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微包埋培养技术的建立及其在粘细菌分离纯化中的应用

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1、专导业发酵工程师李越中教授 2 0 1 0 年5 月1 5 日、关于学位论文使用授权的声明 r 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 ( 保密论文在论文作者签名：一1 冬高莉乞导师签名汤t ，溅 lII|l 一一 J I 1 3 3 固定化培养技术在粘细菌研究中的应用10 第二章微包埋培养技术的建立1 1 2 1 实验材料与仪器试剂1 l 2 1 1 菌株11 2 1 2 主要培养基12 2 1 3 主要实验试剂1 2 2 1 4 主要仪器设备与耗材1 4 2 1 5 分析软件15 2 2 实验方法15 2 2 1 纤维堆囊菌的培养1 5 2 2 2 微包埋培养技术的优化及应用1 5 2 2 3 纤维堆囊菌基因组D N A 的提取1 8 2 2 4 纤维堆囊菌1 6 Sr R N A 序列的测定1 9 2 3 实验结果及讨论2 l 2

2、3 1 微包埋培养基本条件的建立及优化2 l 2 3 2S 0 0 1 5 7 2 和S 0 1 5 7 2 4 单细胞混合液的分离纯化2 8 2 4 本章小结2 9 第三章微包埋培养技术在纤维堆囊菌突变株分离纯化中的应用3 1 3 1 实验材料31 “ 3 1 1 菌株3 1 3 1 2 主要培养基3 2 3 1 3 主要实验试剂3 2 3 1 4 主要仪器设备及耗材3 2 J V 1 l 1 l 2 3 5 6 6 7 8 8 8 9 ，，山东：学硕 j 学位论文 3 2 实验方法 3 2 1 纤维堆囊菌的培养 3 2 2 微包埋培养w 5 3 2 3 2 3 纤维堆囊菌的发酵 3 2 4 发酵产物H P L C 检测 3 3 实验结果及讨论 3 4 本章小结第四章微包埋培养技术在粘细菌资源开发中的应用初 4 1 实验材料与实验仪器 4 1 1 土样一3 8 4 1 2 菌株3 8 4 1 3 主要培养基3 8 4 1 4 主要实验试剂3 9 4 1 5 主要仪器设备及耗材4 0 4 1 6 软件工具4 0 4 2 实验方法4 1 4 2 1 粘细菌的培养4 1 4 2 2

3、孢囊杆菌亚目不同属的粘细菌对D K l 6 2 2 的助长4 1 4 2 3 包埋土样进行土壤中粘细菌的分离4 1 4 2 4 凝胶球粒内菌株的分类鉴定4 4 4 2 5 凝胶球粒内菌株的再培养4 8 4 2 6 菌落P C R 4 9 4 3 结果及讨论4 9 4 - 3 1 孢囊杆菌亚目不同属粘细菌对D K l 6 2 2 菌株的助长情况4 9 4 3 2 对土壤悬液进行包埋培养条件的确定5 I 4 3 3 孢囊杆菌亚目不同属的粘细菌作为助长菌株时包埋培养的结果5 6 4 3 4 凝胶球粒内粘细菌的再培养5 8 4 4 本章小结6 1 全文总结6 3 参考文献6 5 致谢6 9 攻读学位期间发表的论文7 0 学位论文评阅及答辩情况表7 1 I I I I V 1 1 1 1 。2 3 5 6 6 7 8 9 1O 13 13 C h a p t e r2 E s t a b l i s h m e n to f m i c r o e n t a p m e n tp r o t o c o li nm y x o b a c t e r i a 1 3 2 1M a t e r

4、i a l sa n de q u i p m e n t s 1 4 2 1 1S t r a i n s 1 4 2 1 ：! M e d i a 1z ：! 1 3R e a g e n t s 1 4 ：! 1 4E q u i p m e n t s 16 2 1 5S o 讯v a r e s 17 2 ：! M e t h o d s 17 2 2 1C u l t u r eo f S o r a n g i u mc e l l u l o s u m 17 2 2 2O p t i m i z a t i o no f m i c r o e n t r a p m e n tc u l t i v a t i o n 17 2 2 3E x t r a c t i o nt h eg e n o m eD No f S o r a n g i u mc e l l u l o s u m 2 0 2 2 41 6 Sr R N As e q u c i n go f S o r a n g i u mc e l l u l o s u m 2 1 2 3R e s u l t sa n d

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