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血清总蛋白液体TP双缩脲法测定作业指导书

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1、血血清清总总蛋蛋白白液液体体 T TP P 双双缩缩脲脲法法测测定定作业指导书作业指导书 1 1 实实验验原原理理双缩脲比色终点法在碱性条件下蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物显色强度和蛋白浓度成正比 OH 蛋白质 Cu2 紫红色复合物 2 2 标标本本采采集集 2 1 病人准备无特殊要求最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰 2 2 类型血清或血浆 3 3 标标本本存存放放 20 25 保存可稳定 6 天 4 8 保存可稳定 4 周 20 保存至少可稳定 1 年 4 4 标标本本运运输输室温条件下运输 5 5 标标本本拒拒收收标标准准细菌污染的不能做测定 6 6 实实验验材材料料 6 1 上海申能总蛋白测定试剂盒货号 14223171701 试剂 1 试剂 2 6 1 1 试剂组成试剂 1 R1 6 64ml 氢氧化钠 80 mmol L 酒石酸钾钠 12 8 mmol L 试剂 2 R2 6 16ml 氢氧化钠 100 mmol L 酒石酸钾钠 16 mmol L 碘化钾 15 mmol L 硫酸铜 6 mmol L 6 1 2 试剂准备试剂为即用式 6

2、1 3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2 25 若无污染可稳定至失效期试剂有效期为24 个月试剂不可冰冻开盖后应避免污染 6 1 4 变质指示当试剂有浊度时表明有细菌污染不能继续使用 6 1 5 注意事项试剂中含有氢氧化钠不可入口如与皮肤及粘膜接触请立即用大量水冲洗使用试剂时应采取必要的防护 6 2 校准品使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准品对自动分析仪进行校准具体参见生化检验校准品和质控品 SOP 文件 6 3 质控品具体参见生化检验校准品和质控品 SOP 文件 7 7 仪仪器器奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8 操操作作步步骤骤 8 1 项目基本参数参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪项目测定参数 SOP 文件 8 2 仪器操作步骤参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪操作规程 SOP 文件 9 9 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0 质质量量控控制制在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析以2S 为质控警告限 3S 为失控限绘制质

3、控图判断是否在控质控规则参见生化室室内质控操作规程 SOP 文件 1 11 1 计计算算方方法法以 TruCal U 复合校准品总蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后在病人结果可报告范围内仪器直接报告可靠的检测结果以g L 报告 1 12 2 参参考考值值范范围围 g L 成人 66 88 儿童青少年男女 1 30 天42 6 2 41 63 1 6 个月 44 6 6 47 67 6 个月 1 岁 56 7 9 55 70 1 18 岁57 8 0 57 80 注各实验室应有自己的参考范围参考值因性别年龄饮食和地域的不同而有所差别根据好的实验室经验每个实验室应建立自己的参考值 1 13 3 临临床床意意义义总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值肝脏蛋白合成缺陷肾功能损伤引起蛋白丢失肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降而在慢性炎症疾病肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高 1 14 4 操操作作性性能能 14 1 线性范围 0 5 150g L 14 2 精密度重复性的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法 AU1000 批内重复性小

4、于 3 总不精密度小于 3 用于分析的质控血清和数据处理符合以上的 NCCLS 的规则批内精密度 n 20 x g L s g L CV 天间精密度 n 20 x g L s g L CV 样品 1 52 70 50 91 样品 1 52 40 61 06 样品 2 70 50 71 01 样品 2 70 71 11 53 样品 3 1040 80 80 样品 3 1041 41 32 14 3 方法学比较本公司的试剂盒 y 与某商品化试剂盒 x 同时对 68 个样品进行 TP 检测将检测结果作方法学比较其统计结果如下 y 1 00 x 0 7g L r 0 997 14 4 灵敏度本试剂的检测限为0 5g L 14 5 病人结果可报告范围 0 150g L 如样品测定值超过上限时应将样品用0 9 氯化钠溶液作 1 1 稀释重新测定结果乘以2 1 15 5 超超出出范范围围结结果果处处理理本法线性上限为 150g L 如样品测定值超过上限时应将样品用0 9 氯化钠溶液作 1 1 稀释重新测定结果乘以2 1 16 6 病病危危报报警警值值的的处处理理

5、无 1 17 7 方方法法局局限限性性 17 1 本法线性上限为 150g L 如样品测定值超过上限时应将样品用0 9 氯化钠溶液作 1 1 稀释重新测定结果乘以2 17 2 干扰物质静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清或血浆使用双缩脲方法的检测结果会明显增高请选用其它方法如凯氏定氮法当样品中抗坏血酸浓度 1704 mol L 胆红素浓度 684 mol L 血红蛋白浓度 5 00g L 甘油三酯浓度 11 3mmol L 时没有观察到干扰 1 18 8 补补救救措措施施当仪器发生故障时迅速联系仪器厂家进行维修 1 19 9 参参考考文文献献 1 Thomas L editor Clinical laboratory diagnostics 1st ed Frankfurt TH Books Verlagsgesellschaft 1998 p 644 7 2 Johnson Am Rohlfs EM Silverman LM Proteins In Burtis CA Ashwood ER editors Tietz textbook of clinical chemistry 3rd ed Philadelphia W B Saunders Company 1999 p 477 540 2 20 0 其其他他仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行

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