各种缓冲液配制方法

1、各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液PH0.2mol/LNa2HPO4 (ml)0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)PH0.2mol/LNa2HPO4 (ml)0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)2.20.419.65.210.729.282.41.2418.765.411.158.852.62.1817.825.611.608.402.83.1716.835.812.097.913.04.1115.896.012.637.373.24.9415.066.213.226.783.45.7014.306.413.856.153.66.4413.566.614.555.453.87.1012.906.815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510.657.618.731.274.89.8610.147.819.150.855.010.309.708.019.450.55Na2HPO4。2H2O，分子量=178.05 0.2mol/L溶液含35.6

2、1g/L柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（0.1mol/L）PH0.1mol/L柠檬酸（ml）0.1mol/L柠檬酸钠（ml）PH0.1mol/L柠檬酸（ml）0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.64.89.210.8柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/L醋酸缓冲液（0.2mol/L，18）PH0.2mol/LNaAC(ml)0.2mol/LHAC(ml)PH0.2mol/LNaAC(ml)0.2mol/LHAC(ml)3.60.759.254.8

3、5.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.60NaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。 醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.7) 取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸6080ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。 醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.8) 取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。醋酸醋酸钠缓冲液(pH4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。 醋酸醋酸钠缓冲液(pH4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释

4、至100ml，即得。 醋酸醋酸钠缓冲液(pH6.0) 取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lgC(NaAc)/C(HAc)（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克 量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。 将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。 当然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液PH0.1mol/LNaOH(ml)0.2mol/L苯二甲酸氢钾（ml）加水至(ml)

5、4.00.4025.00100.004.23.6525.00100.004.47.3525.00100.004.612.0025.00100.004.817.5025.00100.005.023.6525.00100.005.229.7525.00100.005.435.2525.00100.005.639.7025.00100.005.843.1025.00100.006.045.4025.00100.006.247.0025.00100.000.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml。磷酸缓冲液（0.2mol/L）PH0.2mol/LNa2HPO4 (ml)0.2mol/LNaH2PO4 (ml)PH0.2mol/LNa2HPO4 (ml)0.2mol/LNaH2PO4 (ml)588.092.07.061.039.06.012.387.77.272.028.06.218.581.57.481.019.06.426.573.57.687.013.06.637.562.57.891.58.56.849.051

6、.08.094.75.3Na2HPO4 .2 H2O ,分子量=178.05， 0.2mol/L溶液含35.61g/LNaH2PO4 . 2 H2O ,分子量=156.03， 0.2mol/L溶液含31.21g/LNaH2PO4 . H2O,分子量=138.03， 0.2mol/L溶液含27.6g/LNa2HPO4 .12 H2O,分子量=358.22， 0.2mol/L溶液含71.64g/L磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法0.01M PBS PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)PBS缓冲液（pH7.27.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4冰箱中即可。需要注意的是，通常所说

7、的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。母液的配制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如：0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCl的话，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方 ：pH 0.2M NaH2PO4（ml） 0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.5 6.55.8 92 8 5.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51

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