血清葡萄糖GLU测定

1、血清葡萄糖GLU测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2 实验原理 本试剂基于在精密度和准确性方面具有很高可靠性的TrinderS方法，在防止已知化合物（如尿酸、谷胱甘肽和肌酐等）的干扰进行了进一步的改良。 GOD葡萄糖+ H2O+ O2 H2O2+葡萄糖酸 PODH2O+AAP + HBA 醌亚胺（红色）H2O 式中：AAP 为4-氨基安替比林；HBA 为4-羟基苯甲酸 上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在波长500nm波长处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。3 标本：3.1 病人准备：12小时禁食。3.2 类型：血清，标本最好不要溶血。迅速分离血清或，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。随机收集尿样。3.3 标本存放：血清应在血液采集1小时内，尽早分离。加入糖分解抑制剂（NaF，KF）后的稳定性：1525保存可稳定1天,48保存可稳定7天。血清中的葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25下可稳定8个小时，在4下可稳定72小时。尿样应保存在28下并尽快进行分析。脑脊髓液如果避免蒸发可在28下稳定

2、至少5天，5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20的条件下。3.4 标本运输：常温条件下保存运输。3.5标本拒收标集：细菌污染、超时送检的的标本。4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GLU试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）： 过氧化物酶 375U/L 4-羟基苯甲酸 15mmol/L 4-氨基安替比林0.75mmol/L 磷酸盐缓冲液 110mmol/L 试剂2（R2）： 葡萄糖氧化酶 6000U/L 磷酸盐缓冲液 110mmol/L4.1.2 试剂稳定性与贮存： 在28避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月4.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.1.4 注意事项：试剂中含有防腐剂叠氮化钠，可能存在一定的刺激作用，请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触，即用大量清水冲洗。请勿吞服。 4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GLU校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品

3、：使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以GLU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告9 参考值范围：（mmol/L） 成人（空腹） 3.895.83参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应

4、建立自己的参考值。我室参考值 3.9-6.1mmol/L10 临床意义 检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖尿病的诊断和治疗监视，还可用于检出新生儿低血糖症、排除胰岛细胞癌以及评估各种疾病碳水化合物代谢状况。血清葡萄糖水平可能会异常高（高血糖）或异常低（低血糖）。葡萄糖测量用于诊断和治疗碳水化合物代谢紊乱，包括糖尿病，新生儿低血糖，自发性低血糖，郎格罕氏岛细胞癌等。 血糖升高： 1、内分泌功能障碍，能引起高血糖的糖尿病。 2、颅内压增高：颅内压增高刺激血糖中枢如颅外伤，颅外出血，脑膜炎等。 3、由于脱水引起的高血糖，如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。 血糖降低： 1、胰岛 细胞增生成瘤等，使胰岛素分泌过多。 2、对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂休前叶机能减退，肾上腺皮质机能减退和甲状腺机能减退而使生长素、肾上皮质激素分泌减少。 3、严重肝病患者葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，怀孕的妇女中很常见。妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之间或一天之中有一个显著的变化。脑脊髓液（CSF）葡萄糖的测定帮助区别病毒性脑膜炎与细菌性脑膜炎；细菌性脑膜炎和结核性脑膜炎中的葡萄糖值通常很低（不到的40%至5

5、0%血清葡萄糖），病毒性脑膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性脑膜炎（肿瘤细胞在脑膜中广泛渗透）也使CSF葡萄糖值在正常值以下。11 操作性能11.1试剂空白吸光度：试剂空白吸光度应不大于0.30。 11.2分析灵敏度：1.0mmol/L样本的吸光度差值（A）应不小于0.040。 11.3线性范围：试剂（盒）线性范围应覆盖035mmol/L。a) 线性相关系数（r）应不小于0.990；b) 010mmol/L范围内的绝对偏差应不超过2mmol/L；1135mmol/L范围内的相对偏差应不超过10。 11.4准确度：相对偏差（B）应不大于10%。 11.5精密度：(1)重复性：变异系数（CV）应不大于5%；(2)批间差：相对极差（R）应不大于5%。12 超出范围结果处理 本法线性上限为35mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:4稀释，重新测定，结果乘以5。13 病危报警值的处理 成人的血糖测定值25mmol/L；新生儿的血糖测定值16mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。14 方法局限性14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。 14.2葡萄糖氧化酶为与-D葡萄糖反应的特异酶。 14.3样本中如含有异常高水平的胆红素和维生素C可对测定结果产生负干扰。 14.4反应形成的色素可稳定2小时。 14.5试剂启用后，在210避光的条件下可稳定30天。若试剂混浊，或以水为空白在波长500nm处的吸光度值大于0.30，则不能使用15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献 16.1 叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2 钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版16.3 府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4 试剂说明书

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