临床输血与检验知识PPT课件

1、临床输血与检验 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 输血与血型输血前的检查交叉配血的方法和有关问题自身免疫性溶血性贫血产前的免疫血清学检查血小板血型与输血血小板输血展望 输血与血型 最早的输血试验是英国人罗维尔在1665年进行的 他把一条失血过多濒于死亡的狗的静脉与另一条健康狗的静脉用鹅毛管连接起来 失血的狗逐渐从濒死状态恢复过来 1667年 法国国王的御医丹尼斯首先进行了动物血液输入人体的试验 他将400毫升羊血注入一个失血多病的青年人的静脉 这个青年人竟奇迹般地活了下来 此后他又进行了多次输血试验 也安然无恙 但他在1668年的一次试验中 却以失败而告终 他给一名患者输动物血 第一次输血后病人病情有所好转 第二次输血后 病人出现发热 腹痛 大汗 血尿等症状 第三次输血后病人死亡 死者妻子告丹尼斯犯有杀人罪 为此 法国议会特别制定法律 不许再进行输血 1825年 英国的布伦德尔医生从一个人直接输血给另一个人首次成功 但是这一成功具有很大的偶然性 据医书记载 19世纪末叶有346人接受过输血治疗 另有129人被试图输入动物的血液 当时人们还没有认识到血型的不同 因输血发生的事故时有发

2、生 因此 输血是要冒极大风险的 输血的变迁 兰德斯坦纳 K Landsteiner 1868年生于奥地利首都维也纳 维也纳大学医学院毕业后 继续留校 学习化学 1900年发现A B O3种血型 1919年在荷兰巴库的一所医院工作 1922年赴美 受聘于洛克菲勒研究所 1930年获诺贝尔生理学医学奖 1943年逝世 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 兰德斯坦纳的贡献 卡尔 兰德斯坦纳是奥地利著名医学家 他因发现了 血型而于1930年获得诺贝尔医学及生理学奖 1900年 兰德斯坦纳在维也纳病理研究所工作时 发现一个人的血清有时会与另一个人的红细胞发生凝集 随后 兰德斯坦纳进一步发现人的血液按红细胞与血清中的不同抗原和抗体 可分为不同类型 他以 三个字母来代表他发现的三种不同类型的血液 不同血型的血液混合在一起 就会发生凝集 溶血现象 1902年 兰德斯坦纳的两名学生把实验范围扩大到155人 又发现了较为稀少的 型血 1927年 国际上正式采纳了兰德斯坦纳原定的字母命名 确定血型有 四种类型 至此 现代血型系统正式确立 兰德斯坦纳在认识人类血型方面的杰出研究成果 不仅为安全输血和治疗新生

3、儿溶血症提供了科学的理论基础 而且对免疫学 遗传学 法医学的发展都带来了深远影响 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 ABO血型的遗传关系 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 Rh是恒河猴 RhesusMacacus 外文名称的头两个字母 兰德斯坦纳等科学家在1940年做动物实验时 发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在Rh血型的抗原物质 故而命名的 凡是人体血液红细胞上没有Rh抗原 又称D抗原 的 称为Rh阴性 这样就使已发现的红细胞A B O及AB四种主要血型的人 又都分别被划分为Rh阳性和阴性两种 随着对Rh血型的不断研究 认为Rh血型系统可能是红细胞血型中最为复杂的一个血型系 Rh血型的发现 对更加科学地指导输血工作和进一步提高新生儿溶血病的实验诊断和维护母婴健康 都有非常重要的作用 根据有关资料介绍 Rh阳性血型在我国汉族及大多数民族人中约占99 7 个别少数民族约为90 在国外的一些民族中 Rh阳性血型的人约为85 其中在欧美白种人钟 Rh阴性血型人约占15 输血前的检查 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 输血前的检查 确认受血者身份和血样本查受血者以前血标本的试验记

