始终低于水面,虹吸时流速流量不可过大,吸至澄清液1/3时,应
3、控制流速流量,使其成滴缓慢流下为宜。,10月24日,剩下30毫升沉淀物,流入50毫升的定量瓶中以备计数。再用上述虹吸出来的“上清液”少许,冲洗三次沉淀器,冲洗液也转移到比色瓶中。,(4)计数,将浓缩沉淀后水样充分摇均(平摇)后 吸出0.1毫升 置于0.1毫升计数框内(表面积最好2020毫米) 在400倍或600倍显微镜下观察计数,计数要求,每片大约计算100个视野 但视野数可按浮游植物多少,而酌情增减, 如果平均每个视野有十几个时,数50个视野就可以了, 如果平均每个视野有5个6个时就要数100个视野, 如平均每个视野不超过1个2个时,要数200个视野以上。 每片计数300个(低密度时)-500个(高密度时),数横条,最少不少于5条,具体可自行掌握 总之不论数视野还是数横条,每片计数300-500个 每瓶标本计数二片,取其平均值。 同一标本的两片计数结果与其均数之差如果不大于其均数的10%,这两个相近的值的均数视为计数结果。,同一样品的两片计算结果和平均数之差如大于其均数的10%,还必须计数第三片,上述三片计数值中,两个相近的值与其均数之差距如果不大于其均数的10%,这两个相近的值的均
4、数即可视为计数结果。,计数时优势种类尽可能鉴别到种,其余鉴别到属。,计数中的浮游植物的数量, 最好用细胞数表示。对不易用细胞数表示的种类可计算其群体或丝状体数。,计数具体要求,A、校正计数框容积, B、定量用的盖玻片应以碱水或肥皂水洗净备用,用前可浸于70酒精中,用时取出以细绢拭干。 C、滴取样品以后最好用液体石腊封好计数框四周,以防计数过程中干燥。 D、以目微尺测所用显微镜一定倍数下的视野直经。 E、选好与计数框同样容积的吸管备用。 F、定量时应将浓缩标本水样充分摇匀,快吸快滴。 G、加上盖玻片后不应有气泡出现。 H、计数后的定量样品应保存下来。,1640=640放大倍数,在高倍物镜下台微尺的刻度线显得很粗,而且目微尺的刻度与它相比是很细的,故校正时,目微尺左端的刻线应放在台微尺左端刻线的左旁边缘。,一升水中的某种浮游植物的数量(N)可用下列公式计算: N = Cs V Pn FsFn U 式中:Cs一一计数框面积(毫米2)。 Fs一一每个视野的面积(毫米2)。 Fn一一计数过的视野数。 V一一升水样经沉淀浓缩后的体积(毫升)。 U一一计数框的体积(毫升)。 Pn一一每片通过计数实际
5、数出的某一种浮游植物的个数。 如果计数、显微镜固定不变,Fn, V, U亦固定不变,公式中: Cs V FsFn U 用常数K代替,上述公式可简化为:N = KPn,(5)生物量的换算,因为浮游植物中不同种类的个体大小相差较悬殊,用个体数或细胞数都不能反映水体丰欠的真实情况,且浮游植物的个体极小,除特殊情况外无法直接称重,一般按体积来换算。,由于浮游植物大都悬浮于水中生活,其比重应近于所在水体水的比重即近于1。 因此体积可换算为质量:1毫升体重相当于1克质量 109微米3 1 毫克湿重(鲜藻重),球形、园盘形、园锥形、带形等可按求体积公式计算。 纤维形、多角形、新月形以及其他种种形状可分割为几个部分计算。,由于在不同环境中生长的同一种藻类的细胞体积差异很大,套用所谓的标准生物量表提供的数值计算某一具体水体的生物量有时会产生很大的误差。所以条件允许应对优势种和亚优势种进行直接量算,非优势种群查阅表格。,至少随即测量20个,求出优势种和亚优势种的个体重的平均值。此平均值乘以一升水中该种藻类的数量,即得到一升水中这种藻类的生物量(毫克/升)。,定量结果应列出总生物量,各门生物量和优势种属。,
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