临床微生物检验项目SOP_检验科SOP_15

1、月亮县中医院项 目文件编号：YCXZYYJYK_SOP_15页码：第- 57 -页，共57页检验科临床微生物项目SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：20180101临床微生物项目SOP手册目录编 号名 称页 面SOP_15-1冰箱维护和保养标准操作程序3-3SOP_15-2电热恒温培养箱维护和保养标准操作程4-4SOP_15-3手提式压力蒸汽灭菌器使用维护标准操作程序5-6SOP_15-4生物安全柜使用维护和保养标准操作程序7-9SOP_15-5病原微生物标本的采集运送标准操作程序10-15SOP_15-6脓汁及创伤感染分泌物培养标准操作程序16-16SOP_15-7尿培养标准操作程序17-20SOP_15-8血培养标准操作程序21-22SOP_15-9痰培养标准操作程序23-24SOP_15-10粪便培养标准操作程序25-27SOP_15-11无菌体液培养标准操作程序28-29SOP_15-12生殖系统标本培养标准操作程序30-30SOP_15-13支原体与支原体药敏培养鉴定标准操作程序31-32SOP_15-14手工法细菌鉴定简易操作程序33-33SOP_15-15革兰氏涂

2、片染色检测标准操作程序34-35SOP_15-16结核杆菌涂片检查标准操作程序36-39SOP_15-17墨汁荚膜染色标准操作程序40-40SOP_15-18触酶试验标准操作程序41-41SOP_15-19氧化酶试验标准操作程序42-42SOP_15-20血浆凝固酶标准操作程序43-43SOP_15-21CAMP试验标准操作程序44-44SOP_15-22卫星试验标准操作程序45-45SOP_15-23芽管形成试验标准操作程序46-46SOP_15-24柯马嘉念珠菌显色培养鉴定标准操作程序47-47SOP_15-25纸片扩散法抗生素敏感试验标准操作程序48-50SOP_15-26耐甲氧西林葡萄球菌检测标准操作程序51-51SOP_15-27D试验检测标准操作程序52-52SOP_15-28肠球菌耐药性的检测标准操作程序53-53SOP_15-29产超广谱-内酰胺酶检测标准操作程序54-54SOP_15-30临床微生物检验质量保证标准操作程序55-57文件审批者：发布日期：操作者从事本项工作前，必须认真学习并掌握本手册的内容，严格按照操作规程操作！学习者:休订书册与增补程序内容与日期：学

3、习者：休订书册与增补程序内容与日期：学习者：SOP_15-1 冰箱维护和保养标准操作程序【目的】对冰箱进行适当的维护，以确保冰箱的正常使用。【适用范围】本实验室使用的各种品牌、型号的冰箱。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【操作】1. 冰箱应放置于水平地面并留有一定的散热空间。2. 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。3. 冰箱内禁止存放与本实验室无关的物品。4. 放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。5. 保持冰箱出水口通畅；非自动除霜冰箱应定期除霜；定期清洁冰箱，清洁时切断电源，用软布蘸水擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂。6. 每日由专人负责观察冰箱内温度并记录于表中，记录表贴于门上，每月一张，一年装订成册存档。7. 若温度超出规定范围，调节温控使其回到正常范围，并进行记录。 8. 若温控调节无效，报请设备科维修，修理后须验收合格并签字后方能正常使用。【相关记录】冰箱温度登记表SOP_15-2 电热恒温培养箱维护和保养标准操作程【目的】电热恒温培养箱工作温度恒定。【适用范围】

4、本实验室内的所有电热恒温培养箱【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【操作】1、培养箱应置于坚固的水平面上，电源电压须匹配。2、打开电源开关，把温度控制器的温度调节旋钮至设定温度。3、搁置工作物后关上箱盖，直到需取用时拿出； 【注意事项】1、 为确保培养目的实现，外插温度计应为合格品，并随时观察温度是否正确；2、 为确保仪器内钢制金属内壳与搁板不受腐蚀，酸碱试剂不得置于箱内；3、 箱壳必须有效接地,若有电感，应立即切断电源,检查排除故障；【仪器维护】1、日常维护每日两次记录温度情况；2、定期定期每年由市质量监督所检测温度；【相关记录】恒温培养箱温度登记表。SOP_15-3 手提式压力蒸汽灭菌器使用维护标准操作程序【目的】保证高压灭菌器的正常工作【适用范围】本细菌室内YXQ.SG41.280型台式灭菌器【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【操作步骤】1堆放： 将待灭菌的物品予以包扎好，然后顺序地放在灭菌桶内的筛板上，包与包之

5、间应留有适当的空隙，以利于灭菌桶内的冷空气溢出和蒸汽的穿透，提高灭菌效果。2加水： 在灭菌器主体内加4升清洁水，水在灭菌过程中会逐渐蒸发，水面会相应降低。因此，每次灭菌使用前，应向灭菌器主体内补足水量，以免电热管脱水干烧，损坏电热管。3.密封： 将灭菌桶放入灭菌器主体内，把器盖上的软管插入灭菌桶内壁上的半圆槽内，合上器盖。并将器盖上的螺栓槽与主体的螺栓槽对齐，然后顺序地将相对方位的翼形螺母嵌入槽内予以均匀四旋紧，使器盖与主体密合。4.加热： 将灭菌器电源插头插入10A/220V外电源插座。转动电源开关至“开”的位置，电源指示灯亮，电热管开始加热。然后再将放气阀扳手拨至“放汽”位置（图二），待有较急的蒸汽喷出时，即将放器伐扳手拨至“关闭”位置。此时压力表指针朝顺时针方向缓慢转动，显示灭菌器内压力正在逐渐上升，同时温度随之升高。5.灭菌： 当灭菌器内压力达到所需范围时，用户可自行开始计算灭菌时间，按不同物品和包装来确定灭菌所需时间。在灭菌过程中，用户可通过灭菌器上电源开关“开”或“关”来适当调整热源，或接上一只调压变压器，适当调低电压，使灭菌器内压力处于稳压状态。但是，维持灭菌器内部恒压的

