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食用菌生产与加工4 食用菌培养基制作技术

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    • 1、第四章 培养基的制作,第一节 母种培养基制作,第二节 原种、栽培种培养基制作,第三节 液体菌种制作技术,教学目的:熟练掌握各级培养基 的制作方法 。,教学重点:培养基的制作方法 。,第一节 母种培养基的制作 一、菌种培养基 (一)按营养物质种类分类 l.天然培养基 常用的生物材料有马铃薯、胡萝卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵母等。适合于各类微生物的生长 2.合成培养基 是指用已知成分和数量的化合物配制而成的培养基。适用研究 3.半合成培养基 利用天然物质作为碳、氮源及维生素的来源另加一些无机盐类配制而成,(二)按培养基的物理状态分类 1.液体培养基 不加琼脂,多用于生理生化方面研究,培养 液体菌种等。 2.固体培养基 凝固剂的量,琼脂冬季为1.5%-2.0%,夏 季2.2%-2.3%。 3.半固体培养基 含有较少量琼脂(0.2%-0.5%)的培养基, 使培养基未达到固态而呈粘稠状态。,二、母种培养基配方:,1.土豆200g、糖20g、琼脂18g、水1000ml 2.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、水1000ml、PH值自然,另外添加:麸皮20g、玉米面5g、

      2、黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g,硫酸镁2g,VB11片(10mg)。此配方适用于大多数菌种,金针菇、黑木耳、灵芝生长尤其茁壮。可作黑木耳复壮培养基。 3.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、水1000ml、PH值自然,另外添加:麸皮20g、玉米面5g、黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g,硫酸镁2g,VB11片(10mL),平菇子实体100g。此配方适用于大多数菌种生长。做平菇的复壮培养基效果显著。 4.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、水1000ml、PH值自然,另外添加:麸皮20g、玉米面5g、黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g,硫酸镁2g,VB11片(10mg)1片,香菇子实体100g。此配方适用于大多数菌种生长,可做香菇的复壮培养基,效果显著。,(一)营养液制作 1. 准备工作,三、制作方法,2. 称量、材料预处理 按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、挖掉芽眼后称量200g,切成1cm见方的小块。琼脂剪碎后用水浸泡。,3. 熬煮 将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中,煮至酥而不烂。,4. 过滤、加可溶药物 用双层沙布过滤,取滤汁,放在电饭锅中加 入糖,5. 熬

      3、琼脂、定容 在沸腾状态下加入琼脂,直到琼脂完全溶化为止,定容至1000ml。,(二)营养液分装 1. 用注射器分装 2. 分装标准:分装量为试管长度的1/41/5。注意培养基不能沾污试管口。,3.塞棉塞 棉塞松紧适度,1/3在管外,2/3在管内。 4.扎捆 7-10支试管捆在一起,棉塞上包好防水纸,直立放入高压灭菌锅中。,(四) 摆斜面 灭菌结束后锅盖开1/5的小缝,用余热烘干报纸和 棉塞,然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2,(三)灭菌处理 在1.01.5 kg/cm2压力下维持20-30min。,(四) 摆斜面 灭菌结束后锅盖开1/5的小缝,用余热烘干报纸和 棉塞,然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2,第二节 原种、栽培种培养基制作,一、常见原种配方,木屑培养基配方 细木屑80%,麸皮12%,玉米面1%,黄豆粉2%,过磷酸钙1.5%,红糖0.5%,尿素0.4%,硫酸镁0.1%,石灰1%,石膏2%,料:水=1:1.0-1.2。此配方适合香菇、黑木耳、平菇原种生长,菌丝粗壮洁白。 玉米芯培养基配方 玉米芯80%,麸皮14%,糖0.5%,过磷酸钙1%,石灰2%,尿素0.5%,玉米面2%,

      4、料:水=1:1.4-1.5。此配方适合于培养平菇原种,菌丝生长速度快,且菌丝粗状。,玉米芯、木屑混合培养基配方 玉米芯42%,木屑20%,豆秸20%,麸皮10%,过磷酸钙1.5%,石灰2%,石膏1%,糖0.5%,玉米面3%,料:水1=1:1.4-1.5。此配方适合于培养平菇原种。生长健壮,也可培养金针菇,滑子蘑原种。 软质木屑配方 椴木屑75%(木线厂下脚料,颗粒较大),麸皮15%,玉米面5%,石膏1.5%,石灰1%,糖0.5%,过磷酸钙1.5%,尿素0.5%,料,水=1:1.2左右。适用于金针菇,滑子蘑等分解基质能力较弱的品种使用。,麦粒、木屑培养基配方 新鲜、优质小麦80%,阔叶树木屑20%,木屑:水=1:1左右,拌木屑用煮小麦水,或在此基础上,加入总量0.5%的过磷酸钙,0.5%的蔗糖,1%的石灰,在麦粒煮好后连同木屑拌入。 玉米粒培养基配方 优质新鲜玉米100%,或后期加入0.5%过磷酸钙,0.5%的糖,1%的石灰。 玉米粒培养基制作的原种,具备麦粒原种的优点,后劲更足,接种扩繁量更大。,二、原种培养基的制作方法 一、谷粒培养基制作 1.按配方称量各营养物质 配方一:优质新鲜小

