同型半胱氨酸及叶酸对内皮细胞微囊蛋白1及其基因表达的影响
35页1、同型半肤氨酸及叶酸对内皮细胞微囊蛋白 一 1 表达的影响中文摘要目的 微囊蛋白(c aveo li 介 1) 是细胞质膜微囊的主要结构蛋白, 研究显示: av eo h n 一 1可与多种信号分子相互作用, 在细胞信号转导和多 种疾病的发生中有重 要意义。 本研究观察同型半肤氨酸( h c y ) 及叶酸对人脐静脉内 皮细胞( H U V E C )。 aveolin- 1 表 达的 调节 作用。方法 使用培养的2 一 3 代 HUV EC 细胞, 将体外培养的H U V EC 分为 10个实验组: 0 、1 0 、5 0 、2 0 0 、5 0 0 u m o l / L 浓度 H c y组及叶酸( 1 5 u m o l / L ) 和上述各H c y 共同 培养组, 培养2 4h后, 采用W es te l们 b l ot和R T 一 P CR测定c av col i n 一 1 蛋白 和m R N A表达的变化.结果 与对照组( o u 。 。 1 / L H c y ) 相比,生理浓度组( l o u m o l / L H c y )c avco l i n- l含量及m
2、R N A表达明显增高( P 1 0 0 um o 厂 L 。( 二) H cy对 血管内 皮 损伤作 用内皮细胞具有众多的生理功能: 选择性通透功能、屏障功能、血管紧张的调节、 抗血栓、细胞粘附 和聚集等。 H cy对内 皮细胞的损伤作用主要表现在以 下) 七 个方面。1、对内皮细胞屏障和再生功能的损害B eTIn an等 Ie 研究表明 ,H cy和 硫酸铜与内 皮 细胞 孵育 后, 可 使穿 过内 皮细胞单层的白 蛋白 ( 用台 盼蓝标记 ) 显著增多。内皮细胞选择性通透功能发生障碍, 可引 起脂蛋白 和胆固 醇 在血管 壁沉积,促进动脉粥 样硬化的 形成。 Lee 等71 研究发现H cy可通过梭基甲 基化, 膜活性和P Zlra s 活性降 低, 从而在G 卜 5 或其前抑制血管内 皮细胞的细胞周 期, 内 皮再生能力降低, 内 皮屏障能 力降低。 再生能力低下,内 皮层的选择性通透功能障碍,脂蛋白 和胆固醇易于在血管壁沉积, 促进 A S形成。2、 对内 皮 依赖 舒张功能 谬D v R ) 的 损害血管内 皮分泌的多种血管活性物质对于维持正常的血管紧张度至关重要,其中 包
3、 括 一 氧 化 氮 困 0)、 内 皮 素 一 1 脚一 1) 、 前 列 环 素 (P GI Z ) 等。 Ta w a k o llsl等 在26例非动脉粥 化硬化患者中 , 用高分辨率的血管超声发现, 高H cy血症与内 皮依赖性血管舒张功能损害相关, 当用叶 酸或维生素B 6 使其水平降至正常时, 内 皮舒哈尔滨医科大学硕士学位论文张 功 能 得以 改 善 。 u p ch urch 等 9l 的 研 究 认为 ,H cy可 通 过自 身 氧 化 产 生 一 系 列 活性氧中间产物如过氧化氢、 超氧阴离子及轻自由 基, 导致膜脂质过氧化, 内皮依赖性N o生 成减少, 同 时H cy还可引 起谷肌甘肚过氧 化物酶 等抗氧化酶活 性降 低,活性氧清除障碍,N0更易被氧化失活,内 皮依赖性N o生成减少而灭活增加, 必然导 致N O依赖性血管舒 张功能 下降。 G e ttes at er等l 0 研究发 现糖耐量 异常患 者血浆H cy与E T 一 1 水平呈正相关, 推测其原因可能为H cy促进了内皮细胞释放E T , 同时因H cy致N o生成减少,对内 皮细胞合成E T
4、的抑制作用减弱也可能起一定作用。 N O生 成减少,E T 增加,E T /N0比 值增大, 加重内 皮功能紊乱, 促进A s 的发 展 。 P an g an amal a 等 1 的 研 究 表 明 H cy使 体 外 培 养 的 人 血 管 内 皮 细 胞 产 生 P GI Z减少。 N O 、P G IZ不仅是血管舒张因子, 还可抑制血管平滑肌细胞增生, 也具有抗凝功能, 抑制血小板聚集和活化,H cy抑制N o 、 P GI: 活性而促进动脉粥 样硬化。3、对内皮粘附功能的影响动脉粥样硬化形成的早期, 单核细胞与内皮细胞的粘附性增强, 促进单核细胞 在内 皮下积聚。 J ac obs en等 l2 1 报 道Hcy使体外培养的内 皮细胞 释放白 介素一 8(IL 一 8) 和单核细胞趋化蛋白 一 l( M C P 一 1) 增多。 除了 单 核细胞 , 中 性 粒细胞 在动脉硬 化发生 发 展中 也 起一定的 作用 ,D udm an等l 3 发 现在 体外, 生理 浓度的H cy使中性粒细胞对内 皮细胞的粘附 率增加, 而内 皮细胞表达 ICA N I 一 1 、 E 一
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