6、压力不能低于用户选定值。如果用户不采用上述控制热源的方法，那么在灭菌过程中安全阀会间断的向外释放超压蒸汽，此时灭菌器内部的整定压力为0.165MPa。各类常用灭菌温度最少保温时间（单位：分钟）110115121126134硬物（裸露）大于60大于4515104硬物（包裹）20154织物包30204乳胶制品20154药液按药液的药理要求先选择合适的灭菌温度，再选择保温时间本表灭菌时间仅供参考，用户应按照中华人民共和国卫生部出版的消毒技术规范要求做好灭菌效果检测后再决定最佳灭菌 保温时间。6.干燥： 对于医疗器械、敷料和器皿等在灭菌结束后需迅速干燥的物品，可在灭菌结束时，将灭菌器内蒸汽通过放气阀迅速排出，待压力表指针恢复至“0”刻度，再稍等12分钟后将器皿盖打开。打开器皿盖后，再继续加热1015分钟，使物品上残留水蒸汽蒸发掉。随后将电源开关转至“关”位置，停止加热。7.冷却： 对培养基等液体之类的灭菌物品在灭菌结束后，切勿将灭菌器内蒸汽通过放气阀快速排出，以免液体剧烈沸腾而造成溢出或瓶子破裂等危险事故。因此该类灭菌物品在灭菌结束后，应先将电源开关转动至“关”的位置，停止加热，待其冷却，直到

7、压力表指针回复至“0”刻度，稍等数分钟后再将放气阀扳手拨至“放汽”位置。然后才能打开器盖。【注意事项与仪器维护】1、每次使用前，应检查主体内要有4升足够的水量，使水位超过电热管。2、在开始加热时，应将放气阀扳手拨至“放汽”位置。使灭菌桶内冷空气随加热逸出。否则，蒸汽的穿透会受到空气的阻碍而得不到预期的灭菌效果。放汽阀经过排汽后，放下扳手，如出现有大量汽体漏出时，只需将扳手上下反复拉几下即可。3、灭菌液体时，应将液体灌装在硬物的耐热玻璃瓶内，液体容积应不超过3/4的玻璃瓶体积。瓶口用棉花纱布塞好，并用纱绳缠扎在瓶颈。切勿使用未打孔的橡胶塞和软木塞，以防玻璃瓶破裂。玻璃瓶最好把放在容积比其稍大的搪瓷或金属盘内，万一玻璃瓶破裂，液体不致于流失和损及灭菌器内壁。特别应注意灭菌结束时，切勿立即释放蒸汽。应按四、使用方法第七条步骤操作，以免发生事故。4、对不同类型，不同灭菌要求的物品，如敷料和液体等，切勿放在一起灭菌，以免顾此失彼，造成损失。5、灭菌结束时，若压力表指针已回复零位，而打不开器盖。此时应将放气阀扳手拨至“放汽”位置。使外界空气进入灭菌内，即可打开器盖。6、压力表使用日久后，若压力表指

8、针不能回复零位，应及时检修。平时应定期用标准压力表来校验，若不正常，应换新表。7、灭菌器内最好加离子水或蒸馏水，这样可以减少水中化学溶解物在灭菌加热时析出，沉积在灭菌器底部和电热管表面。影响电热管正常工作。8、橡胶密封圈使用日久后会老化，应定期更换。9、灭菌器不使用时，应保持灭菌器清洁和干燥.这样可延长使用寿命。10、灭菌结束后，要打开器皿盖时。压力表指针必须在零位，而且放汽阀扳手应拨至“放汽”位置。SOP_15-4 生物安全柜使用维护和保养标准操作程序【目的】保证生物安全柜的正常工作【适用范围】适用于微生物操作和实验分析。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【性能指标】参数数值人员安全性5个产品安全性5个交叉感染2个平均送风风速0.3-0.5mS吸入口风速0.6 mS无故障工作时间8000小时终端风机风量()1500m3电源AC220V 50HZ洁净度等级100级振动幅值XYZ三个方向4m噪声65dB（A）照明680Lx紫外线30uW/cm2电源消耗功率850V【操作步骤】1打开电源锁，使设备通电，设备在通电后自我检测，检测设备性能的完好性和安全性，进入待机状态。2使用前紫外灯照射30min以上。3开始使用时,把紫外灯关掉；打开照明灯和排风机。4用75%的乙醇或适当的消毒剂消毒设备的内部表面。5将物品按程序放入生物安全柜内;不要阻塞进气孔。等候 2-3 分钟对工作区域清洁。6在工作区域之内，物品之间保持适当的间距。7工作应该从干净的到污染的地方进行。8工作完毕后,让柜内的物品在移出之后运行 2-3 分钟。9用75%乙醇或适当的消毒剂擦拭所有的工作表面。10关闭照明灯和排风机，紫外灯消毒30min，关闭设备。【 注

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