血清脂蛋白a比浊法测定
7页1、血清脂蛋白a比浊法测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。2 实验原理 血清中LP(a) 抗原与试剂中相应抗体致敏颗粒相结合,发生凝集反应,引起浊度改变,该浊度的高低与脂蛋白(a)的含量成正比。3 标本:3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.3.2 类型:血清3.3 标本存放 留取标本后请尽快分离血清。在冰箱保存的条件下(28)稳定3天,-20保存至少可以稳定3个月。3.4 标本运输 室温条件下运输。3.5 标本拒收标准 细菌污染的不能做测定。4 实验材料4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司血清脂蛋白(a)测定试剂盒(浙械注准20142400131)4.1.1 试剂组成 试剂1(R1): 甘氨酸缓冲液 pH7.0 0.05mol/L 试剂2(R2): 牛血清白蛋白 3g/L 脂蛋白(a)抗体致敏颗粒 2030ml4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。缓冲液(R1)和抗体试剂(R2)可避光密封保存可稳定一年。打开后抗体试剂(R2)稳定2个月。4.1.4 变质指示:当
2、试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。4.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95 g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂4.2 校准品:建议使用宁波美康生物科技有限公司提供的脂蛋白(a)标准品进行全点校准操作。4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪。6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I
3、与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。8 计算方法 以脂蛋白(a)复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mg/L报告9 参考值范围 0300mg/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。 我室参考值0-300mg/L10 临床意义 增高:见于动脉粥样硬化性心脑血管病、急性心肌梗死、家族性高胆固醇血症、糖尿病、大动脉瘤及某些癌症等。 减低:见于肝脏疾病、酗酒、摄入新霉素等药物后。11 操作性能11.1 线性范围:50-800mg/L(r0.995);11.2 精密度:精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法,AU1000、ADVIA-2400批内精密度小于3%,总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。11.3 方法学比较:本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对63个样品进行Apo B检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=1.08x-0.0512g/L;r=0.990。11.4 灵敏度:本试剂的检测限为0.003g/L。11.5 病人结果可报告范围:50-800mg/L(r0.995)12 超出范围结果处理 本法的检测范围为50-800mg/L(r0.995)对超出可报告范围的结果的处理:取0.1ml样品加0.5ml生理盐水,再测定,结果乘以6。13 病危报警值的处理 无。14 方法局限性14.1 干扰物质:宁波美康公司的LPa试剂中抗体特异地只与人LPa发生免疫反应。当样品中抗坏血酸浓度1704mmol/L,胆红素浓度598 mmol/L,血红蛋白浓度5.00g/L,甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。试剂与ApoA1和ApoA2没有交叉反应。14.2 溶血标本可影响结果。15 补救措施 当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献16.1叶应妩,王毓山,申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社,2012年第5版。16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书。
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