血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定作业指导书
10页1、血清天门冬氨酸氨基转移酶血清天门冬氨酸氨基转移酶 IFCCIFCC 推荐方法测定作业指导书推荐方法测定作业指导书 1 1 实实验验原原理理 国际临床化学学会 IFCC 推荐的紫外 连续监测法 L 天门冬氨酸 酮戊二酸 AST 草酰乙酸 L 谷氨酸 草酰乙酸 NADH H MDH 苹果酸脱氢酶 L 苹果酸 NAD H2O 2 2 标标本本 2 1 病人准备 12 小时禁食 2 2 类型 血清 肝素或EDTA 血浆 3 3 标标本本存存放放 3 天内的活性损失 2 8 保存 8 15 25 保存 10 标本稳定性 20 保存 至少可稳定 3 个月 4 4 标标本本运运输输 常温条件下保存运输 5 5 标标本本拒拒收收标标准准 标本溶血 细菌污染的标本 6 6 实实验验材材料料 6 1 试剂 申能 AST 测定试剂盒 货号 141 26017170 1 试剂 1 6 64ml 试剂 2 6 16ml 6 1 1 试剂组成 试剂 1 R1 Tris 缓冲液 pH7 8 80mmol L L 天门冬氨酸 240mmol L MDH 苹果酸脱氢酶 600U L LDH 乳酸脱氢酶 600U L 试
2、剂 2 R2 a 酮戊二酸 12mmol L NADH 0 18mmol L 磷酸吡哆醛试剂 Good s 缓冲液 pH9 6 0 7mmol L 磷酸吡哆醛 0 09mmol L 6 1 2 试剂准备 试剂为即用式 6 1 3 试剂稳定性与贮存 试剂保存于 2 8 若无污染 可稳定至失效期 试剂不可冰冻 6 1 4 变质指示 当试剂有看得见的微生物生长 有浊 度 或者未开盖的液体有沉淀时 表明试剂已变质 不 能继续使用 6 1 5 注意事项 试剂中含叠氮钠 0 95g L 为防 腐剂 不可入口 避免接触皮肤及粘膜 应采取必要的 预防措施使用试剂 6 2 校准品 使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准 具体参见生化检验校准品和 质控品 SOP 文件 6 3 质控品 具体参见生化检验校准品和质控品 SOP 文件 7 7 仪仪器器 奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8 操操作作步步骤骤 8 1 项目基本参数 参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪项目测定参数 SOP 文件 8 2 仪器操作步骤 参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪
3、操作规程 SOP 文件 9 9 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0 质质量量控控制制 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析 以2S 为质控 警告限 3S 为失控限 绘制质控图 判断是否在控 质控规则参见生化室室内质控操作规程 SOP 文件 1 11 1 计计算算方方法法 以 TruCal U 复合校准品 AST 校准值 校准仪器后 在病人结果可报告范围内 仪器直接报告 可靠的检测结果 不使用校准品进行AST 活力检测 可以直接使用 A min 均值乘以计算因子得到结果 但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品 计算 ALT 活力的计算因子见下表 A A m mi in n 因因子子 A AS ST T 活活力力 U U L L 底物起始的反应 37 样品起始的反应 37 340 nm 2143 1745 334 nm 2184 1780 365 nm 3971 3235 1 12 2 参参考考值值范范围围 4 不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛 女性 31U L 10 35U L 男性 37U L 10 50U L 参考值因性别 年龄
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