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血清高密度脂蛋白HDL测定

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  • 卖家[上传人]:万****
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  • 上传时间:2020-05-26
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    • 1、血清高密度脂蛋白HDL测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。2 实验原理 表面活性剂HDL HDL(可溶) 胆固醇酯化酶HDL-胆固醇 胆固酮 + H2O2 胆固醇氧化酶 PODH2O2 + DSBMT + 4-氨基安替比林 红紫色色素3 标本:3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.3.2 类型:血清3.3 标本存放 留取标本后请尽快分离血清。在冰箱保存的条件下(28)稳定3天,-20保存至少可以稳定3个月。3.4 标本运输 室温条件下运输3.5 标本拒收标准 细菌污染的不能做测定。4 实验材料4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL)测定试剂盒(浙械注准20142400141)4.1.1 试剂组成 试剂1(R1):哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0 50mmol/L胆固醇脂酶(CE) 800U/L胆固醇氧化酶(CO) 400U/L过氧化氢酶 20KU/LTriton X-100 2ml/L 试剂2(R2):哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0 50mmol/L过氧化物酶(POD) 1

      2、000U/L4-氨基安替比林(4-APP) 1.0mmol/LN,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺(DSBMT) 0.5mmol/L4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。试剂可避光保存可稳定12个月;试剂开口稳定1个月。4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。4.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂4.2 校准品:建议使用宁波美康生物科技有限公司提供的脂类标准品进行全点校准操作。4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪。6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生

      3、化分析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。8 计算方法 以HDL复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L报告。9 参考值范围 成年男子 1.350.31 mmol/L 成年女子 1.420.32 mmol/L 1.04mmol/L为合适水平,0.91mmol/L为偏低。参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。我室参考值0.9-1.6 g/L10 临床意义胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收,是细胞膜的组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪和载脂蛋白的复合物,由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式:高密度脂蛋白(

      4、HDL),低密度脂蛋白(LDL),极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒。LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块,与冠心病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆固醇在正常范围内,LDL-C浓度的升高也预示了高度危险。HDL-C 具有抵御斑块形成的作用,它与冠心病的发生呈负相关。事实上,低HDL-C值是独立的危险因子。进行个体总胆固醇的检测只是起过筛作用,如果要对危险作较好的评估,必须另外进行HDL-C和LDL-C检测。近年来,通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/或使用各种药物治疗(特别他汀类药物HMG CoA还原酶抑制剂)临床试验,说明了降低总胆固醇和LDL-C水平可极大地减少CHD的危险。流行病学研究观测到男性HDL-C浓度小于0.9mmol/L、女性小于1.0mmol/L,又出现空腹甘油三酯浓度大于2mmol/L时,预示冠心病的高度危险。11 操作性能11.1 线性范围:0100mg/dl(02.6 mmol/L)(判定依据

      5、:r20.995);11.2 精密度:精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法,AU1000、西门子ADVIA-2400批内精密度小于5%,总精密度小于6%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。11.3 方法学比较:本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对60个样品进行HDL-C检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=0.97x+0.03mmol/L;r=0.994。11.4 灵敏度:本试剂的检测限为0.01mmol/L。11.5 病人结果可报告范围:0.012.6mmol/L。12 超出范围结果处理 本试剂盒对高密度脂蛋白胆固醇检测范围为02.6mmol/L。当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶液作1:5稀释,重新测定,结果乘以6。13 病危报警值的处理 无。14 方法局限性14.1 干扰物质:当样品中抗坏血酸浓度2840mmol/L,胆红素浓度684mmol/L,血红蛋白浓度5.00g/L,甘油三酯浓度13.6mmol/L时没有观察到干扰。14.2 溶血标本可影响结果。15 补救措施 当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献16.1叶应妩,王毓山,申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社,2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书。

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