电子文档交易市场
安卓APP | ios版本
电子文档交易市场
安卓APP | ios版本

分子标记的类型课件

26页
  • 卖家[上传人]:我***
  • 文档编号:145338302
  • 上传时间:2020-09-19
  • 文档格式:PPT
  • 文档大小:536.50KB
  • / 26 举报 版权申诉 马上下载
  • 文本预览
  • 下载提示
  • 常见问题
    • 1、Molecular Markers,分子标记的各种类型,分子标记是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记,是DNA水平遗传多态性的直接的反映。与其他几种遗传标记形态学标记、生物化学标记、细胞学标记相比,DNA分子标记具有的优越性有:大多数分子标记为共显性,对隐性的性状的选择十分便利;基因组变异极其丰富,分子标记的数量几乎是无限的;在生物发育的不同阶段,不同组织的DNA都可用于标记分析;分子标记揭示来自DNA的变异;表现为中性,不影响目标性状的表达,与不良性状无连锁;检测手段简单、迅速。随着分子生物学技术的发展,现在DNA分子标记技术已有数十种,广泛应用于遗传育种、基因组作图、基因定位、物种亲缘关系鉴别、基因库构建、基因克隆等方面。,Company Logo,Company Logo,Molecular Markers,Company Logo,限制性片段长度多态性(),RFLP标记是发展最早的DNA标记技术。RFLP是指基因型之间限制性片段长度的差异,这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、失重排或点突变所引起的。 RFLP技术主要包括以下基本步骤: DNA提取用限制性

      2、内切酶酶切DNA用凝胶电泳分开DNA片段把DNA片段转移到滤膜上利用放射性标记的探针杂交显示特定的DNA片段(Southern杂交)和结果分析。 RFLP遍布整个基因组,并且非常稳定,但RFLP实验操作繁琐,检测周期长,成本高昂,不适于大规模的分子育种,在植物分子标记辅助育种中需要将RFLP转换成以PCR为基础的标记。 RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphisma)限制性内切酶片段长度多态性)作为第一代分子生物学标记自问世以来已广泛运用于多门生物学科研究中,但它运用于植物抗性研究还只是近几年的事。RFLP能对植物的抗性基因进行定位和分离,利用RFLP技术,对于核基因组或叶绿体基因组、尤其是后者,若能提取纯净DNA,则可直接从酶切后的电泳图谱看出其多态性,利用这一方法可以测定种群内、种群间不同水平的物种在污染环境下抗性分化进化水平上的差异。 与核酸序列分析相比,RFLP可省去序列分析中许多非常繁琐工序,但相对RAPD 而言,RFLP方法更费时、费力,需要进行DNA多种酶切、转膜以及探针的制备等多个步骤,仅对基因组单拷贝序列进行鉴定。但RFL

      3、P又有比RAPD优越之处, 它可以用来测定多态性是由父本还是母本产生的,也可用来测定由多态性产生的突变类型究竟是由碱基突变或倒位、 还是由缺失、插入造成的。,限制性片段长度多态性(),基本原理: 特定生物类型的基因组DNA经限制性内切酶(restriction enzymes,RE)酶切消化后,会产生数万条DNA片段,通过琼脂糖电泳将这些片段按大小顺序分离开,转移到尼龙膜或硝酸纤维素膜上;用放射性同位素或非放射性物质标记的DNA作为探针,与膜上的DNA进行杂交,若某一位置上的DNA片段与探针的序列相似,则探针就结合到这个位置上,通过放射性自显影或酶学检测,可以显示出不同材料含有与探针序列同源的酶切片段在长度上的差异,即多态性。,限制性片段长度多态性(),特点: 具有共显性的特点; RFLP标记具有种族特异性,对于分析一个分离群体的不同来源的染色体片段具有重要价值; RFLP标记遍及整个基因组; 不足:主要表现在所需DNA量大,步骤复杂,需要的仪器、设备较多,周期长,成本高,检测中利用放射性的同位素,易造成环境污染;,Company Logo,随机圹增多态性(),RAPD 技术是建立在P

      4、CR (Polymerase Chain Reaction)基础之上的一种可对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术。其以基因组DNA为模板, 以单个人工合成的随机多态核苷酸序列( 通常为10 个碱基对) 为引物, 在热稳定的DNA 聚合酶( Taq 酶) 作用下, 进行PCR 扩增1。扩增产物经琼脂糖或聚丙烯酰胺电泳分离、溴化乙锭染色后,在紫外透视仪上检测多态性。扩增产物的多态性反映了基因组的多态性。RAPD 技术现已广泛的应用于生物的品种鉴定、系谱分析及进化关系 RAPD标记原理: RAPD标记的原理与PCR技术原理相同。在模板DNA、引物和4种碱基存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的体外酶促反应,以合成特异DNA片段的一种方法。PCR反应分变性(denaturation)、复性(annealling)、延伸(extension)三步。 PCR原理: 双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和

