药用植物学实验指导-2017

药用植物学实验指导 中南民族大学药学院实验室守则 1实验课是培养学生独立思考和理论联系实际、灵活应用能为的重要手段，也是进行科研工作的基础，必须严肃认真。2准时上实验课，不得无故缺席，不得迟到早退，按指定座位就坐，使用相应的显微镜。3.实验前必须通过预习本次实验，明确实验的目的要求、内容、方法和步骤。实验时要认真观察，独立思考，做好记录，实验完毕后要按时交实验报告。 4.当老师讲解实验时，要专心听讲，并作必要的记录在实验中如有疑问请举手，不准大声喧哗。 5爱护实验室一切仪器设备，按操作规程使用显微镜，尽量节约水、电及擦镜纸、试剂等一切消耗物质损坏仪器须登记，按规定赔偿。 6每次实验必须带备教科书，绘图用具(HB、2H铅笔各一支，橡皮、尺子等)和实验记录本。 7保持实验室清洁整齐，一切实验用具用完后要擦洗干净，放回原处每次实验完毕，要搞好室内清洁卫生离开实验室时要关好水、电、门、窗。实验一 显微镜的构造与使用植物细胞的基本结构及后含物一、目的要求 (1) 熟悉光学显微镜的构造、使用(2) 掌握植物细胞的基本结构(3) 识别植物细胞的各种后含物 (4) 掌握水合氯醛制片法、表面片制法 (5) 掌握草酸钙晶体的类型和形态 (6) 学习绘制植物显微图二、仪器用品及实验材料 (一)仪器用品 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、擦镜纸、稀碘液、酒精灯、培养皿、解剖针、水合氯醛液，蒸馏水等 (二)实验材料：新鲜洋葱鳞茎，马铃薯，浙贝，半夏，黄柏粉末，大黄，甘草，地骨皮，射干，胡萝卜，辣椒等。内容与步骤： (一)植物细胞的基本构造 (1) 洋葱表皮细胞制片（观察细胞结构） 用镊子撕取2小片（ 3mm X 3mm ）洋葱内表皮，置载玻片上，蒸馏水装片。其中一片在盖玻片一侧加1滴1的碘-碘化钾溶液，用吸水纸在另一侧吸去多余溶液。然后在显微镜下观察洋葱表皮的细胞壁、细胞核、液泡。 (2) 有色体的观察 用刀片从红辣椒或胡萝卜果肉上刮取少许，均匀涂在载玻片中央，加蒸馏水1滴，再加盖玻片观察。细胞内橙色颗粒即为有色体。 (3) 淀粉粒的观察 用徒手切片法将土豆条切成极薄片，放到盛有清水的平皿中，用毛笔挑选最薄的制成临时装片,观察淀粉粒。比较未染色的与用0.2%的碘-碘化钾染色后的淀粉粒的区别。 2观察植物细胞的构造 将洋葱表皮临时装片放在低倍镜下观察，可看到许多无色透明的稍长形的细胞，彼此紧密相连，没有细胞间隙。在细胞中，可见到浸埋在细胞质中的圆形的细胞核，如不清晰，可由盖玻片一侧加稀碘液一滴，用吸水纸在另一侧稍吸；使碘液布满整个标本而染色，几分钟后观察，可见细胞质被染成浅黄色，细胞核被染成较深的黄色，细胞各部分显得较为清晰移动装片，选择几个较清楚的细胞置于视野中央，换用高信物镜再仔细观察；注意识别下殉各部分： (1) 细胞壁植物细胞所特有。为细胞的最外层，比较透明。调节细调焦螺旋和光圈、可见两细胞间实际上为三层；，两侧为相邻两个细胞的细胞壁；中间是两个细胞共有的胞间层。 (2) 细胞质：为无色透明的胶状物，紧贴在细胞壁以内，被中央大液泡挤成一薄层，仅细胞两端较明显 (3) 细胞核：埋在细胞质内；贴近细胞侧壁的只见其窄蔺，呈扁圆形，贴在上、下整的可见其宽面，呈球形。仔细观察，可见包在细胞核外面的核膜，细胞核内有13个发亮的颗粒，即核仁。(有的细胞看不见细胞核是因为该细胞被撕破，只剩一半了） (4) 液泡：位于细胞中央，占细胞体积的大部分，由于澈泡内充满细胞液；所以比细胞质更透明。 (二) 植物细胞的后含物 1淀粉粒 （1）切取一小块马铃薯块茎，用刀片刮取少许液汁，置载玻片上，加水一滴，搅匀，盖上盖玻片。先在低倍镜下观察淀粉粒，注意其形状。转换高倍镜继续观察，仔细、准确地分辨单粒，复粒和半复粒，识别淀粉粒中的脐点和层纹。绘图记录。然后取下制片，加一滴稀碘液。观察有何变化，记录观察结果。（2）取少量半夏粉末置于滴加12滴稀甘油的载玻片上，并用解剖针轻轻将粉末与稀甘油充分搅匀，然后加盖盖玻片制成粉末装片，置于镜下观察。（3）按上述方法制成浙贝母粉末装片置镜下观察，与马铃薯淀粉粒进行比较，注意彼此间淀粉粒的大小、形状、层纹、脐点有何不同，找出各自淀粉粒的特征。 2结晶体 (1) 簇晶：取大黄根状茎粉末少许，置于滴加12滴水合氯醛试液的载玻片上，在酒精灯上慢慢加热透化，注意不要蒸干，可添加新的试剂，并用滤纸吸取已带色的多余试剂，直至材料颜色变浅而透明时，停止处理，加稀甘油1滴，盖上盖玻片，拭净其周围的试剂，置镜下观察，可见到许多大型、形如星状的草酸钙簇晶。(2) 针晶：取半夏粉末少许，按上述方法透化后制片观察，在半夏块茎粉末中可见散在或成束的针状草酸钙晶体。偶尔可见到类圆形粘液细胞中含有排列整齐的针束存在。(3) 方晶：取黄柏或甘草粉末少许，按上述方法制片，置镜下观察，在粉末中可见到一些方形、不规则形等形状的晶体。这些方晶常成行排列于纤维旁边的薄壁细胞中，这种由一束纤维外侧包围着许多含有草酸钙方晶的薄壁细胞所组成的复合体成为晶鞘纤维。(4) 砂晶；取地骨皮或牛膝根粉末少许，按上述方法制片，在粉末中可见类圆形薄壁细胞中充满了细小三角形或箭头状的草酸钙砂晶。因砂晶存在于某些薄壁细胞中，将药材研成粉末后砂晶多分散在药材粉末中，而且数量很少，故难以与药材粉末区别。在观察时注意以下几点：砂晶虽然很少，但大小非常均匀。其形状为小的三角形颗粒，立体感较强。在调节微调节器时砂晶常有忽明忽暗的现象，或略比周围粉末亮。若用地骨皮制成徒手切片，观察效果好于粉末制片。(5) 柱晶 取射干粉末少许，按上述方法制片，置镜下观察，可见到棱角分明的长柱形晶体，晶体呈透明状。 三、作业与思考 1. 绘洋葱鳞叶的内表皮细胞，注明细胞各部分。 2绘马铃薯、浙贝母、半夏淀粉粒的构造和类型图。3. 绘制辣椒果肉细胞中的有色体。4. 绘制各种材料、各种类型的草酸钙结晶。 5植物细胞的显微构造主要有哪几部分? 6质体有哪几种类型?它们的结构和功能之间有何关系? 实验二：植物组织的观察(分生、基本/薄壁、保护、机械组织、输导组织)一、 实验目的 （1）掌握分生组织、基本/薄壁的基本特征。 （2）掌握机械组织（厚角组织）的形态特征。 （3）掌握机械组织（厚壁组织：石细胞、纤维）的形态特征。 （4）掌握周皮(木栓组织)和表皮细胞及毛茸的形态特征，气孔的轴式 (类型) （5）掌握导管（管胞）的特征及类型，了解筛管和伴胞。（6）掌握分泌组织和分泌细胞的形态特征。油细胞、油室/分泌腔、分泌道/油管/树脂道、乳汁管 二、仪器用品及实验材料 (一)仪器用品 显微镜，酒精灯，载玻片，盖玻片，刀片，镊子，水合氯醛试液，浓盐酸, 苯三酚试液, 蒸馏水等。(二)实验材料 小麦或洋葱根尖永久纵切片，椴树茎永久横切片，薄荷茎横切面永久制片，大黄、甘草粉末 ，豆芽嫩茎；黄柏，厚朴，薄荷叶，金银花，石韦，豆芽茎。鲜姜（切片，观察油细胞）；小茴香横切面永久制片（观察油管）；丁香粗粉（裂生式油室）；桔梗（纵切片粉末）（观察乳汁管），校园植物叶片。三、实验内容和步骤1. 