4、录对受血者作ABO和Rh定型对受血者进行抗体筛选和鉴定选择适宜的血液用受血者血标本与献血者血标本做交叉 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 最好是血清标本要新鲜不能溶血 如溶血则要做对照 一支抗凝管另一支不抗凝 抗体检测对血标本的要求 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 抗体检测的目的 对献血者的检查 避免抗体对受血者的被动转移对受血者的检查 避免抗体与供血者的红细胞结合 出现反应对孕产妇的检查 避免新生儿溶血病的发生 避免如输血时抗体与供血者的红细胞结合 出现反应 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 受血者与献血者血标本交叉后标本的保留时间 不能马上丢弃在2 6 至少保留7天如有不良反应需进行重复试验 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 对患者配血标本的要求 新近采集的特殊情况下或患者血管条件很差也不能过三天可以是血浆也可以是血清 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 ABO血型一定要做正反定型 两种定型结果可相互验证防止标准血清变质防止类B现象或红细胞多凝现象或全凝现象对血型检查造成错误防止ABO亚型漏检发现和纠正血型错误 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 ABO正反定

5、型不一致的人为因素 试剂问题操作中加错样本或试剂离心不足或过度细胞比例不当结果判断错误 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 ABO正反定型不一致的客观因素 抗原减弱产生类B物质或红细胞多凝集现象抗体效价低有不规则抗体存在 交叉配血的方法和有关问题 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 交叉配血的方法和有关问题 盐水配血法酶配血法促凝剂配血法凝聚胺配血法抗人球蛋白法微柱凝胶配血法 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 交叉配血不合时的分析 主侧不合时的分析1 患者血型是否正确2 患者是否有冷抗体存在3 患者是否有不规则抗体的存在4 患者是否有自身抗体存在5 标本是否有细菌污染6 试管是否不清洁 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 交叉配血不合时的分析 次侧不合时的分析1 供者血型是否正确2 供者是否有冷抗体存在3 供者是否有不规则抗体的存在4 供者是否有自身抗体存在5 标本是否有细菌污染6 试管是否不清洁 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于不规则抗体 单一抗体或复合抗体 的问题 抗体的形成几乎总是通过输血或妊娠 接触有这种抗原的红细胞后免疫产生的 根据人体免疫的初级应答及二级

6、应答反应的原理 一个个体第一次接触外来抗原后 典型的应答方式是经过几天的潜伏期 出现特异性抗体 逐渐升高 约在两周左右达到高峰 保持不同的时期后逐渐下降 如不再给予抗原刺激 以后终于测不出抗体 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于不规则抗体 单一抗体或复合抗体 的问题 初级应答几天或几年后再接受同样的抗原刺激 常诱发二级应答 记忆应答 再一次刺激将增强和加速免疫应答 血清中的抗体含量2 3天就开始升高 大约10天左右达到高峰 二级应答阶段的抗体以IgG为主 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于自身抗体及冷抗体的问题 大量临床和实验研究的资料表明 自身免疫病的发生与病毒感染有密切关系 病毒感染可改变机体自身红细胞的抗原性 或作为多克隆激活剂可刺激B细胞分裂增殖 并发展为浆细胞 均可导致自身抗体的产生 另外病毒感染可直接损害免疫系统 促进自身免疫的发生和发展 冷凝集素综合征 CAS 也称冷血凝素疾病 CHD 是伴有冷反应性自身抗体的自身免疫性溶血性贫血 AIHA 的最常见的一种类型 约占免疫性溶血性贫血的16 32 也有资料统计占免疫性溶血性贫血的16 25 2011年4月 桂

7、林市中心血站蒋利星 关于自身抗体及冷抗体的问题 它的发生可能是急性的或慢性的 急性的AIHA 一时性的冷抗体综合征常和肺炎支原体感染有关 在少数情况下和传染性单核细胞增多症有关 慢性冷凝集素综合征的病人常常是老年人 有轻度或中等度的慢性溶血性贫血 天气冷时常发生雷诺氏现象和血红蛋白尿 冷反应性自身抗体的自身免疫性溶血性贫血的溶血原因是 当外周循环的温度低于32 时 IgM冷自身凝集素和病人的红细胞发生反应 IgM抗体及其抗原的反应使补体致敏红细胞 特别是C3和C4成分 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于自身抗体及冷抗体的问题 当细胞回到积蓄循环较温暖的中央部分时 IgM冷抗体从细胞表面上放散出来 而将补体致敏在红细胞上 这样溶血会很快发生 在循环红细胞上出现的补体成分是C3d 往往有些是C4d 因此补体是红细胞上唯一要测定的球蛋白 IgM冷自身凝集素的效价 在4 时测定时 往往在1000以上 常波动在2000 64000之间 但1000000以上者也有报道 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于自身抗体及冷抗体的问题 上述效价在64至16348间 一般情况下 有冷凝集素综合

