依那普利联合姜黄素对实验性肝纤维化小鼠肝脏的保护作用及机制
72页1、河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位沦文在导师( 或指导j 嚏且) 的指导下,南本人独、,:完成。本学 位论文研究所获的研究成果其知识产杖归河北医科大学所有。河北医 科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。几发表与学位论文主 要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、 申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有,否则,承担相应的法律 责任。 研究生签名:酮、t 导师签章:& 而二级学院签章: 加r D 年乡月知。日 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文 中特别加以标注等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成 果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。 研究生签名:孤、占, 导师签章:矗砺 认。年弓月;口日 1 ”- ”6 小鼠肝脏的保 附l 羽 2 2 附表O OOOOO OOO 4 0 讨论4 3 参考文献B OO OO O OOOOOO 4 9 综述N F 1 c B 与肝纤维化关系研究现状I OoOoo ooo 5 2 致谢0 00 000 000
2、000 6 7 个人简历 OOOOOO OOO OOOOOOOOO OOOMOO OOO 6 8 3 3 8 1 1 1 中文摘要 依那普利联合姜黄素对实验性肝纤维化小鼠 肝脏的保护作用及机制 摘要 目的:肝纤维化( h e p a t i cf i b r o s i s ) 是肝脏在受到慢性损伤时细胞外 基质( e x t r a c e l l u l a rm a t r i x ,E C M ) 分泌与降解失衡,导致E C M 在肝内过 度沉积的病理过程,肝星状细胞( h e p a t i cs t e l l a t ec e l l ,H S C ) 是各种致炎 因子和E C M 的主要分泌细胞,其激活、增殖是肝纤维化的关键环节。在 生理状态下,E C M 的合成和降解处于一种动态平衡,从而维持肝脏的正 常结构。然而持续、过度的炎症反应则加重肝损伤,促进肝纤维化发生、 发展。其中细胞黏附分子在细胞与细胞或细胞与E C M 之间的黏附过程与 炎症及纤维化进程密切相关。N F r d 3 是广泛存在于细胞内的信号转导通 路,被各种刺激因素激活及随后发生的基因表达是肝纤维化发
3、生过程中的 关键步骤,这些基因包括:细胞间粘附分子( I C A M 1 ) 、血管细胞间粘附 分子( V C A M 1 ) 等,因此我们建立 “ C C l 4 致小鼠肝纤维化模型,以探讨 血管紧张素转换酶抑制剂依那普利和姜黄素单独应用及联合应用对肝细 胞损伤和纤维化的保护作用和对N F r d 3 及其相关粘附分子表达的影响,以 阐明它在抑制肝纤维化形成中的作用及分子机制,为开发有效的抗肝纤维 化药物及在临床中的开发应用提供理论依据。 方法:选用8 周龄健康雄性昆明小鼠5 0 只,随机分为5 组:对照组、 肝纤维化模型组、姜黄素治疗组、依那普利治疗组、姜黄素联合依那普利 治疗组。适应性喂养1 周后,除正常对照组外,各组均给予1 0 的C C l 4 橄榄油腹腔注射( 5 u 1 g ) ,每周2 次,正常对照组给予生理盐水腹腔注射 ( 5 u l 儋) ,每周2 次,均注射1 0 周。开始造模2 周后对照组及模型组小鼠 给予生理盐水灌胃,各治疗组小鼠分别给予姜黄素( 1 0 0 u g g ) 、依那普利 ( 1 0 m g k g ) 、及姜黄素联合依那普利( 姜黄素l O O
4、 u g g ,依那普利l O m g k g ) 灌胃治疗,每周3 次,治疗8 周后处死。留取血清检测肝功能j 岍、A S T 、 和血清肝纤维化指标H A ;留取部分肝组织1 0 中性福尔马林固定,石蜡 包埋,苏木精一伊红( 眦) 染色及M a s s o n 染色观察肝组织病理学改变; 免疫组织化学染色法观察肝组织N F r BP 6 5 、I K B 、I C A M 1 、V C 蝴1 中文摘要 蛋白表达;提取肝组织总R N A ,逆转录聚合酶链反应法( R T - P C R ) 检测 I C A M 1 、V C A M 1m R N A 表:达。 结果:1 小鼠一般情况:对照组小鼠精神状态良好,活动自如,模型 组小鼠精神萎靡,动作迟缓,体重明显下降;各治疗组小鼠的情况好于模 型组。各组小鼠体重依次为:模型组( 3 4 4 3 4 - 4 0 8 9 ) 依那普利治疗组( 9 2 1 1 - 4 - 1 6 8 9 肌) 姜黄素治疗组( 8 3 7 5 4 - 1 4 5 4 U L ) 联合治疗组( 4 7 5 0 4 - 9 1 7 U L ) 对照组( 2 6 6
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