顶端分生组织的观察取小麦根尖纵切片观察，先在低倍镜观察，首先确定根冠的位置，在位于根冠的位置，在位于根冠之后是一团非常小，排列紧密的细胞，这些细胞就是顶端分生组织。转换高倍镜下观察可以清晰地看到较大的细胞核或正在进行细胞分裂的染色体形态。随着位置不断上下移动，细胞将逐渐增大，开始出现了细胞的分化，通过仔细观察，并比较细胞形态的变化，初步鉴定出原表皮层、基本分生组织和原形成层的大致位置。2. 侧生分生组织的观察在显微镜下观察椴树茎横切片，首先在低倍镜可以明显地观察到微管组织呈环状排列，其中木质部被试剂染成红色，韧皮部被染成绿色，在木质部和韧皮部之间，可以看到几层扁平细胞呈环状排列，细胞略呈切向延长，这就是形成层。转换高倍镜下进一步观察可以清楚地看到，这几层切向延长的扁平细胞排列紧密，细胞壁薄。在大多数情况下，通常将这几层扁平细胞称为形成层，在这个区域不仅有形成层细胞，也包括了由形成层细胞刚刚分生出来的还未分化为木质部和韧皮部的组织，而这些细胞离形成层越近，两者就越难以区别。在茎的最外层有几层略呈扁平的被染成棕红色或红褐色的死亡细胞，细胞壁较厚，排列整齐，无胞间隙，这几层细胞为木栓层细胞。在木栓层内方有13层颜色淡而扁平的细胞就是木栓形成层，木栓形成层以及两侧刚刚分生出未成熟的组织有与维管形成层相似的特征。侧生分生组织细胞多为切线延长，并进行切向分生活动，沿器官的径向增加细胞的层数。可以说明，侧生分生组织活动的结果可以使植物体的轴状器官不断增粗，这种生长方式称为增粗生长。3.薄壁组织的观察观察薄荷茎的横切永久制片，在显微镜下可以看到许多大小不等的维管束呈环状排列于薄壁组织中，这些薄壁组织又可分为外部的皮层和中间的髓部，以及维管束之间的髓射线等。这类薄壁组织除了具有贮藏、输导作用外，还具有填充和使组织间彼此联系等功能，并具有转化为分生组织的可能。4.保护组织的观察（1）腺毛是指可以分泌粘液、树脂、挥发油等物质的毛茸。取金银花花冠的一小片，经水合氯醛透化后制片观察，也可直接取金银花粉末制片观察。看到许多具有多细胞腺头的腺毛，有的腺头呈橄榄球状，有的腺头呈三角形状等，腺柄也由多细胞组成。腺鳞是一种特殊的腺毛，可选用薄荷叶（或唇形科的某一植物的叶）的表皮细胞制片观察，所看到的腺鳞的腺头是由6-8个分泌细胞呈辐射状排列组成，侧面观察为扁球形，具明显的角质层，极短的腺柄由单细胞组成，腺鳞周围的表皮多呈放射状排列。（2）非腺毛是指没有腺头和腺柄的区分，没有腺体，不能分泌物质的毛茸。非腺毛广泛存在于植物体的表面，种类极多，形态变化较大。金银花的非腺毛是由单细胞组成，较长，从基部向上逐渐变细，呈牛角弯曲状；薄荷叶表面的非腺毛是由多细胞组成，也呈牛角状歪曲。这些单细胞和多细胞组成的单列非腺毛是较为常见的类型，多种植物体表面都可以看到。此外也有多种形态和结构更为复杂的类型。取石韦叶片，用刀片刮取叶背面毛茸，加1滴蒸馏水制片观察，可以看到许多放射状星状毛。（3）气孔 植物体的表皮（ 除根表皮外）均有气孔，气孔由两个半月形的保卫细胞对合而成。在保卫细胞周围常有2一多个与表皮细胞形状不同的细胞，为副卫细胞；由于保卫细胞和副卫细胞之间不同的排列关系，双子叶植物的气孔有下列几种类型(撕取叶下表皮制成临时水装片观察)： a. 平轴式；b. 直轴式；c. 环式； d. 不等式e. 不定式。5. 机械组织（1）厚角组织厚角组织可存在于植物的幼茎和叶柄内，特别是棱角处更为多见。厚角组织细胞多为生活细胞，它们的特点是细胞壁呈不均与的增厚，这些细胞壁主要由纤维素组成，细胞壁具