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血栓与止血检验基础理论

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  • 上传时间:2019-03-29
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    • 1、血栓与止血检验基础理论,Vessel wall,Blood platelets,Coagulation factors,anti-coagulation substances,fibrinolysis,Hemostasis coagulation,凝血因子概述 凝血机制及分子基础,一、凝血因子概述,I-XIII(缺VI),FIV为Ca2+ 激肽释放酶原、高分子激肽原 多为糖蛋白,肝内合成,存在于血液中 FIII在组织内 正常情况下,大部分以酶原形式存在,凝血因子分类 (一)维生素K依赖因子 F( 凝血酶原) F(稳定因子) F(血浆凝血活酶成分) F(stuart-prower因子) (PC、PS) 分子结构中的氨基(N)末端含有- Gla - Gla在肝细胞内的生物合成依赖Vit K 的介导 具有结合Ca2+的能力,并借助于Ca2+与磷脂膜结合,Ca2+起“搭桥”作用形成(-羧基谷氨酸Ca2+-磷脂膜) 若缺乏Vit K 或上述4个因子N端无- Gla 则无凝血活性,可导致新生儿出血或获得性成人出血性疾病。,凝血因子分类 (二)接触因子 F(接触因子) F(血浆凝血活酶前质) PK(

      2、激肽释放酶原) HWWK(高分子量激肽原),凝血因子分类 (三)对凝血酶敏感的凝血因子 F (纤维蛋白原) F(易变因子) F(抗血友病球蛋白) F(纤维蛋白稳定因子) (四)其他 F(组织因子) F(钙离子),二、凝血机制及分子活化基础,HMWK,F,激活FX和IX,沟通内源及外源凝血途径。 VII缺陷合并严重出血,1.外源凝血途径,TF释放到TF-FVIIa-Ca2+形成是最重要的凝血途径,Tissue factor (TF),VII,VIIa- TF,IX,IXa,X,Xa,XIa,VIIIa,Extrinsic Pathway,外源凝血途径 TF释放TF-VIIa-Ca2+ 由组织因子启动的凝血过程,形成III、VII、Ca2+复合物血管受损后,来自损伤部位的因子III和由XIIa、Ixa、激肽酶激活的因子VIIa,与Ca2+形成复合物。,Coagulation Factor XII (contact factor) 单链糖蛋白,内源凝血途径的始动因子。 FXII的激活不再是体内凝血的一个重要环节,而对纤溶系统的激活作用更大。 体外凝血试验仍有沿用各种物质去激活FXII。,2.

      3、内源凝血途径,FXII的激活:,固相激活,与带负电荷的物质接触 - 体内:胶原、微纤维、基底膜 长链脂肪酸等 - 体外:玻璃、白陶土、硅藻土等 分子构型发生改变 活性部位暴露 FXIIa,激肽释放酶原 prekallikrein , PK PK与HMWK以复合物的形式存在。 PK缺陷与FXII一样,病人无任何出血症状,却常合并血栓栓塞性疾病,PK,FXIIa,精371-异亮372 肽键断裂,K(酶活性中心位于轻链, 重链区有于HMWK结合 的部位), K的作用是激活FXII、FXI,高分子量激肽原 high molecular wight kininogen ,HMWK 起辅因子(cofactor)作用 参与FXII、FXI的激活 生成的激肽有扩张血管、增加血管通透性及降低血压的作用 HMWK缺陷与其他接触活化因子缺陷病人一样,无出血症状。,FXI与HMWK结合成复合物的形式存在 FXIa激活纤溶的作用大于激活FIX, 甚至大于FXIIa对纤溶的作用,FXI,凝血酶 或 体外FXIIa,精369-异亮370 肽键断裂,FXIa(活性中心位于2条 轻链C端的丝氨酸残基),Coagulat

      4、ion Factor XI 血浆凝血活酶前质 plasma thromboplastin antecedent ,PTA,因子IX-血浆凝血活酶成分 plasma thromboplastin component, PTC 可被FXIa或TF-FVIIa-Ca2+复合物激活 FIX缺乏为血友病B,是一种性联隐性遗传性疾病,FIX,FXIa,精146-丙147 肽键断裂,无活性 双链 -FIX,FXIa,使重链上 的精181-缬182 肽键断裂,有活性 -FIXa,因子复合物-抗血友病球蛋白 antihemophilic globulin ,AHG 由因子促凝活性与vWF形成复合物形式存在(1:99) a的辅因子,被a激活 Fa F缺乏为血友病A,是最常见的出血性疾病。,Queen Victoria (1837-1901) Spanish German Russian,XII,Contact (Eg: with glass),XIIa,XI,XIa,IX,IXa,X,Xa,VIIIa,PL,Ca+,Intrinsic Pathway,概念: 内源性凝血途径 FXIIFIXa-VIIIa-

      5、Ca2+-PF3 参与这一反应系统的凝血因子,全部来源于血 液,形成IX、VIII、Ca2+、PF3复合物,因子X-stuart-prower因子 处于-内、外源及共同途径的交点 可被IXa-VIIIa-Ca2+-磷脂、TF-FVIIa -Ca2+激活,有活性 的-FXa,FX,重链上的精51-异亮52 肽键断裂,从其N端 释出一小肽,从其C端释出含 17个氨基酸残基 的一小肽,有酶活性 的-FXa,3.共同凝血途径,因子V-易变因子 labile factor 体外最不稳定 的凝血因子 是FXa的辅因子,参与II的激活 起始凝血酶、FXa FV FVa FV缺陷有副血友病之称,有轻度出血症状。,凝血酶(thrombin) 生成,FII,A和B两条 肽链构成 的凝血酶 (FIIa),凝血酶原酶,精274-苏275 肽键断裂, 释放出F1+2,中间 产物,凝血酶原酶,精323-异亮324 肽键断裂,纤维蛋白形成,纤维蛋白形成过程(Fibrin Formation),Fg,FM,纤维蛋白聚合物,交联 纤维蛋白,凝血酶 FXIIIa,Fibrin,Xa,Coagulation Pathway

