《纯培养和显微技术》ppt课件
61页1、第2章 纯培养和显微技术,南京工业大学生物与制药工程学院 蔡恒,微生物的基本特点:,小!,在绝大多数情况下都是利用微生物的群体来研究其属性;,微生物的物种(菌株)一般也是以群体的形式进行繁衍、保存;,培养技术在微生物学中具有重要意义!,参见P13,在研究中所使用的微生物培养群体:,培养物:在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体,混合培养物:含有多种微生物的培养物; 纯培养物: 只有一种微生物的培养物;,通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果,纯培养技术是进行微生物学研究的基础!,参见P13,微生物个体微小的特点也决定了显微技术是进行微生物研究的另一项重要技术,因为绝大多数微生物的个体形态及其内部结构只能通过显微镜才能进行观察和研究。 (P12第一段),微生物的基本特点:,小!,参见P13,第一节 微生物的分离和纯培养,无菌概念、纯培养概念、纯培养物的获得方法,第二节 显微镜和显微技术,各种显微镜的基本原理及其样品制备方法,第一节 微生物的分离和纯培养,从混杂的群体中分离特定的某一种微生物, 是研究和利用微生物的第一步。,一、无菌技术,用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物
2、; 在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染,其自身也不污染环境; (P14第1段),(参见P13、14),一、无菌技术,参见P14,一、无菌技术,参见P14,1、微生物培养的常用器具及其灭菌,常用的器具:,试管、瓶子、培养皿等,1887年,R J Petri 发明,Petri dish,参见P14,装有培养基后称为“培养平板” Or “平板”(plate),(具体灭菌方法第6章介绍),高温干热灭菌,高压蒸汽灭菌,试管、瓶子、培养皿等,常用的灭菌方法:,1、微生物培养的常用器具及其灭菌,常用的器具:,参见P14,2、接种操作,无菌操作:,火焰附近(酒精灯、煤气灯)进行,参见P15,二、用固体培养基分离纯培养,培养基:,液体培养基; 固体培养基; 半固体培养基;,参见P15,二、用固体培养基分离纯培养,培养基:,液体培养基; 固体培养基; 半固体培养基;,固化剂,柯赫(Robert Koch) 的助手W Heese和 他的夫人Fran Heese,参见P15,琼脂,二、用固体培养基分离纯培养,菌落(colony):,单个(或聚集在一起的一团)微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到
3、一定程度可以形成肉眼可见的、 有一定形态结构的子细胞生长群体。 (P15,倒数第2段),众多菌落连成一片,菌苔(lawn),不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征 (形状、颜色等),可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据 (见P15,倒数第二段;图2-3)。,斜面培养基上细菌菌苔特征,液体培养基中细菌生长特征,二、用固体培养基分离纯培养,使微生物在固体培养基平板上形成单个菌落的基本方法:,稀释!,参见P16,二、用固体培养基分离纯培养,1、稀释倒平板法,2、涂布平板法,操作较麻烦,对 好氧菌、热敏感 菌效果不好!,使用较多的常规 方法,但有时涂 布不均匀!,参见P16,二、用固体培养基分离纯培养,3、平板划线法,参见P16,二、用固体培养基分离纯培养,3、平板划线法,参见P16,3、平板划线法,参见P16,二、用固体培养基分离纯培养,4、厌氧微生物的分离,厌氧罐,厌氧手套箱,参见P17,二、用固体培养基分离纯培养,4、厌氧微生物的分离,厌氧罐,厌氧手套箱,参见P17,二、用固体培养基分离纯培养,4、厌氧微生物的分离,稀释摇管法,参见P16,三、用液体培养基
4、分离纯培养,稀释法进行液体分离必须在同一个稀释度的许多 平行试管中,大多数(一般应超过95%)表现为不生长。,在有细菌生长的试管中得到纯培养的几率为97.5%,参见P17,四、单细胞(孢子)分离,一般采用显微操作仪,在显微镜下进行;,操作难度与细胞或个体的大小成反比;,参见P1718,通过机械、空气或油压传动装置来减小手的动作幅度, 在显微镜下用毛细管或显微针、钩、环等挑取单个 微生物细胞或孢子以获得纯培养。,利用刚才介绍的技术,我们是否有可能获得某一个生态环境(例如1克土壤)中所有种类细菌的纯培养?,假设待分离的细菌均能利用某一相同的培养基生长,同一生态环境中混杂存在着不同种类的细菌; 不同细菌在数量存在差异;,微生物在自然条件下存在的特点:,五、选择培养分离,抑制大多数其它微生物的生长;,使待分离的微生物生长更快;,使待分离的微生物在群落中的数量上升, 方便用稀释法对其进行纯化。,微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化:,没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切微生物生长的要求,在一定程度上所有的培养基都是选择性的。 ( P18 第2大段),使待分离的微生物生长“突出”;
《《纯培养和显微技术》ppt课件》由会员tia****nde分享,可在线阅读,更多相关《《纯培养和显微技术》ppt课件》请在金锄头文库上搜索。
2024-04-11 25页
2024-04-11 37页
2024-04-11 28页
2024-04-11 31页
2024-04-11 36页
2024-04-11 29页
2024-04-11 22页
2024-04-11 27页
2024-04-11 34页
2024-04-11 32页