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血清总胆固醇CHO测定

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  • 卖家[上传人]:万****
  • 文档编号:133386035
  • 上传时间:2020-05-26
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    • 1、血清总胆固醇CHO测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。2 实验原理胆固醇酯+H2O游离胆固醇+脂肪酸 CO游离胆固醇+O2胆甾烯酮+ H2O2 POD2H2O2+4-AAP+4-氯酚醌亚胺化合物 在一定波长处比色,吸光率(A)与T-CH浓度成正比。3 标本:3.1 病人准备:应禁食12小时抽血,24h内不饮酒。体检对象在抽血前24h内不作剧烈运动。3.2 类型:血清。3.3 标本存放 留取标本后请尽快分离血清。在冰箱保存的条件下(28)稳定3天, -20保存至少可以稳定3个月。3.4 标本运输 室温条件下运输。3.5 标本拒收标准 细菌污染的不能做测定。4 实验材料4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司CHO测定试剂盒(浙械注准 20142400134)4.1.1 试剂组成 R1试剂:三羟甲基氨基甲烷缓冲液 pH7.0 0.05mol/L 胆固醇脂酶(CE) 800U/L 胆固醇氧化酶(CO) 400U/L 胆酸钠 3.5mmol/LR2试剂:4-氨基安替比林(4-APP) 1mmol/L 辣根过氧化物酶(POD) 1000U/L 4-氯酚 2

      2、.5mmol/L4.1.2 试剂准备 试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时, 表明试剂已变质,不能继续使用。4.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。4.2 校准品:使用雅培公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。5. 仪器 AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪。6. 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分

      3、析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。8 计算方法 以CHO复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L报告。9. 参考值范围 理想水平5.2mmol/L(200mg/dl) 我室参考值范围 3.1-6.0 mmol/L10. 临床意义 胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收,是细胞膜的组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪和载脂蛋白的复合物,由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式:高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL),极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒。LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块,与冠心病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆固醇在正常范围内,LD

      4、L-C浓度的升高也预示了高度危险。HDL-C 具有抵御斑块形成的作用,它与冠心病的发生呈负相关。事实上,低HDL-C值是独立的危险因子。进行个体总胆固醇的检测只是起过筛作用,如果要对危险作较好的评估,必须另外进行HDL-C和LDL-C检测。近年来,通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/或使用各种药物治疗(特别他汀类药物HMG CoA还原酶抑制剂)临床试验,说明了降低总胆固醇和LDL-C水平可极大地减少CHD的危险。11. 操作性能11.1 线性范围:012.9mmol/L(0500mg/dl)(判定依据:r20.995);11.2 精密度:精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法,AU1000批内精密度小于3%,总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。11.3 方法学比较:本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对78个样品进行CHOL检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=1.00x+0.065mmol/L;r =0.995。11.4 灵敏度:本试剂的检测限为0mmol/L。12. 超出范围结果处理 本法对胆固醇的检测范围为012.9mmol/L。当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。13. 病危报警值的处理: 无。14. 方法局限性 干扰物质:当样品中抗坏血酸浓度2840mmol/L,胆红素浓度342mmol/L,血红蛋白浓度2.00g/L,甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。15. 补救措施 当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。16. 参考文献16.1叶应妩,王毓山,申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社,2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书

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