      5、复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。,Company Logo,随机圹增多态性(),检测未知序列的基因组DNA RAPD标记为显性标记,极少数为共显性标记 引物无种族特异性 RAPD技术简单 RAPD标记的最大缺点是再现性差,特点,SSLP(simple sequence length polymorphism) 即简单序列长度多态性,是由于简单序列的重复次数不同,导致扩增片段长度的不同而产生的多态性。,简单重复序列(),SSR标记的特点,数量几乎无限,检测出多态性的频率极高; SSR技术检测到的是一个单一的多等位基因位点; SSR标记为共显性标记,可鉴别出纯合和杂合基因型; 结果重复性高,稳定可靠; 兼具PCR反应的优点,所需DNA量少,对DNA质量要求不高;,扩增片段长度多态性(),AFLP(Amplified Fragments Length Polymorphism)即扩增片段长度多态性,是由Zabeau 和Vos(1993)发明的一种利用PCR技术检测DNA多态性的方法。AFLP 结合了RFLP的稳定性和PCR技术高效性的特点。AFLP的多

      6、态性极高,一次可以检测到100150个扩增产物,因而非常适合绘制品种指纹图谱及进行分类研究。 AFLP标记的原理 : 植物基因组DNA经限制性内切酶双酶切,其中包括一个酶切位点稀有的内切酶(识别位点一般为6个碱基或8个碱基)和一个酶切位点丰富的内切酶(识别位点一般为4个碱基)的酶切组合,形成分子量大小不等的随机限制性片段。酶切片段先与有共同粘性末端的人工接头(artificial adapter)连接,连接后的粘性末端顺序和接头顺序作为PCR反应的引物结合位点,通过PCR反应把酶切片段扩增,然后将扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,其多态性即以扩增片段的长度不同而被检测出来。,Company Logo,AFLP标记的特点,AFLP标记的限制性内切酶与选择性碱基组合的数目和种类很多,AFLP标记产生的标记数目是无限的; AFLP标记多态性远远超过其它分子标记,一次PCR反应可以同时检测多个遗传位点; AFLP标记多数为显性标记,表现孟德尔遗传; AFLP标记具有模板用量少的特点,并且对模板浓度变化不明显; AFLP标记用特定引物扩增,退火温度高,假阳性低; AFLP技术受专利

      7、保护。,Company Logo,其他种类的分子标记,SCAR,CAPS,STS,ESTS,特点,SNP,Molecular Markers,重要农艺性状基因定位的原理和方法,班级:作物生物技术07 姓名:陈文堂 学好:0701103046,Company Logo,基因定位: 将具有某一表现型性状的基因或与基因有关的标记定位在遗传连锁图或相应的染色体上,称作基因定位(或遗传作图)。,例:玉米C型胞质雄性不育恢复基因的定位,(1)初部定位:构造F2和BC1分离群体如下:,可得: 玉米C型胞质雄性不育的恢复存在两对重叠恢复主基因,并且是位于两条染色体上。,初步定位BSA 分群法,在作图群体中,依据目标性状表型的相对差异(如抗病与感病),将个体或株系分成两组,然后分别将两组中的个体或株系的DNA混合,形成相对的DNA池。根据亲本与DNA池扩增带型之间的差异,筛选与目标基因紧密连锁的分子标记。 可以推测,这两个DNA池之间除了在目标基因座所在的染色体区域的DNA组成上存在差异之外,来自基因组其它部分的DNA组成是完全相同的,都是该作图群体基因库的一个随机样本。,假如电泳结果如下:,选出与目标

      8、性状可能连锁的标记如2、3、4将筛选得到标记去跑所有的BC1、F2群体。可得结果如下:,根据上面的结果将F2当成一个标记,通过软件计算任意两个标记间的交换值,从而确定目标基因所在的染色体。假如在5、9号染色体上:,初步定位,将两个基因分开研究其效应,在F3中保存具有Rf4_rf5rf5 和rf4fr4Rf5_的植株,利用进等基因系的方法,进行自交、杂交如下:,精细定位,利用目标基因区域的已有序列开发 如果在5、9号染色体上存在已知序列,可根据已知序列来设计引物进行标记,就可获得目标基因。,分子标记技术的发展为作物育种工作注入了新的活力,Company Logo,基因聚合,MAS,Company Logo,Dream,2,Company Logo,随着分子标记手段的不断更新和基因组图谱的日趋饱和,其应用也随之向深度和广度推进,分子生物学又出现了“功能基因组学”(Function genomics)和后基因组学(Post genomics),主要是研究基因结构、表达和调控。随之而产生的DNA芯片技术(DNA chip)和信使RNA差异显示技术(Messenger RNA differentialdisplay,mRNA DD)为基因的定位、表达研究提供了崭新工具。,Thank You !,