      5、麦65%,木屑15%,棉籽壳15%,麸皮5%,石膏1%,过磷酸钙0.5%,糖0.5%,尿素0.5% 2.谷粒浸泡吸水 冬季浸泡24-48小时,夏季加1%石灰(以防变酸)浸泡24小时,隔夜换水。,3. 煮沸、沥干捞出 泡好后,漂洗干净(去杂),煮至饱胀 无白心,切忌煮开花,沥干水分后捞出。 4. 拌料 用煮小麦水拌木屑、棉籽壳、麸皮,最 后再一起与麦粒拌匀。,5.装瓶 (1)装料量应为1/3或1/2罐头瓶,便于培养 时摇动基料促进丝均匀生长。 (2)擦净并封瓶口 封口塑料袋采用规格为13cm13cm0.004cm 高压聚丙稀袋,二层,里层在中央剪一3cm宽 菱形口。至少二个皮套。,6.装锅灭菌 高压灭菌于126左右维持2小时;常 压灭菌于100维持10-12小时,夏季时间 可酌情延长。 7.出锅 、冷却 冷却至30以下待接种。,二、.木屑、玉米芯料培养基制作方法 1.按配方称料。 2.拌料:干混(将石膏和不溶于水的主料和 辅料混匀);湿混(将石灰和溶于水的辅料 制成母液,加入所需水量稀释后拌料)。,装瓶:闷1-2个小时(夏季时间不宜过长) 待料充分吸足水后装瓶,装料至瓶肩,上紧下松 压平

      6、料面,擦净瓶口,打1.5cm粗接种孔至瓶底 封口。 灭菌:同谷料培养基制作 出锅、冷却:同谷粒培养基制作,三、栽培种制作 制作方法基本同于原种制作。需要注意 的是栽培种培养基制作一般选用加富的培养 料,而且含水量要较原种加大,更利于菌种 快速吃料。容器可以用500ml罐头瓶,也可 以用(17-18)X(30-35)X(0.04-0.05)cm 低压聚乙烯袋。,第三节 液体菌种制作技术 一、液体菌种制作的原理 食用菌液体菌种制作是在发酵罐中,采用液 体培养基通入无菌空气并加以搅拌,增加培 养基中溶氧含量,提供食用菌菌体呼吸代谢 所需要的氧气,并控制适宜的外界条件,获 得大量的菌丝体或代谢产物。,二、液体菌种制作的特点 1.原料来源广泛 2.菌丝体生长快速 3.生产周期短 食用菌深层发酵一般仅需2-7d就可获得大量的菌丝体, 而固体培养则需30-60d。 4.工厂化生产、无季节性 食用菌深层发酵是在发酵罐内、控制最佳条件来培养菌 体的,不受季节性限制。,三、液体菌种制作的用途 1.生产液体菌种 食用菌经深层发酵2-7d的幼嫩菌丝体,可以用来作为食用菌栽培用的原种和栽培种。,2.制备药物或提

      7、取生化制品 许多食用菌种类,其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药物成分或生化制品的材料。,3.制作食品或畜禽饲料,四、液体菌种制作的主要设备 1.摇床 往复式播床:振荡方式为来回振荡 旋转式摇床:振荡方式为旋转,四、液体菌种制作的主要设备,2.种子罐和发酵罐 许多食用菌种类,其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药物成分或生化制品的材料。,四、液体菌种制作的主要设备,3.空气净化设备 4.培养基连续灭菌设备 包括配料罐、连消塔、维持塔、喷淋冷却器等。 5供气设备 主要是蒸气锅炉及附属设备,五、液体菌种制作的主要工艺 1.种子制备 种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度的种子,斜面菌种制备 。,摇瓶种子制备 一级、二级种子制备 一级种子罐通常为50-100L,二级种子罐为500-1000L。,六、液体菌种制作的主要参数 1.菌龄 菌龄与种子的活力密切相关。通常,摇瓶种子菌龄控制在4-10d,一级种子和二级种子菌龄为48-96H。 2.接种量 一般地,食用菌深层发酵时的接种量为10-20%。 3.温度 通常在22-30生长最快,得率最高。,4.通气量 食用菌深层发酵的通气量以0.2-1.5通气体积/培养液体积/min为宜。 5.搅拌速度 食用菌深层发酵的搅拌速度一般是180-500r/min。 6.酸碱度 不同种类的食用菌都有一个最适酸碱度,例如,黑木耳的最适pH为6.0-6.5、金针菇为6.3、香菇为4.5-6.5。,7.罐压 在发酵过程中罐压通常为0.2-0.7Kg/cm。 8.泡沫控制 在发酵过程中泡沫过多不利于发酵,目前大多数是加入0.006%的泡敌做消泡剂消除泡沫。 9.发酵特点 发酵终点是否准确,应参考产物浓度、过滤浓度、氨基酸含量、残糖量、菌丝形态、pH、发酵液的外观和粘度等因素才能决定。,

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