微生物菌种复壮与保藏课件
21页1、第十一章 工业微生物菌种复壮与保藏,第一节 菌种的退化与复壮 第二节 工业微生物菌种的保藏,退化的自发性:微生物菌种在传代繁殖中受环境条件的影响,多数情况下会出现退化。退化不是突然发生的,而是从量变到质变的逐步演变的过程。 退化的可延缓性:要求菌种永远不退化是不可能的,但积极采取措施,可使菌种优良特性延缓退化。 延缓退化的思路:在了解菌种退化原因后,减少传代,科学保藏,经常纯化分离。 保藏方法通常有两类: 一类保藏时间较短,如琼脂营养斜面等 另一类保藏时间较长,如沙土法等 保藏方法的基本原理是抑制菌种的代谢活动,使之停止繁殖,处于休眠状态。,第一节 菌种的退化与复壮,一、菌种退化的定义 生产菌种或选育过程中筛选出来的较优良菌株,由于进行移接传代或保藏之后,群体中某些生理特征和形态特征逐渐减退或完全丧失的现象。,二、菌种退化的原因 (一) 基因突变 (二) 连续移代 (三) 培养和保藏条件的影响,(一) 基因突变 1. 基因突变导致菌种退化 2. 质粒脱落导致菌种退化,(二) 连续移代,(三) 培养和保藏条件的影响 不良培养条件如营养成分、温度湿度、pH值、通气量等和保藏条件如营养、含水
2、量、温度、氧气等,不仅会诱发低产基因型菌株的出现,而且会造成低产基因和高产基因细胞的数量比发生变化。 培养基条件影响不同类型细胞或细胞核的数量 培养基也会影响菌种形态特征和培养特征 不良的环境,如温度、湿度、pH值、氧气等都会不同程度的引起菌种退化。,三、菌种退化的防止 1. 尽量减少传代:减少自发突变的几率。 2. 菌种经常纯化: 3. 创造良好培养条件:适合原种的生长。 4. 用单核细胞移植传代:孢子。 5. 采用有效的菌种保藏方法:数量性状。,四、菌种的复壮及其方法 (一) 菌种复壮的原理 人们通过人工选择法分离筛选出那些原有优良性状的个体,使菌种获得纯化,这一过程即复壮。 “狭义复壮”:在菌种已发生退化的情况下,通过纯化分离和测定生产性能等方法,从退化群体中找出少数尚未衰退的个体,进一步繁殖,以达到恢复该菌种原有典型性状的一种消极措施。 “广义复壮”:在菌种的生产性能尚未退化前就经常有意识地进行纯种分离与生产性能的测定工作,以保持菌种稳定的生产性状,甚至使其逐步提高的一种积极措施。,(二) 菌种复壮的主要方法 1. 纯种分离 2. 淘汰法:低温处理 3. 宿主体内复壮法:寄生性
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