2017-2018学年同步备课套餐之生物北师大版选修3课件:第3章 第2节 第1课时
41页1、第1课时 动物细胞培养技术与单克隆抗体技术,第3章 第2节 动物细胞工程,目标导读 1.结合教材P5355图文,掌握哺乳动物细胞培养条件和流程。 2.分析教材P55图314,理解动物细胞融合技术。 3.单克隆抗体的制备过程。 重难点击 1.动物细胞培养条件和流程。 2.单克隆抗体的制备过程。,课堂导入,1970年,有两位科学家做了人鼠细胞融合的实验,以证明细胞膜的流动性。思考该如何实现人鼠细胞的融合,动物细胞融合后还有什么用途呢?植物体细胞杂交可得到杂种植株,动物细胞融合后能像电影上一样形成杂种动物个体吗?,一、哺乳动物细胞培养技术,二、动物细胞融合与单克隆抗体技术,内容索引,当堂检测,一、哺乳动物细胞培养技术,1.动物细胞培养条件 (1)培养基状态和成分: 培养基,成分主要包括葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和 等。,液体,动物血清,基础梳理,动物细胞进行培养时通常要添加动物血清的原因有两点:一是补充合成培养基中不足的营养物质;二是为动物细胞提供与内环境相似的生活环境。,小贴士,(2)气体环境:需要足够的 和一定的二氧化碳。二氧化碳具有调节 的作用。 (3)温度和pH:培养温度要与 温
2、度保持一致;培养基的适宜pH为 。,氧气,培养液pH,动物体内,7.27.4,2.动物细胞培养流程,(1)取材:取动物的 或幼龄动物的组织或器官剪碎,加入适量_ 使细胞分散。 (2)原代培养:经过滤、 后将动物细胞接种到 的培养液中,在适宜的条件下进行静止或慢速转动培养,称为原代培养。 贴壁生长:悬液的细胞贴附在培养瓶的表面,开始 分裂,其数目以 增长的方式增多。 接触抑制:贴壁细胞分裂铺满培养瓶的整个表面,细胞 时,细胞分裂停止。,胚胎,胰蛋,白酶或胶原纤维酶,离心,无菌,有丝,指数,相互接触,(3)传代培养:贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞增殖,即为传代培养。 细胞生长到 代左右时,出现生长停滞,大部分细胞 。 极少部分细胞可以传到 代,遗传物质 (填“有”或“没有”)发生改变。 有些细胞(如肿瘤细胞) 发生了改变,可以无限制的传代下去。,10,衰老死亡,4050,没有,遗传物质,问题探究,结合动物细胞培养的过程分析下列问题: 1.为什么要取动物的胚胎或幼龄动物的组织或器官细胞进行细胞培养?,答案 这类细胞具有较强的分裂能力,容易培养。,答案,2.培
3、养过程中两次使用胰蛋白酶,目的有何不同?,答案 第一次是将组织分散成单个细胞,第二次是将贴满瓶壁的细胞分散成单个细胞。,3.能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?,答案 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,多数动物细胞培养的适宜pH为7.27.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性。,答案,4.动物细胞培养为什么需要无菌、无毒的环境?,答案 离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力,一旦受到污染或自身代谢物质积累等,培养的细胞就会死亡。,解析 动物细胞培养需要在无菌条件下进行,培养前要用胰蛋白酶或胶原纤维酶使细胞分散。动物细胞培养利用了细胞有丝分裂的原理,主要目的是获得大量的具有相同遗传特性的细胞。细胞传代培养至50代以后,遗传物质可能发生改变。,拓展应用,1.有关动物细胞培养的叙述中,正确的是 A.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 B.动物细胞培养的主要目的是获得大量的细胞分泌蛋白 C.细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原纤维酶使细胞分散,答案,解析,2.下列有关植物组织培养和动物细胞培养的比较中,叙述错误的是 A.所用的培养基的成分基本相同 B.植物组织
4、培养的结果是培育成植株,动物细胞培养的结果是培育成很 多细胞 C.植物组织培养的目的是为了快速繁殖和获得无病毒的植株,动物细胞 培养的目的是为了获得细胞产物或杂交细胞 D.植物组织培养的原理是细胞的全能性,动物细胞培养的原理是细胞的 增殖,答案,解析,解析 动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,另外还有动物血清等。植物组织培养所用的培养基包含植物生长和发育的全部营养成分,如矿质元素、有机营养成分、植物激素,但没有动物血清。,动物细胞培养与植物组织培养的比较,二、动物细胞融合与单克隆抗体技术,1.细胞融合 (1)概念:在一些 的作用下,将 的细胞合并成为一个细胞的技术。 (2)融合方法 物理、化学方法:与植物体细胞杂交相同,如 、电流刺激等。 生物方法: 。 2.单克隆抗体 (1)定义:由一个 增殖形成的细胞群所产生的 分子。,融合因子,基础梳理,两个或两个以上,聚乙二醇,灭活的病毒,B淋巴细胞,单一型抗体,(2)制备过程 取小鼠体内的 细胞和 的骨髓瘤细胞。 用 诱导两种细胞融合。 利用 筛选出杂交瘤细胞。 在新的培养液中大量繁殖。 注射到小鼠
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