实验八ABO血型鉴定、心音听诊、血压测量及蛙心灌流

1、ABO血型鉴定 实验原理 人类ABO血型抗原主要有A和B两种 根据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分为四种 据此 将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合 抗A或 和 抗B抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集 据其凝集情况便可判定出受试者的血型 实验材料 1 标准血清A型标准血清含抗B凝集素使B型 AB型红细胞的凝集原凝集B型标准血清含抗A凝集素使A型 AB型红细胞的凝集原凝集2 一次性采血针1枚 洁净玻片1块 长滴管1支 75 酒精 灭菌棉签 用标准的血清鉴定ABO血型时 根据凝集反应的结果可推测血型 表示有凝集反应 表示无凝集反应 B型 AB型 O型 A型 二 实验过程 1 配制红细胞悬液 消毒受检者的指尖 捏紧指尖 用消毒过的采血针迅速刺破皮肤 待血流出后将1滴血 滴入盛有1毫升浓度为0 9 的生理盐水的小瓶中 摇匀 即成为红细胞悬液 2 玻片法鉴定血型 取1载玻片 用小滴管吸A型标准血清 滴1滴在左侧 用另一小滴管吸B型标准血清 滴1滴在右侧 用小滴管取红细胞悬液 各滴1滴在左侧和右侧的血清上 用一根消毒牙签的两端分别用来混合A型和B型标准血清和红细胞悬液 静置数分钟

2、后 观察凝集现象 3 根据观察到的凝集现象推测受检者的血型 实验结果 记录受检者红细胞凝集情况 根据ABO血型鉴定表 下表 判断受检者的血型 ABO血型鉴定表 注意事项 1 红细胞悬液和标准血清均应新鲜 合格且无污染 防止出现假凝集现象 2 注意是否有溶血 切勿把溶血当作不凝集 3 在操作中 应严格分离各种检测用品 注意吸取标准血清的滴管和搅拌用的竹签等用品绝不能混淆 即防止在进行操作时相互污染 4 判断红细胞凝集 要有足够的时间 人的心音听诊 目的要求 学习心音听诊的方法 识别第一心音与第二心音 基本原理 心音是由心脏瓣膜关闭和心肌收缩引起的振动所产生的声音 用听诊器在胸壁前听诊 在每一心动周期内可以听到两个心音 实验器材 听诊器 方法与步骤 1 受试者安静端坐 胸部裸露 2 检查者带好听诊器 注意听诊器的耳具应与外耳道开口方向一致 向前 以右手的食指 拇指和中指轻持听诊器胸端紧贴于受试者胸部皮肤上 依次由左房室瓣听诊区 主动脉瓣听诊区 肺动脉瓣听诊区 右房室瓣听诊区 仔细听取心音 注意区分两心音 心脏瓣膜听诊区 为心脏各瓣膜开闭时产生的声音与各瓣膜的解剖位置并不完全一致 Areao

3、fauscultation 听诊内容 心率heartrate心律heartrhythm心音heartsound 注意事项 1 实验室内必须保持安静 以利听诊 2 听诊器耳具应与外耳道方向一致 橡皮管不得交叉 扭结 管切勿与它物摩擦 以免发生摩擦音影响听诊 3 如呼吸音影响听诊 可令受试者暂停呼吸片刻 人体动脉血压的测定及其影响因素 目的要求 1 学习并掌握人体间接测压法的原理和方法 2 观察在正常情况下 某些因素对动脉血压的影响 基本原理 测定人体动脉血压最常用的方法是间接测压法 是使用血压计在动脉外加压 根据血管音的变化来测量动脉血压的 实验原理 间接测定法 间接的方法 以外加的压强间接反映在某种情况下 外压分别等于收缩压 舒张压 何种情况 我们必须寻求建立某种关系 实验原理 间接测定法 人们发现 在某些情况下会出现 血管音 当外压大于收缩压时 血管被压闭 无血流 无血管音当外压小于舒张压时 学流通畅 无血管音当外压小于收缩压而大于舒张压时 血管时断时续 出现血管音 实验器材 血压计 听诊器 方法与步骤 1 受试者脱左臂衣袖 静坐5min 2 松开打气球上的螺丝 将压脉带内的空气完全

4、放出 再将螺丝扭紧 3 将压脉带裹于左上臂 其下缘应在肘关节上约2cm处 松紧应适宜 受试者手掌向上平放于台上 压脉带应与心脏同一水平 4 在肘窝部找到动脉搏动处 左手持听诊器的胸具置于其上 注意 不可用力下压 5 听取血管音变化右手持打气球 向压脉带打气加压 此时注意倾听声音变化 在声音消失后再加压20mmHg 然后扭开打气球之螺丝 缓慢放气 切勿过快 此时可听到血管音的一系列变化 声音从无到有 由低而高 而后突然变低 最后完全消失 然后扭紧打气球螺丝继续打气加压 反复听取声音变化2 3次 6 测量动脉血压重复上一操作 同时注意检压计之水银柱和声音变化 在徐徐放气减压时 第一次听到血管音的水银柱高度即代表收缩压 在血管音突然由强变弱时的水银柱高度即代表舒张压 记下测定数值后 将压脉带内的空气放尽 使压力降至零 注意事项 1 测压时室内须保持安静 以利听诊 2 戴听诊器时 务使耳具的弯曲方向与外耳道一致 即接耳的弯曲端向前3 压脉带裹绕要松紧适宜 并与心脏同一水平 4 重复测压时 须将压脉带内空气放尽 使压力降至零位 而后再加压测量 5 切勿将听诊器放入袖带内 6 测2 3次 以较低的

