中枢组胺及其受体对帕金森病大鼠旋转行为的作用
45页1、浙江大学硕士学位论文中枢组胺及其受体对帕金森病大鼠旋转行为的作用姓名:胡丹娜申请学位级别:硕士专业:神经生物学指导教师:陈忠;罗建红20060501浙嚣大学硕士学位论文中枢组胺及其受体对帕金森病大鼠旋转行为的作用浙江天学医学院硕士研究生导师神缝生物学壤秀娜 陈忠磺般罗建红教授中文摘要撼愈森疯( P 矗桶矬s 。矬毽越黼s e ,姻) 蹙秘慢性棒疑系统遐簿救痰瘸,其燕要的瘸理特征是黑震纹状体多巴胺( 曲蜮酶矜A ) 狰经通路激谶性、选择性交性缺失。目前的研究尚不能完全揭示p D 的病因和确切的发病机制。脑内多种神经遴质及其受体系统的失衡和紊乱是多巴胺能神经元损伤逐渐加重的重要鳆殿,其中麟内组胺 乍舞一斡神经递震在P D 中豹体熙日益受黧 关注。部分稔床和尸检研究发现P D 病人脑内组胺水平明显高予芷常对照,提示缎胺可能参与了p D 的病理过襁。同时,还有研究发现缎胺H 3 受体介入了熬底桉神缀回路的调节,但是否H l 和H 2 受体也参与了基底核神经画貉的调节至今仍未见报道。本实验采用每强鏊多巴( 岳h y d r o x y d o p a m h ,6 0 m A ) 偏侧毁损的P
2、D 大翳陵型,通过行为学实骏系统她研究了组胺及冀H t 、H 2 、娲爨体擞P D 太鼠旋转行为中的作用。此外,本实骏还观察了P D 犬鼠下丘脑结节乳头挟( t l I I ,c r o m a 明瑚i 1 1 a r ym I c l 毗孙芷N ) 内组胺能神经元的囊化。以上研究在为迸一步理解P D 发病机制、探索新黥治疗途径稳供愚踌和线索。露的:探讨内源性缀胺及箕蹙体在P D 大鬣旋转行为中的作用,以及明确p D时组胺耱神经元是否有病理改炎。方法:本实验选取黑质致密部( 蜘l b s 怕n 血n i g m 删p a n ,s N c ) 和翦脑内德束( 牲l e d i a l 钠舳抽n d l e ,M F B ) 两点注射激汪大学疆士学位论文昏蠛固A 毁攒右测爨震一纹状体涎路,剑答荤I l 侧姻大鼠模毽。术压繁7 秘1 4 幽 零缀胺摆关瑟兹,3 嵇袋酾矗妇落颧鹜部蔽下注辩瓣羚毽跨( a 泌。枷,8 ,0 5 燃鲫崤) 诱导大鼠发生旋转行为,记录3 0m i n 内的平均旋转次数。此外,选取部分动物嫩赐受痰缀织纯学法检测S N c 内D A 麓 孛经元葶爨强烈内缀胺戆神经元的
3、免疫反成活性。络果:6 m m A 毁损詹第7 和1 4d ,与模型组相比,组胺前体物质缎氮酸( h i s t i d i l 璇5 0 妒唱,黢腔淀射) 可增辆大鼠每分钟麓转次数 H 3 受体激动剂i I I 】蝴,荷兰T i m m e f n l a I l 教授提供。浓度1 0 雌,5p l ,铡麟室绘蕊。( 1 2 ) 酪氮酸羟化酶( 啪s i n eh y 出o x y l a s e ,骶1 ) 鼠抗单兜隆抗体,购乎s i 翔噙公司。 ( 1 3 ) 组氨酸脱羧酶妣d e c a 】瞳粉刚勰e ,姐) C ) 兔抗多克隧抗体,暇本 东寒大学嘲教授惠赠。( 1 4 ) 砧e x a 4 8 8 共轭的羊抗疑或攀抗热二抗,赙予M 0 l 。硼皴P b e 公司。3 器材( 1 )脑巍体定位仪,N a r i 蝴g e ,S m 5 ,1 钛y o ,J a p 锄( 2 )徽黧牙科锫,s 躺斟,s 白啪9 9 0 ,l :o r 龅( 3 )l Om 微量进榉器,上海医用激光仪器厂( 辞旋转行为检测役,Q 懈鹫动物旋转行为自动测定系统,青鹞大学提供( 5 )摇床,z D 一
4、9 5 5 6 ,太仓县科教设餐厂( 6 )午分之一克必平,A R 3 1 3 0 ,C 岫I I sC o I p ,U s A( 7 )磁力加热搅捧器,7 8 一l A ,杭州仪器厂( 8 ) Y W 一9 0 旋满混合器,上海医科大学仪器厂( 9 )恒冷冰冻切片机,L E I C A ,c M l 9 0 0 ,酝釉撇( 1 0 ) 荧光显镦镜,O L 帕艘U s ,B X 5 l ,J 睁嫩毒脚魂携楼粪夔懿餐 l 溉永合糕醛( 3 酾蛾) 经羧腔注射麻醉大鼠,君瀚是于赫立体定位佼土,按P 越缸辩s 与w 嬲徽膝黧谱确定蠢铡游藏肉偻j 柬( 氆础越f o 】潜酾妇b u n d i 鼠谶7 8 ) 窝黑疆致密帮( 幽嗽瞰i a 斑g r ap a 嘏e o n l p a 魄s k ) 坐标。瓣B 坐标:前随藩O + 2 礅m ,牵线旁群2 0 艘,硬骥下8 Om m :S K c 嫩标:前翻后4 8 前衄,中9巍巍太学矮掌健逢交线旁开1 6 娃胍,硬膜下8 2 溅。以牙科钻钻开定位处颅骨,用微量注射器缓慢注入溶于V e 赫山液( O 。2 抗坏瓶酸,O 9 艇理盐水) 的6 O
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