肠道病毒肝炎病毒

常见病毒 病原生物学与免疫教研室 姚佳,第26章 肠道病毒,概念：指由粪-口途径感染，在肠道内增殖，引起全身病变或肠道病变的病毒。 共同的生物学性状 小球形病毒，所有肠道感染病毒均无包膜 核酸为+ssRNA，有感染性 在胞浆增殖，有明显CPE，破胞释放,世界首次有记载的病毒性感染,3000BC， 埃及孟非思壁画中， 长老患小儿麻痹症。,一、脊髓灰质炎病毒,二十面立体对称，无包膜，+ssRNA 分三型，三型之间无交叉免疫,一、生物学特性,对外界因素抵抗力强，污水和粪便中可以存活数月 对酸和乙醚有一定耐受性，对胃酸耐受，因此容易通过胃及十二指肠 对紫外线、干、热、氧化剂敏感，5630min可灭活（不食生食）,二价阳离子能显著提高热稳定性,1.粪口途径传播,2.先在局部粘膜和淋巴结中增殖,3.入血,6.侵入带有受体的靶组织 （脊髓前角细胞，运动神经元等）,4.随血流扩散至全身淋巴组织和易感非神经组织内大量增殖,5.再次入血,90的感染为隐性感染，不出现临床症状，或出现发热、乏力、头痛、恶心等轻微症状 12为非麻痹性脊髓灰质炎或无菌性脑膜炎，颈背部肌肉强直和疼痛 仅约0.1%出现永久性弛缓性肢体麻痹 极少数发展为延髓麻痹，呼吸障碍，心衰，死亡,临床特征,脊髓灰质炎患儿,WHO 宣称在2003年在全球消灭脊髓灰质炎,牢固特异免疫，体液免疫为主 肠道局部sIgA 血液中和性IgG、IgM抗体 中和抗体可长时间维持 3型间交叉保护极弱,免疫性,三、微生物学检查,病原学检查（常做） 标本：粪便或血液 培养方法：加大量抗生素后细胞培养 观察CPE，血清中和试验 抗体检查 取发病初期及恢复期双份血清测定抗体效价，大于等于4倍有诊断价值,四、防治原则 注意饮食，加强粪便管理，保护水源。 人工主动免疫 口服脊髓灰质炎减毒活疫苗， 三价混合疫苗 我国政府规定每年12月5日和1月5日为脊灰疫苗日。,活疫苗 （OPV） 死疫苗 （IPV） 接种方法 口服糖丸（3次） 肌肉注射 抗体产生 血清抗体、分泌抗体 血清抗体 细胞免疫 有 无 间接免疫 能通过接种者粪便 无 排毒免疫更多人群 稳定性 差、不易保存 易保存 副作用 极少数引起VAPP 无 免疫效果 更好 好,脊髓灰质炎两种疫苗的比较,二 柯萨奇病毒,1948年美国纽约州Coxsackie镇 一名疑似脊髓灰质炎的患儿粪便中分离发现 生物学特性： 28nm球形颗粒，分A组（1-23）和B组（1-6） 在肠道增殖，却很少引起肠内疾病。,肠性细胞致病性人类孤独型病毒 不诱发新生乳鼠病变 诱发婴儿腹泻和无菌性脑膜炎等人类疾患,三、埃可病毒 enteric cytopathogenic human orphan virus （ECHO Virus）,四 、新型肠道病毒,1969年以后分离到的肠道病毒的统称 EV68分离自肺炎儿童呼吸道 EV69分离自墨西哥健康儿童肠道 EV70引起急性出血性结膜炎 EV71分离自美国脑炎儿童粪便,引起此类疾病的病毒有20多种，但通常由柯萨奇A组病毒16型（Cox A16）和Cox A10等人肠道病毒感染引起 发热, 不适, 咽喉肿痛, 口腔、手、脚侧面及掌心、屁股出现小泡 传染性极高，病程约1周,手足口病,预防手足口病要牢记五口诀： “洗净手、喝开水、吃熟食、多通风、晒衣被”,球形，大小不等，具双层衣壳（完整） dsRNA病毒，分11节段 衣壳壳粒辐射呈轮状 分AG7组，A组常见,轮状病毒（rotavirus）,A组 婴幼儿（6个月-2岁）肠胃炎最常见病原体，占病毒性肠胃炎发病率的80%以上 B组 成人和较大儿童感染，霍乱样腹泻 C组 感染猪，偶尔也感染人，发病率低 DG组 只感染动物,轮状病毒的分组,粪 - 口途径为主要传播方式 主要保护性抗体为血清中的IgM和IgG及SIgA，对同型病毒有作用 对异型仅有部分保护作用,致病性及免疫性,病毒形态特殊，可用电镜直接检查粪便标本，检出率高 控制传染源，严格消毒，经常洗手 治疗时注意补液；纠正电解质平衡 预防用猴、牛轮状病毒减毒活疫苗，可提供交叉保护,微生物学检查及防治,第27章、肝炎病毒,一组专门侵犯肝细胞，引起病毒性肝炎的病毒。 