大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)酶联免疫分析
5页1、1大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)酶联免疫分析酶联免疫分析试剂盒使用说明书试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用本试剂盒仅供研究使用产品编号:产品编号:CSB-E07368r检测范围:检测范围:31.2 pg/ml - 2000 pg/ml最低检测限:最低检测限:8 pg/ml特异性:特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠 uPA,且与其他相关蛋白无交叉反应。有效期:有效期:6 个月预期应用:预期应用:ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中uPA 含量。说明说明 1.试剂盒保存:-20(较长时间不用时) ;2-8(频繁使用时) 。2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。实验原理实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗 uPA 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 uPA 抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化
2、物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 uPA 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,计算样品浓度。 2试剂盒组成及试剂配制试剂盒组成及试剂配制 1.酶联板酶联板(Assay plate ): 一块(96 孔)。 2.标准品标准品(Standard): 2 瓶(冻干品)。3.样品稀释液样品稀释液(Sample Diluent): 120ml/瓶。4.生物素标记抗体稀释液(生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent): 110ml/瓶。5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent) 110ml/瓶。6.生物素标记抗体(生物素标记抗体(Biotin-antibody): 1120l/瓶(1:100) 。7.辣根过氧化物酶标记亲和素(辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin): 1120l/瓶(1:100) 。8.底物溶液(底物溶液(TMB Substrate): 110ml/瓶。 9.浓洗涤液(浓洗涤液(Wash Buffer): 1
3、20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释 25倍。 10. 终止液(终止液(Stop Solution): 110ml/瓶(2N H2SO4) 。需要而未提供的试剂和器材需要而未提供的试剂和器材1.标准规格酶标仪2.高速离心机3.电热恒温培养箱4.干净的试管和 Eppendof 管5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器36.蒸馏水,容量瓶等标本的采集及保存标本的采集及保存 1.血清:全血标本请于室温放置 2 小时或 4过夜后于 1000g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20或-80保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用 EDTA 或肝素作为抗凝剂,标本采集后 30 分钟内于 2 - 8C 1000 g 离心 15 分钟,或将标本放于-20或-80保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则:标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过
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