2017-2018学年同步备课套餐之生物北师大版选修1课件:第4章 第14课时
30页1、第14课时 蛋白质的提取和分离,第4章 现代生物技术,学习导航 1.阅读教材P7475内容,理解电泳、同工酶和蛋白质组学。 2.结合教材P7375内容,进行乳酸脱氢酶同工酶的提取和电泳分离。 3.结合教材P7375内容,总结在琼脂糖凝胶电泳中影响蛋白质迁移率的因素。 重难点击 1.进行乳酸脱氢酶同工酶的提取和电泳分离。 2.总结在琼脂糖凝胶电泳中影响蛋白质迁移率的因素。,一、电泳、同工酶和蛋白质组学,二、乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离,内容索引,当堂检测,一、电泳、同工酶和蛋白质组学,基础梳理,带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多,应用非常广泛,它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。 1.电泳 (1)概念:带电粒子在 的作用下发生 的过程。 (2)原理 带电粒子:许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有 的基团,在一定的pH下,这些基团会带上 。,电场,迁移,可解离,正电或负电,迁移动力与方向:在电场的作用下,带电分子会向着与其_ 的电极移动。 分离依据:电泳利用了待分离样品中各种分子 以及分子本身的 、 的不同,使带电分子产生 ,从而实现样品中各种分子的分
2、离。,所带电荷,相反,带电性质的差异,大小,形状,不同的迁移速度,(3)常用的电泳方法 琼脂糖凝胶电泳:在电泳缓冲液和凝胶中加入琼脂糖,蛋白质分子的迁移速率主要取决于其所带 以及分子的 等因素。 变性胶电泳:在电泳缓冲液和凝胶中加入十二烷基硫酸钠(SDS)变性剂,蛋白质都变为 形,SDS带有大量的 电荷,掩盖了不同蛋白质的电荷差异,因此变性胶电泳中影响蛋白质的迁移速率的主要因素是蛋白质分子的 。,净电荷,大小和形状,椭圆,负,大小,2.同工酶 同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子 、 乃至 性质不同的一组酶。乳酸脱氢酶一般含有 种同工酶,其相对分子质量 ,但所带电荷 。 3.蛋白质组学 蛋白质组学指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质的_ 分析、 研究和蛋白质的 等。由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生、细胞代谢等过程的整体而全面的认识。蛋白质组学的研究不仅能分析生物体内蛋白质的 ,还可以揭示各种蛋白质在生物体内的 。,结构,理化性质,免疫学,5,相同,不同,氨基,酸组成,立体结构,人工合成,组成,相互作用与联系,1.从电荷方面思考,适合电泳法分离的各种分子需具备什么条件
3、? 答案 各种分子应带有不同种类和不同量的电荷。 2.变性胶电泳分离蛋白质是否依据蛋白质所带电荷的差异?为什么? 答案 否。因为SDS能与蛋白质结合,形成蛋白质SDS复合物,SDS所带负电荷的量远大于蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差异,使电泳迁移率完全由蛋白质分子的大小决定。,问题探究,答案,归纳总结,琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳的两点区别 (1)分离原理不同 琼脂糖凝胶电泳依据分子所带电荷的差异和分子大小、形状等。 变性胶电泳则完全取决于分子大小,而非电荷性质和分子形状。 (2)用途不同 琼脂糖凝胶电泳广泛应用于核酸的研究中,用于分离大分子核酸。 变性胶电泳则广泛应用于分离蛋白质和相对分子质量较小的核酸。,拓展应用,1.带电荷的蛋白质在电场中移动的速度主要取决于 A.所带的电荷多少 B.蛋白质的分子大小 C.蛋白质的相对分子质量 D.蛋白质的分子大小和所带的电荷多少,答案,2.下列说法中,不正确的是 A.同工酶催化的化学反应相同,但结构不完全相同 B.同工酶的相对分子质量一定不同 C.蛋白质的多样性决定了其功能的多样性 D.蛋白质组学是21世纪生命科学研究领域新的
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