目前已知的肝炎病毒有7种：即HAV、HBV、HCV、HDV、HEV、HFV、HGV等。我国将其译为甲、已、丙、丁、戊、己、庚性肝炎病毒。 还有一些病毒如巨细胞病毒、EB病毒、黄热病病毒等也可引起肝炎，但不列入肝炎病毒范畴。,病毒性肝炎在中国的流行情况,中国不仅是一个人口大国，而且也是病毒性肝炎的高发区。 目前已知：甲、乙、丙、丁、戊、已、庚及TTV型肝炎，在我国均有发生，其中尤以甲、乙、丙、戊4个型别的流行情况严重。 仅乙肝病毒携带者以达1.2亿之多。可以说，病毒性肝炎是对我国危害最为严重的传染病。,甲型肝炎病毒与戊型肝炎病毒由消化道传播，引起急性肝炎，不转为慢性肝炎或慢性携带者。 乙型与丙型、丁型肝炎病毒主要由输血、血制品或注射器污染而传播，除引起急性肝炎外，可致慢性肝炎，并与肝硬化及肝癌相关。 丁型肝炎病毒为一种缺陷病毒,一、 甲型肝炎病毒,甲型肝炎病毒 甲型肝炎的病原体 甲型肝炎 世界性急性传染病 占病毒性肝炎的50 年发病数超过200万,1973年首次从病人粪便发现HAV 生物学性状与其他肠道病毒相似 1982年国际病毒命名委员会将它分类为小核糖核酸病毒科肠道病毒属72型 1979年Provost和Hilleman用原代狨猴肝细胞和传代恒河猴肾细胞培养病毒成功,（一）生物学特性,1.形态与结构 球形，无包膜，27-32 nm，二十面体对称，基因组为单正链RNA 7个基因型 但抗原稳定 只有一个血清型,HAV电镜图,2.抵抗力 耐受乙醚、氯仿等脂溶剂 耐酸：在pH3的酸性环境中稳定 不耐热：100 5 min可使之灭活 在海水、淡水、毛蚶、泥沙中存活数天至数月,3.培养特性 易感动物： 黑猩猩，狨猴，鹰面猴，短尾猴 细胞培养： Vero、恒河猴胚肾细胞（FRHK-4） 人肝癌细胞株（PLC/PRF/S） 在培养细胞中生长缓慢，无CPE,4.免疫性 HAV抗原稳定，仅有一个血清型 衣壳蛋白VP1、VP2、VP3具有免疫原性，可诱导产生中和抗体,传染源：患者、隐性感染者 传播途径： 粪-口途径传播：污染食物、水源、海产品引起暴发或散发流行 密切接触传播 隐性感染率高 成人HAV抗体阳性率高达70%90%,（二）致病性与免疫性,HAV（污染水源、食物、海产品等）,粪口途径传播,小肠淋巴结中大量增殖,入血并形成病毒血症,肝脏为最终靶器（病毒直接损伤或免疫病理作用，肝细胞变性、坏死）,通过胆汁随粪便排出体外,甲型肝炎的临床特征,肝脾肿大 黄疸（“黄胆”） 转氨酶升高 血胆红素升高 恶心、呕吐、食欲减退、发热 一般为自限性疾病，预后良好，不发展成慢性肝炎和慢性携带者。多见于青少年,免疫力持久 特异性体液免疫： HAV-IgM：在感染早期即出现，维持两个月左右 HAV-IgG：在急性期后期或恢复期出现，可维持多年，对再感染有免疫保护作用,1、标本的采集、处理与保存 血液标本：采集急性期和恢复期血清 粪便标本：发病前2周内采集。 2、检查： 检查核酸：RT-PCR检测HAV RNA 免疫电镜法检测HAV病毒颗粒 。,三、微生物学检查,3、免疫学检测： HAV-IgM检测：早期、快速诊断最可靠的血清学指标。 HAV-IgG检测：主要用于了解既往感染史、疫苗免疫、效果评价或流行病学调查。,1、一般性预防 卫生宣传 保护水源 加强粪便管理 搞好饮食卫生 食源性感染应查厨师的抗HAV-IgM,毛蚶,（四）防治原则,2、特异性预防 减毒活疫苗（我国已广泛使用） 灭活疫苗,3、紧急预防 在接触后1-2周内，肌注丙种球蛋白（剂量，可防止发病。