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镜检基础知识

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1、饲料显微镜检查基础知识,广东省农业科学院畜牧研究所吴维煇 02038765331,植物生长条件（土壤气候肥料）植物的品种、收获期和贮存时间饲料加工工艺的各个环节以次充好、以假乱真保质期、包装袋破损、自燃,自然变异,加工,掺假,损坏和变质,为何饲料质量检测？原因：饲料原料和全价饲料质量的变异,饲料质量检测的方法,设备简单、耐用、价格低分析费用低（与化学方法相比）快速几分钟操作简单（研磨、脱脂或过筛、观察）经验熟悉掌握各种饲料原料及可能掺杂物的特征掺假鉴别对饲料原料质量的初步评估可弥补化学方法的不足,饲料显微镜检测方法,饲料显微镜检查基础知识,定义目的特点使用基本步骤结果的稳定性、准确性,定义,饲料显微镜检查是借助显微镜扩展人眼功能，依照各种饲料的组织形态、细胞形态、色泽、硬度、及不同的染色特性等，对样品的种类和品质进行鉴定的方法。,显微镜检测的主要目的,藉外表特征（体视显微镜检测）或细胞特点（生物显微镜检测）对单独的或者混合的饲料原料和杂质进行鉴别和评价。如果将饲料原料和掺杂物或污染物分离开来以及作比例测量，则可以显微镜检测方法对饲料

2、原料作定量鉴定。,镜检的目的,检查饲料原料中应有的成分是否存在检查是否含有有害的成分检查是否存在污染物检查是否含有有毒的植物和种子检查处理是否恰当检查是否污染霉菌、昆虫或啮齿类排泄物检查是否混合均匀弥补化学分析或其他分析的不足,镜检的特点,快速、准确、简便可检出掺杂污染及原料加工处理是否良好迅速只需数分钟即可得到检查结果便宜只需支付显微镜及化学药品的费用易学技术人员短期培训后即能胜任此工作,显微镜种类,体视显微镜：鉴别饲料外部结构，以被检样品的的外部形态特征为依据，如表面形状、色泽、粒度、硬度、破碎面形状等生物显微镜: 鉴别饲料内部结构，以被检样品的组织细胞学特征为依据。主要介绍体视显微镜检查方法,体视显微镜,又称“实体显微镜”、“立体显微镜”，是一种具有正像立体感的目视仪器，被广泛地应用于生物学、医学、农林、工业及海洋生物各部门体视显微镜能获得立体感觉，其原理是通过两个接目镜对物体从不同的方向在人眼的网膜上形成的象而产生的。,体视显微镜构造及使用,右侧接目镜筒上有视度调节圈的位置，如观察者双眼视度具有差异，可以先调节显微镜使左眼成像清晰，然后旋转右

3、侧视度调节圈至右眼成像清晰。双筒可以在一定角度内相对地转动以适应工作者两眼间距离。有手轮可旋转，利用它的转动可在不变更工作距离情况下更换显微镜放大倍数。,生物显微镜,是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究，同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。,镜检工作者,应掌握饲料原料的立体显微特征：实物、图谱可能掺杂物的立体显微特征：实物、图谱动植物组织、细胞学知识相应的物理、化学知识将显微镜检查和物理、化学分析的结果进行综合后判断,饲料显微图谱,可提供大致的外部特征：形状、颜色和饲料组成的密实度可发现和辨别出饲料中的掺杂使假情况图谱是鉴别各种结构的不完全指南，因为并不是一切微细部分都能在显微图谱中全部看见。但有些图谱仍能给研究者以引导，显示出饲料的结构，或者，如果在没有饲料样品的情况下也可将其作为参考。,镜检的基本步骤,检前处理样品制备显微镜观察可疑物的确认镜检结论,镜检的基本步骤,1 饲料样品的检前处理感官检查：看、闻、尝、摸应特别注意细粉粒，因为掺假、掺杂物往往被粉碎得很细以逃避检查。,镜检的基本

4、步骤,2 样品制备：筛分、浮选、脱脂筛分：镜检之前应对样品进行筛分，通常用0.42mm、0.25mm、0.177mm的筛及底盘将样品分成三组，然后观察。此过程对熟练的检测人员可以省略。饼块、碎粒、或颗粒的饲料样品：用研钵研碎，不可用粉碎机（化学分析）。,镜检的基本步骤,2 样品制备：筛分、浮选、脱脂浮选用四氯化碳或氯仿将有机成分和无机成分分离开来。上部为有机成分，底部是无机成分。室温下干燥。四氯化碳还可脱去样品中的油脂。,镜检的基本步骤,2 样品制备：筛分、浮选、脱脂脱脂高脂含量的样品，脂肪溢于样品表面，往往粘上许多细粉，使观察产生困难。脱去脂肪，易于观察。,脱脂的方法,纸包脱脂法：索氏提取法快速脱脂法：丙酮、石油醚、乙醚浮选脱脂法：用CCl4、CHCl3 密度不同来脱脂和选择目标原理：将油脂溶于有机溶剂碱(NaOH、KOH)煮原理：在碱的作用下，油脂水解为甘油和脂肪酸,镜检的基本步骤,3 体视显微镜观察将处理好的各组样品分别平铺于纸下或培养皿中，置于体视显微镜下，从低倍至高倍进行检查。从上到下，从左到右逐粒观察，先粗后细，边检查过用探针将识别的样品分类，同

5、时探测各种颗粒的硬度、结构、表面特征，如色泽、形状等并作记录。将检出的结果与生产厂家出厂记上的成分相对照，即可将掺假、掺杂、污染等质量情况作出初步测定。,镜检的基本步骤,3 体视显微镜观察全面检查逐步放大抓住重点和关键,镜检的基本步骤,4 生物显微镜观察当某种异物掺入较少且磨得很细时，在体视显微镜下很难辨认，需通过生物镜进行观察。至少要检查三个样片后再综合判断过筛（粒大10目，粒小20目）酸处理（加热）过滤蒸馏水冲洗23次必要时还需碱处理（加热）过滤蒸馏水冲洗23次制片观察。,镜检的基本步骤,5 可疑物的确认镜下看到的疑似掺假物用其它方法来确认化学定性分析：点滴、快速试验化学定量分析：常规、AA等近红外光谱分析：数据库比对生物学分析检测：霉菌毒素等 6 结论,镜检关键点,脱脂处理：针对脂肪含量高的样品镜下看到的掺假物要用其它方法来确认抓主要问题，不要一叶障目，正确判断杂质和掺杂。鉴定步骤应依具体样品进行安排，并非每一样品均须经过以上所有步骤，仅以能准确无误完成所要求的鉴定为目的。,结果的稳定性,饲料显微镜检查是以被检试样的外部形态特征为依据，如表面形状、色泽、粒度、硬度、破碎面形状等，而动植物形态学在整体与局部的特征上具有相对的独立型，不论饲料加工工艺如何处理，都或多或少地保留一些用于区别诸种饲料的典型特征，这就使饲料显微镜检测结果具有稳定性。,结果的准确性,饲料显微镜检测结果的准确程度取决于检测者对原料特征的熟悉程度及应用显微技术的熟练程度。,谢谢！,

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