2017-2018学年同步备课套餐之生物浙科版选修1课件:第一部分 第2课时
42页1、第2课时 分离以尿素为氮源的微生物,第一部分 微生物的利用,考试要求,一、实验目的、原理、设备、用品及材料准备,二、分离以尿素为氮源的微生物,内容索引,当堂检测,一、实验目的、原理、设备、用品及材料准备,基础梳理,1.实验目的 (1)使用专一的培养基(含有 )分离专一的细菌(有 的细菌)。 (2)利用指示剂颜色的变化检知酶( 酶)所催化的反应。 2.实验原理 (1)脲或称尿素,是 的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素,利用尿素作为其生长的 。 (2)(NH2)2COH2O _,尿素,脲酶,脲,蛋白质降解,氮源,2NH3,CO2,3.设备及用品 灭菌锅或高压锅、250 mL的三角瓶1个和100 mL的三角瓶2个、封口膜和橡皮圈、培养皿4个、 和玻璃刮刀、恒温培养箱、摇床、酒精灯和 、一次性塑料手套、装有酒精棉球的广口瓶、镊子、有盖的试管(15 mm150 mm)5支和试管架、 。 4.实验材料 (1)在100 mL烧杯中装入50 mL 70%酒精,将 浸泡在其中。 (2)在100 mL三角瓶中配制好25 mL (0.25 g蛋白胨,0.12 g酵母提取物,0.25 g NaCl和0.5
2、 g琼脂糖,水25 mL),加上封口膜后 待用。,接种环,超净台,移液器,玻璃刮刀,全营养LB固体培养基,灭菌,(3)在100 mL三角瓶中配制好25 mL尿素固体培养基(0.025 g葡萄糖,0.12 g NaCl,0.12 g K2HPO4,0.25 mg酚红和0.5 g琼脂糖,水15 mL),加上封口膜后 ,待冷却至60 时,加入通过 (使之无菌)的10 mL (内含2 g脲),摇动,混合均匀后待用。 (4)将盛有4.5 mL 的5支有塞试管灭菌后待用。 (5)在250 mL三角瓶中装入99 mL蒸馏水,用封口膜盖上, 后待用。 (6)土样1 g(从 的地方取得)。,灭菌,G6玻璃漏斗过滤,尿素溶液,蒸馏水,灭菌,有哺乳动物排泄物,问题探究,1.为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基? 答案 琼脂是未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化合物。如果用琼脂固化培养基,会为细菌提供一定量的非尿素类氮源,这样会在尿素固体培养基上产生大量非以尿素为氮源的细菌,不利于以尿素为氮源的细菌的筛选,故而用经纯化的琼脂糖而不用琼脂做固化剂。,答案,2.分离以尿素为氮源的微生物实验所用培养基为 培养基。
3、在该培养基配方中,为微生物的生长提供碳源的是 ,提供氮源的是 ,琼脂糖的作用是 。 3.微生物要利用尿素需要分泌脲酶,不能分泌脲酶的微生物不能利用尿素。据此该培养基对微生物具有 作用,其选择机制是只有_ 的微生物才能在该培养基上生长。,答案,尿素固体,葡萄糖,尿素,凝固剂,选择,能够分泌脲酶,从而以尿素作为氮源,4.有脲酶的细菌在生态系统稳态中起什么作用? 答案 如果土壤中有许多尿素,在自然界较高温度下会被水解,水解后的氨使土壤变成碱性,氨与其他阴离子物质如 等形成化合物,则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解,并利用了所形成的氨,有利于自然界中氮的循环。,答案,5.酸碱指示剂是用来指示反应前后的酸碱性变化的。尿素在被脲酶作用前是 性的,而作用后产生了NH3,变成了 性,本实验使用 作为指示剂,在酸性情况下呈 色,碱性情况下呈 色,变色范围是pH6.48.2。培养后,由于细菌产生的脲酶向周围扩散,培养基中的尿素分解产生的氨使培养基变碱性,于是酚红由黄色变成红色,这就表明 。圆形红色区域愈大,表明这种菌利用尿素的能力愈强。,答案,中,碱,酚红,黄,红,以尿素为氮源的细菌分
4、泌了脲酶并分解了尿素,活学活用,1.在缺乏氮源的培养基上,大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出 A.乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌 B.固氮细菌、大肠杆菌、放线菌 C.固氮细菌、霉菌、放线菌 D.固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌,答案,解析,解析 固氮细菌可以在无氮培养基上生长; 青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长,但不会抑制霉菌的生长; 加入10%的酚的培养基可以抑制细菌和霉菌的生长,但不会抑制放线菌的生长。,2.下列有关叙述,不正确的是 A.脲是一种有机化合物,含有氮元素 B.地表土壤中含有一定量的脲 C.以尿素为氮源的细菌含有脲酶 D.在尿素固体培养基上培养含有脲酶的微生物会导致培养基呈酸性,答案,解析,解析 根据反应式:(NH2)2COH2O 2NH3CO2,在尿素固体培养基上培养含有脲酶的微生物会产生NH3,从而导致培养基呈碱性。,二、分离以尿素为氮源的微生物,基础梳理,1.实验中的对照设置 (1)实验组:以 培养基进行培养。 (2)对照组:以
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