5、值为准7 血压计的开关 1 学习离体蛙心灌流方法 2 了解离体器官的研究方法 3 观察K Na Ca2 等离子 肾上腺素 乙酰胆碱 酸硷度诸因素对心脏活动的影响 理解心脏正常活动需要一适当的理化环境 蛙心灌流 目的 心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境里才能维持 一旦适宜的理化环境 内环境 被干扰或破坏 心脏活动就会受到影响 心脏受自主性神经的双重支配 交感神经兴奋时 其末梢释放去甲肾上腺素 作用于心脏 1受体使心肌收缩力加强 传导增快 心率加快 而迷走神经兴奋时 其末梢释放乙酰胆碱 作用于心脏M受体使心肌收缩力减弱 心率减慢 蛙心离体后 用理化性质近似于血浆的任氏液灌流 在一定时间内 可保持节律性收缩和舒张 改变任氏液的组成成分 心脏跳动的节律 频率和幅度都可随之发生改变 原理 实验步骤及观察项目 1 离体心脏制备 1 取一青蛙 破坏脑和脊髓 暴露心脏 2 用小镊子夹起心包膜 沿心轴剪开心包膜 仔细辨认心房 心室 动脉圆锥 主动脉 静脉窦 前后腔静脉等解剖结构 录象 3 在左主动脉下穿一根线 靠近动脉分叉处结扎左主动脉 另一线置主动脉圆锥下备用 提起左主动脉结扎线 用眼科剪在左主

6、动脉靠近动脉圆锥处剪一小斜口 将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉 插至动脉圆锥时略向后退 在心室收缩时 向心室后壁方向下插 经主动脉瓣插入心室腔内 一次不成可反复多次稍退后插 但不可过深顶室壁以免堵住管口 插管若成功进入心室 管内液面会随着心室跳动而上下移动或看到血如喷泉涌入插管 用动脉圆锥下的备用线结扎插管 并将结扎线固定于插管侧面的小突起上防止滑脱 4 提起插管 在结扎线远端分别剪断左 右主动脉 轻轻提起插管及心脏 用线将左 右肺前后腔静脉结扎 注意 在结扎前用小弯镊沿静脉窦往下压 结扎线在镊子下方结扎 以保护静脉窦防止误扎 否则出现窦房阻滞 最后在结扎线下方剪断上述静脉而将心脏离体 用滴管吸净插管内血液 加入新鲜任氏液 反复冲洗数次 直至液体澄清 保持灌流液面高度恒定 1 2厘米 即可进行实验 5 用试管夹将蛙心插管固定于铁支架上 将连于蛙心夹的线经滑轮转挂于张力换能器 注意避免液体滴到换能器上漏电锈蚀 适当调整前负荷即可记录 2 仪器线路连接将张力换能器插头连接至BL系统第1通道 或MS系统第2道的插座 3 软件操作开机并启动相关实验系统 1 BL系统 实验项目 循环实

7、验 蛙心灌流 G T F可适当调节 让波形幅度大小适宜 扫描速度可根据波形进行调节 让波形分开易辩 4 观察项目 1 描记正常心跳曲线 曲线疏密表示心跳频率 曲线幅度表示心脏收缩力的强弱 曲线的规律性表示心跳的节律性 2 吸出插管内全部灌流液 换入等量的0 65 NaC1 观察心跳曲线 当效应明显时应及时吸出灌流液 并用新鲜任氏液反复换洗 直至恢复适宜的心跳曲线为止 调节最后一次液面高度同前 1 2厘米 3 滴入2 CaC121 2滴 观察及换液方法同上 4 滴入l KCl1 2滴 观察及换液方法同上 5 滴入3 乳酸1 2滴 效应出现后立即滴入2 5 NaHCO3数滴 效应明显时及时吸出灌流液 换液方法同上 6 滴入1 10000肾上腺素1 2滴 观察及换液方法同上 7 滴入1 100000乙酰胆碱 滴 效应明显时应立即吸出灌流液 并用新鲜任氏液换洗 方法同上 8 滴入0 1 阿托品1滴 效应出现后立即滴入1 100000乙酰胆碱1滴 观察结果并与 8 比较 然后用任氏液换洗 方法同上 注意事项 1 换洗时可暂停记录 且最后一次加液的液面应保持同一高度 2 滴入试剂时 先加1 2滴 观察效应 如不明显可再补加 3 每项实验均应有前后对照 4 每次加药时 应作标记 5 随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润 6 吸任氏液的吸管和吸蛙心插管内液的吸管要分开 专管专用 以免影响实验结果 7 有些步骤 如滴加KCl和Ach时 在刚出现抑制效应时立即冲洗 否则作用过久抑制过深可能难以抢救

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