      《分子标记的类型课件》由会员我***分享,可在线阅读,更多相关《分子标记的类型课件》请在金锄头文库上搜索。

      点击阅读更多内容
    TA的资源
  • 2020届中考英语备考复习-作文课件

    2020届中考英语备考复习-作文课件

  • 2019年中考英语复习-专题十五-交际运用(试卷部分)课件

    2019年中考英语复习-专题十五-交际运用(试卷部分)课件

  • 2019届二轮复习-高中英语-情态动词和虚拟语气课件

    2019届二轮复习-高中英语-情态动词和虚拟语气课件

  • 2019届一轮复习苏教版物质的跨膜运输课件

    2019届一轮复习苏教版物质的跨膜运输课件

  • 2019年北师大版英语单元复习课件::Unit17Laughter课件北师大版选修6

    2019年北师大版英语单元复习课件::Unit17Laughter课件北师大版选修6

  • 2021届新中考物理冲刺备考复习-力-弹力-重力课件

    2021届新中考物理冲刺备考复习-力-弹力-重力课件

  • 2019届一轮复习人教版种群的特征和数量变化课件

    2019届一轮复习人教版种群的特征和数量变化课件

  • 2020年高考地理一轮复习--等高线地形图-课件

    2020年高考地理一轮复习--等高线地形图-课件

  • 2019版高考英语一轮复习-Unit-1-Living-well课件

    2019版高考英语一轮复习-Unit-1-Living-well课件

  • 2019届一轮复习人教版孟德尔的遗传定律——基因分离定律课件

    2019届一轮复习人教版孟德尔的遗传定律——基因分离定律课件

  • 2019届高三第二轮复习专题二万有引力定律及其应用课件

    2019届高三第二轮复习专题二万有引力定律及其应用课件

  • 2020最新部编版语文五年级上册23-鸟的天堂课件含课后练习

    2020最新部编版语文五年级上册23-鸟的天堂课件含课后练习

  • 2020版高考(浙江)一轮复习:第7讲-细胞呼吸课件

    2020版高考(浙江)一轮复习:第7讲-细胞呼吸课件

  • 2020年新教材高中英语UNIT4HISTORYANDTRADITIONSSectionⅢDiscoveringUsefulStructures课件必修第二册

    2020年新教材高中英语UNIT4HISTORYANDTRADITIONSSectionⅢDiscoveringUsefulStructures课件必修第二册

  • 2019届高考历史二轮复习阶段三专题十三罗斯福新政与当代资本主义的新变化课件2

    2019届高考历史二轮复习阶段三专题十三罗斯福新政与当代资本主义的新变化课件2

  • 2019版高考生物二轮复习-专题三-细胞的生命历程-考点9-细胞分裂过程图像和坐标曲线的识别课件

    2019版高考生物二轮复习-专题三-细胞的生命历程-考点9-细胞分裂过程图像和坐标曲线的识别课件

  • (通史版)2021版高考历史一轮复习第4部分高考讲座(三)2高考非选择题(12分开放探究题)规范答题讲练课件

    (通史版)2021版高考历史一轮复习第4部分高考讲座(三)2高考非选择题(12分开放探究题)规范答题讲练课件

  • 2019届高三地理复习第五讲--《区际联系与区域协调发展》课件

    2019届高三地理复习第五讲--《区际联系与区域协调发展》课件

  • 2021人教部编版历史九年级上册习题课件:第18课美国的独立

    2021人教部编版历史九年级上册习题课件:第18课美国的独立

  • 2020学年新教材高中英语Unit1FoodforthoughtPeriodTwoStartingout课件

    2020学年新教材高中英语Unit1FoodforthoughtPeriodTwoStartingout课件

  • 点击查看更多
    最新标签
    发车时刻表 长途客运 入党志愿书填写模板精品 庆祝建党101周年多体裁诗歌朗诵素材汇编10篇唯一微庆祝 智能家居系统本科论文 心得感悟 雁楠中学 20230513224122 2022 公安主题党日 部编版四年级第三单元综合性学习课件 机关事务中心2022年全面依法治区工作总结及来年工作安排 入党积极分子自我推荐 世界水日ppt 关于构建更高水平的全民健身公共服务体系的意见 空气单元分析 哈里德课件 2022年乡村振兴驻村工作计划 空气教材分析 五年级下册科学教材分析 退役军人事务局季度工作总结 集装箱房合同 2021年财务报表 2022年继续教育公需课 2022年公需课 2022年日历每月一张 名词性从句在写作中的应用 局域网技术与局域网组建 施工网格 薪资体系 运维实施方案 硫酸安全技术 柔韧训练 既有居住建筑节能改造技术规程 建筑工地疫情防控 大型工程技术风险 磷酸二氢钾 2022年小学三年级语文下册教学总结例文 少儿美术-小花 2022年环保倡议书模板六篇 2022年监理辞职报告精选 2022年畅想未来记叙文精品 企业信息化建设与管理课程实验指导书范本 草房子读后感-第1篇 小数乘整数教学PPT课件人教版五年级数学上册 2022年教师个人工作计划范本-工作计划 国学小名士经典诵读电视大赛观后感诵读经典传承美德 医疗质量管理制度 2 2022年小学体育教师学期工作总结 2022年家长会心得体会集合15篇
    关于金锄头网 - 版权申诉 - 免责声明 - 诚邀英才 - 联系我们
    手机版 | 川公网安备 51140202000112号 | 经营许可证(蜀ICP备13022795号)
    ©2008-2016 by Sichuan Goldhoe Inc. All Rights Reserved.