      6、,Extrinsic pathway (Tissue factor),Prothrombin,Thrombin,Fibrinogen,Intrinsic pathway (Contact),X,共同凝血途径 FXFb形成 经内、外两种途径形成的IX-VIII-Ca2+-PF3复合物及III-VII-Ca2+复合物激活XXa,与V、Ca2+、PF3形成复合物(凝血酶原酶)激活FII凝血酶裂解FI纤维蛋白,深化凝血机制,二、凝血机制及分子活化基础,HMWK,几个复合物 FIXa-VIIIa-Ca2+-PF3 (+)FX TF-VIIa-Ca2+ (+)FX,FIX Fxa-Va-Ca2+-PF3 凝血酶原酶,内外凝血途径的凝血因子有交叉作用 VIIa激活IX XIIa、激肽酶,IXa参与因子VII的激活 组织因子(外源性)也可产生于血管内,凝血因子特性 II prothrombin :共同途径 VII stable factor :外源途径 IX Christmas factor :血浆凝血活酶成分,内源途径 X Stuart-Prower factor :内外源及共同途径 XII Hag

      7、eman factor :接触因子,内源始动因子 XI plasma thromboplastin antecedent : 血浆凝血活酶前质,内源 PK:内源 HMWK:内源,接触反应起辅因子作用,凝血因子特性 I fibrinogen :凝血酶作用底物 V proaccelerin, labile factor :易变因子,最不稳定 VIII antihemophilic factor :抗血友病球蛋白,内源 XIII fibrin-stabilizing factor :纤维蛋白稳定因子 III Tissue factor :组织因子,外源途径 IV Calcium :促凝血因子与磷脂表面成复合物,二、凝血机制及分子活化基础,HMWK,1.正常血液中通常没有下列哪一种凝血因子: A XIII B组织因子 C D E 2.外源性凝血系统的作用起始于 A.组织受伤释放组织因子III B.凝血酶的形成 C.第因子被激活 D.血小板第三因子的释放 E.第X因子被激活,Vessel wall,Blood platelets,Coagulation factors,anti-coagulat

      8、ion substances,fibrinolysis,Hemostasis coagulation,抗凝血系统,抗凝血酶 (AT) 蛋白C系统 组织因子途径抑制物(TFPI) 其他:,1. 抗凝血酶(AT),由肝脏、血管内皮细胞、巨核细胞合成; 丝氨酸蛋白酶抑制剂,是人体内最重要的血浆抗凝物质,对凝血酶的灭活能力占70%80%。 有肝素结合位点和凝血酶结合位点 肝素作用于AT的赖氨酸残基从而大大增强AT的抗凝酶活性(2000倍以上)。 正常血浆中AT含量超过凝血酶三倍,当AT下降至50%时,即有血栓形成可能。当血浆中AT降至30%,肝素就不能起加强灭活凝血酶作用。,抗凝机制,抗凝血酶,抗凝血酶 (AT) 蛋白C系统 组织因子途径抑制物(TFPI) 其他:,抗凝血系统,2.蛋白C系统 蛋白C,蛋白S:肝脏合成,依赖VitK的抗凝蛋白,蛋白S是蛋白C 的辅因子 凝血酶调节蛋白(TM):存在于内皮细胞中 内皮细胞蛋白C受体(EPCR) 作用:灭活FXa,FVIIIa,FVa。,抗凝血酶 (AT) 蛋白C系统 组织因子途径抑制物(TFPI) 其他:,抗凝血系统,4_05,3.Tissue F

      9、actor Pathway Inhibitor (TFPI),TFPI与Xa结合再与TF/VIIa结合抑制外凝,抗凝血酶 (AT) 蛋白C系统 组织因子途径抑制物(TFPI) 其他:,抗凝血系统,4.蛋白Z(PZ)和蛋白Z依赖的蛋白酶抑制物(ZPI) PZ为VitK依赖的糖蛋白,肝脏合成。 ZPI为丝氨酸蛋白酶。 作用:灭活FXa。,Vessel wall,Blood platelets,Coagulation factors,anti-coagulation substances,fibrinolysis,Hemostasis coagulation,纤维蛋白溶解系统,纤溶系统组成及特性 组织型纤溶酶原激活物(tPA) 尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA) 纤溶酶原(PLG) 纤溶酶(PL) 纤溶酶原激活抑制物(PAI), 2 抗纤溶酶(2-AP) AT-, 2-M, 1-AT,纤维蛋白溶解机制 Fg/Fb被纤溶酶溶解,称纤维蛋白溶解(纤溶) 纤溶酶原 纤溶酶 溶解Fg/Fb、分解多种凝血因子、激活激肽系统和补体系统、抑制血小板粘附和聚集,纤溶酶原激活物,纤维蛋白溶解系统,纤维蛋白溶解机制 纤溶酶原激活的途径 内激活途径 XIIa和激肽酶将纤溶酶原激活为纤溶酶 外激活途径 t-PA、u-PA等将纤溶酶原激活为纤溶酶 外源激活途径 溶栓药SK和UK将纤溶酶原激活为纤溶酶,纤维蛋白溶解系统,纤维蛋白原 凝血酶 非交联纤维蛋白 因子XIII 交联纤维蛋白 纤溶酶

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