,1963年Blumberg在多次输血的血友病患者中发现澳抗，1968年确定与血清型肝炎高度相关，1970年Dane在电镜下看到具有传染性的42nm病毒颗粒 HBV在亚洲广泛流行，在中国约1.2亿人口携带该病毒，全球约3.5亿,第二节 乙型肝炎病毒,一、生物学特性,乙肝病人体内可检测到三种形态的乙肝病毒颗粒。,小球形颗粒， 为HBV的主要存在形式,1、形态与结构,一般认为小球型颗粒是HBV复制过程中产生的多余衣壳,为串联的小球形颗粒,HBV的管形颗粒,完整的病毒，具有传染性,Dane颗粒,表面抗原的三种形式,内衣壳,DNA多聚酶,大球形颗粒（Dane）：直径42 nm,表面抗原（S蛋白）-HBsAg 外衣壳抗原 中分子蛋白（S2蛋白+S蛋白） 大分子蛋白（S1+S2+S蛋白） 核心抗原 HBcAg 内衣壳抗原 e抗原 HBeAg,2、抗原组成,58,乙肝病毒的基因,基因组长约3.2 kb，为部分双链环状DNA 短链：为正链，长度是长链的50100 长链：为负链，含HBV全部遗传信息 S基因区：编码HBsAg、PreS1、PreS2 C基因区：编码HBcAg、HBeAg P基因区：编码DNA 多聚酶 X基因区：编码HBxAg（X蛋白，与肝癌相关）,（1）、表面抗原 HBsAg,存在于三种颗粒中 共有抗原表位a，互斥抗原表位d/y,w/r，由此分4亚型 HBsAg的检出是感染HBV的标志！（但不能区分是既往感染还是新近感染）,adr,adw,Ayr/Ayw,长江以北,长江以南,新疆、西藏、内蒙等,由于HBsAg在三种类型颗粒中均有，转阴困难，故治疗时不做要求。 HBsAg具有抗原性，对应抗体HBsAb(抗-HBs)具有免疫保护作用，抗-HBs的出现标志着乙肝感染进入恢复期，肝功趋于正常，病情减轻。 抗-HBs仅对同亚型HBV有效,同HBsAg一起表达的还有PreS1和PreS2 PreS1和PreS2抗原性比HBsAg更强，可做新近感染指标，提示HBV复制和传染性强。 对应抗体抗-PreS1和抗-PreS2具有中和作用，能阻断HBV和肝细胞的结合。,PreS1和PreS2,（2）e抗原 HBeAg,HBeAg为可溶性蛋白质，仅存在于Dane颗粒中，可游离存在于血液中 同HBV DNA多聚酶一同表达，为病毒复制及强传染性的指标,抗-HBe（e抗体）,出现时间：随着HBeAg的消失而出现 意义：抗-HBe的出现标志着病毒复制减少、传染性降低 但近年也发现某些突变株在抗-HBe阳性情况下大量增殖，故抗-Hbe不能作为判断预后的指标,（3）、核心抗原 HBcAg,HBV内衣壳成分，仅存在于Dane颗粒内 也可存在于被感染的肝细胞核内、细胞膜表面或者胞浆中，一般不游离，故不易在血液中检出 抗原性极强！,抗-HBc（核心抗原抗体）,为非中和抗体，无保护作用，但可作为检测依据，其中： 抗HBc-IgM：维持时间：618个月 新近感染指标 抗HBc-IgG：维持时间：多年 既往感染者或者慢性感染者,3、HBV的组织培养和动物模型,HBV人工培养尚未成功 用分子生物学技术的细胞培养：将HBV DNA导入肝癌细胞株，HBV的DNA和宿主DNA整合并长期稳定复制，在细胞中表达HBsAg、HBcAg并分泌HBeAg，可以用于HBV的致病机理研究和抗HBV药物的筛选。,HBV感染动物模型：黑猩猩、树鼩,4、抵抗力,乙肝病毒对外界抵抗力“很强” （1）耐低温、干燥、紫外线和一般消毒剂。 乙醇消毒不可用于HBV的灭活 （2）高压蒸汽灭菌、100度10min、0.5%过氧乙酸、3%漂白粉可灭活。 （3）HBV的传染性和HBsAg的抗原性并不一致。上述方法仅能使HBV失去传染性，但仍可保留HBsAg的抗原性。,（二）、致病性与免疫性,1、传染源,传染源为患者和无症状HBV感染者。 HBV潜伏期2-3个月。潜伏期、急性期