8、征的病人很少需要输血 病人避免冷的温度 往往可以防止溶血 如果需要输血 应该用降低冷自身抗体作用 增强同种抗体的方法进行配血 血液加温输注 而自身抗体输血时采取的方法则是用多个供血者同时与患者交叉 取相对凝聚较弱的给予洗涤后输注 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于药物引起的自身抗体的问题 药物性溶血性贫血按发病机制可分药物氧化性溶血性贫血 DOHA 和药物免疫性溶血性贫血 DIHA DOHA主要常见于遗传性红细胞酶缺陷和血红蛋白病人 DIHA一般发生相对较缓 贫血症状轻 但奎宁丁 福阿亭或非那西丁引起的可较重 DIHA可分自身抗体型 又称甲基多巴型 使用甲基多巴诱发体内产生自身的红细胞抗体 DAT阳性较多 药物性吸附性 也叫半抗原型或青霉素型 青霉素大量使用时 作为半抗原与正常红细胞膜上的蛋白质结合 刺激机体产生抗药物 红细胞结合物的抗体 不仅是DAT阳性 导致溶血 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于药物引起的自身抗体的问题 蛋白非免疫吸附性 也叫先锋霉素型或非特异型 先锋霉素能与红细胞膜结合 使膜的抗原发性改变 膜变异的红细胞就能非免疫性吸附蛋白质 免疫复合物型 也叫

9、福阿亭型 此类药物可与蛋白载体结合 形成免疫复合物体 非特异性吸附红细胞表面 引起免疫反应 产生IgM型抗体 少数IgG 吸附免疫复合物的红细胞并结合补体 导致血管内溶血 红细胞表面有补体 故用单价的 做DAT可呈阳性 混合型 同一种药物在同一病人可同时的多种溶血机制 输血方法同自身抗体 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于细菌污染标本及器具不干净的问题 贮存于玻璃瓶中的盐水可能含有从容器脱落下来的胶体硅 这种物质能引起假阳性 金属容器贮存的盐水 可能含有金属离子 这些离子能参与蛋白质和红细胞表面非特异性结合 引起假阳性 洗涤不干净的玻璃器具 可能被灰尘 清洁剂或其它引起红细胞不规则聚集的材料所污染 引起假阳性 受细菌污染的贮存标本 T激活后的细胞可以与存在于抗人球蛋白血清中的抗T起反应 引起假阳性 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于方法学的问题 目前各医院交叉配血所使用的方法多为凝聚胺法 该方法分致敏 促凝和再中和三步进行 Polybrene法的实验原理是凝聚胺 Polybrene 是带有正电荷的大分子物质 能够中和红细胞膜唾液酸组成的负电荷 减少细胞间静电斥力 使细胞

10、间距缩短 而又不致引起红细胞间的非特异凝集 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于方法学的问题 在生理盐水介质中长度较短的IgG抗体不能造成抗体可在细胞间搭成复桥 离心后可见凝集反应 非特异性的凝集可被带负电荷的重悬液 枸橼酸钠 消除 对IgM抗体的作用则是增强凝集反应强度 从资料上显示该方法对Kell抗体不敏感 但我们在实际工作中发现对Dia抗体也不敏感 有一例病例医院用凝聚胺法交叉 没有发现任何问题 输血后出现了严重的溶血反应 经抗人球蛋白法检测出病人血清中有抗 Dia抗体 所引起的溶血反应 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于血型错误及ABO亚型的问题 玻片法定型简单 不需要离心设备 仅靠抗体的力量 凝集红细胞而无离心的加速反应 所以反应的时间较长 不适合急诊 另亚型红细胞抗原与抗体的凝集反应慢 凝集强度弱 有时容易被忽略而导致定型错误 不适合用于反定型和交叉配血 只适于大规模血型普查 为临床输血安全在鉴定血型时采用正反定型 正定型是用标准血型抗体 对红细胞膜上ABO系统血型抗原的鉴定 2011年4月 桂林市中心血站蒋利星 关于血型错误及ABO亚型的问题 反定型是用标准

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